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文档简介

1、蛋白质连接技术,蛋白质交联系指将小分子物质（如药物、半抗原等）或大分子物质(如酶、蛋白毒素等)以共价键的方式连接于蛋白质分子，以制备人工抗原、酶标抗体、载体释放药物、抗体导向药物和免疫毒素等。,交联方法,游离氨基 游离羧基 苯基 酚基 巯基 羟基 咪唑基 吲哚基 胍基,重氮化法： 蛋白质 连接分子 酚羟基的邻位、咪唑环、吲哚环 含芳香胺的化合物,副反应多，故一般限于人工抗原的制备,戊二醛法：连接两个伯胺,最温和的交联反应之一，可在440温度范围，pH6.08.0的缓冲水溶液中进行，但是缓冲组份中不得含有氨基化合物，本交联方法易形成相同蛋白间的连接；产物的均二性较差。因此，多用于酶标抗体的制备。

2、,过碘酸盐氧化法：,蛋白质 连接分子 氨基 邻二醇,比较温和，可在常温和中性pH的条件下进行,混合酸酐法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,碳二亚胺法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,由于碳二亚胺的缩合反应没有选择性；易形成蛋白分子间的自身聚合，产生非均一性产物；先将含羧基的药物或半抗原分子与EDC反应，活化羧基后，再加入蛋白反应物，可以减少蛋白分子交联,活泼酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧基,多元酸酐法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基、羟基,二异氰酸酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,偶氮苯甲酸法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 苯基,O羧甲基羟胺法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 酮基

3、,对-肼基苯甲酸法：,叠氮化法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羧酸甲酯衍生物,氯乙酸钠法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 羟基,亚胺酸酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,卤代硝基苯法：,蛋白质 连接分子 氨基、羟基、巯基 氨基、羟基、巯基,Mannich反应法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 酮、酚类,苯醌法：,蛋白质 连接分子 氨基、羟基、巯基 氨基、羟基、巯基,E11man试剂法：,两分子蛋白的连接,E11man试剂即55二硫2，2双硝基苯甲酸(DTNB)，该试剂可以与巯基作用,马来酰亚胺基类活泼酯法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 巯基,SPDP试剂法：,异型双功能交联剂N-羟基琥珀亚胺基-3(2-吡啶基二硫)丙酸酯(SPDP),蛋白质 连接分子 伯氨基 巯基、氨基,苯丁酸氮芥衍生物法：,蛋白质 连接分子 伯氨基 氨基,卤代乙酰衍生物法：,连接基团：氨基、巯基,双马来酰亚胺试剂法：,连接两个巯基,三氯三嗪试剂法：,蛋白质

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