分子荧光法测定罗丹明B的含量_第1页
分子荧光法测定罗丹明B的含量_第2页
分子荧光法测定罗丹明B的含量_第3页
分子荧光法测定罗丹明B的含量_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、教 案（四）开课单位：化学及环境科学系课程名称： 分析化学实验专业年级：2006级化学专业任课教师： 分析化学课程组教材名称： 分析化学实验2008-2009学年第 1 学期授课内容实验三 分子荧光法测定罗丹明B的含量 课时安排4学时教学目的要求1.掌握荧光法测定罗丹明B含量的基本原理。2.了解F-4500型分子荧光分光光度计的基本构造和原理，并能简单的操作。教学重点难点教学方法手段教学内容提纲课外学习要求预习下一实验。教学后记实验三 分子荧光法测定罗丹明B的含量一、实验原理罗丹明B在水中是强的荧光物质，并且在低浓度时，荧光强度与罗丹明B浓度呈正比：If=kc基此，测定一系列已知浓度的罗丹明B

2、的荧光强度，然后以荧光强度对罗丹明B浓度作标准曲线，再测定未知浓度罗丹明B的荧光强度，把它代入标准曲线方程求出其浓度。图1 罗丹明B的分子结构二、仪器与试剂1仪器 F-4500型分子荧光分光光度计；1000 mL容量瓶2只，100 mL的容量瓶12支，1 mL的吸量管1支。2试剂 （1）110-2 gL-1的罗丹明B储备液：准确称取1.0000 g 罗丹明B，加用二次蒸馏水定容至100 mL，将此溶液稀释100 倍就得到10-4 gL-1的罗丹明B标准溶液。三、实验步骤1系列标准溶液的配制 取11只100 mL的容量瓶分别加入10-2 gL-1的罗丹明B储备液0，0.10，0.20，0.30，

3、0.40，0.50，0.60，0.70，0.80，0.90，1.00 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。2绘制激发光谱和发射光谱 在300600 nm范围内扫描激发光谱；在400700 nm范围内扫描荧光发射光谱。3绘制标准曲线 将激发波长固定在556 nm，荧光发射波长固定在573 nm处，测定系列标准溶液的荧光发射强度。4未知试样的测定 准确移取一定量110-2 gL-1 的罗丹明B标准溶液于100 mL的容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，配制成未知样品。在标准系列溶液同样条件下，测定未知样品的荧光发射强度。5绘制荧光强度If对罗丹明B溶液浓度c的标准曲线，并由标准曲线求算未知试样的浓度。四、数据处理1.原始数据浓度（10-4 mgmL-1）0123456789x荧光强度扣除空白2.标准曲线绘制和未知样品含量计算。五、注意事项1.罗丹明B的浓度不要太高。2. 实验结束后，检查仪器是否正常，关闭是否正确。六、思考题：1.为什么罗丹明B会发荧光？

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论