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1、细胞生物学习题1,第15题,调节溶液的pH值，使氨基酸的氨基和羧基的解离度相等，即氨基酸的电荷为O，氨基酸在电场中不移动，此时溶液的pH值为氨基酸的等电点，用pI表示。 在等电点时，氨基酸溶解度最小，容易沉淀。,两性解离和等电点,阴 极,阳 极,pH=pI,pHpI,pHpI,带正电荷,带负电荷,净电荷为零,导电率,溶解度,渗透压,粘度,达到最低,等电点时蛋白质的特殊性质,原因:在等电点时，蛋白质分子以双极离子存在，总净电荷为零,颗粒无电荷间的排斥作用,易凝集成大颗粒，因而最不稳定，溶解度最小，易沉淀析出。,电泳分离,沉淀分离,pH=pI 溶解度最小,等电点沉淀与分离,大部或全部沉淀下来,pH

2、pI,仍留在溶液中,蛋白质的分离,沉淀出来的蛋白质可保持天然构象，能再溶解于水并具有生物活性。,等电聚焦电泳,加 酸,加 碱,pI,小,大,pH,高,低,关键是形成pH梯度,18题,27,透析（dialysis）： 通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。,影响酶催化反应的因素 （1）酶浓度的影响,（2）底物浓度的影响,E + S ES P + E,3.4.3.2 米氏方程式,1913年德国化学家Michaelis和Menten推导了米氏方程,Km 米氏常数 Vmax 最大反应速度,Km定义:当反应速度达到最大反应速度一半时，底物的浓度(其单位为浓度单位)。 Km是酶的特征物理常数 用Km的不同可以鉴别不同的酶 Km只与酶性质有关，与酶的浓度无关 Km可以表示该酶与底物的亲和力 Km大表示该酶与底物的亲和力小 Km小表示该酶与底物的亲和力大 天

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