医学微生物学课件：第2篇-第34章 朊粒

1、第34章 朊粒,* 又称朊病毒，是一种由宿主细胞编码的、构象异常的具有自我复制能力的和传染性。* 是人和动物传染性海绵状脑病（TSE）的病原体。,朊粒（prion）,Stanely B. Prusiner 1997诺贝尔生理学或医学奖,Daniel C. Gajdusek 1976诺贝尔生理学或医学奖,生物学性状,朊粒的本质是一种异常折叠的朊蛋白（prion protein，PrP）。异常蛋白在电镜下呈纤维状或杆状（直径为10-20nm），称为羊瘙痒病相关纤维（scrapie associated fibril， SAF）。,PrPC 与 PrPSC,正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人类

2、PrP基因位于第20号染色体，小鼠PrP基因位于第2号染色体。 PrPC与PrPSc由同一染色体基因编码，其氨基酸序列完全一致（253254个氨基酸），根本的差别在于它们空间构象上的差异。,正常情况下，细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC）， PrPC以螺旋为主，对蛋白酶K敏感，无致病性。,PrPC 与 PrPSC,螺旋,折叠,某些条件下，PrPC构型发生异常变化（以折叠为主）形成致病的PrPSc（羊瘙痒病朊蛋白，scrapie prion protein），对蛋白酶K有抗性，具有致病性与传染性。,螺旋,PrPC转变为PrPSC的因素,外源

3、性朊粒的侵入，和体内PrPC结合催化转变为PrPSc，见于传染性朊粒病； 体内PrP基因突变使PrPC结构失去稳定性，自发转变为PrPSc，常见于遗传性朊粒病； 自发性的PrPC异常折叠形成PrPSc，散发性朊粒病。,PrPC与PrPSc的主要区别,人类及动物prion病,* 动物TSE，如： 羊瘙痒病（scrapie of sheep and goat） 牛海绵状脑病（bovine spongiform encephalopathy, BSE）疯牛病 * 人类TSE，如： 库鲁病（kuru disease） 克雅病变种（variant CJD, v-CJD）,传染性海绵状脑病 （transm

4、issible spongiform encephalopathy, TSE）,Prion对理化因素有很强的抵抗力 * 抵抗蛋白酶K的消化作用； * 标准的高压蒸气灭菌（121.3,20 min）不能破坏Prion，需高压蒸气灭菌134、2 h，才能使其失去传染性。 * 对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。,抵 抗 力,* 传染性（TSE）： 如库鲁病、克雅病变种 多种途径传播（消化道、血液、神经及医源性） * 遗传性： 如家族性克雅病，与遗传有关（PrP基因突变） * 散发性： 如散发性克雅病，传播途径尚不明,人类Prion病的传播途径,库鲁病（Kuru disease）,疯牛病，与病

5、牛接触或进食病牛肉是人v-CJD最主要的发病原因。,疯牛病（mad cow disease）,v-CJD病人大脑组织切片：示海绵状病变（左）和淀粉样蛋白沉淀（右）,变异型克雅病（variant CJD，vCJD）,免疫组化法：标本先用蛋白酶K处理破坏PrPC，然后再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测对蛋白酶K有抗性的PrPSc。 Western blotting：目前国际上诊断Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K处理组织标本，电泳后转印至硝酸纤维膜，再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测PrPSc。,病原学确诊-检测致病因子PrPSc,医源性Prion病的预防 对污染物必须彻底灭菌：1mol/L NaOH处理1h，再高压灭菌134，2 h。 BSE及vCJD的预防 禁止用牛羊等反刍动物的骨肉粉作为饲料添加剂喂养牛等反刍动物。对从有BSE的国家进口的牛或牛制品，必须严格地进