耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响.ppt_第1页
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1、耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响,目的:通过观察耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠耳蜗组织中c AMP的含量及PKA表达的影响,探讨耳聋左慈丸对老年性耳聋的作用机制。材料与方法:选取75只耳廓反应灵敏的雄性清洁级昆明小鼠,随机抽取15只作为空白对照组,腹腔注射生理盐水。,剩余60只进行老年性耳聋小鼠造模,腹腔注射D-半乳糖(150mg/kg),每日1次,共60天。造模结束后,将剩余达标的模型小鼠随机分为模型组、耳聋左慈丸低、中、高剂量组。,选用生理盐水灌服模型组和空白对照组,耳聋左慈丸低、中、高剂量组给予耳聋左慈丸(0.3、0.6、1.2g/kg)灌服,每日1次,连

2、续14天。运用耳蜗基底膜铺片技术观察小鼠耳蜗毛细胞形态学变化;采用ELISA法检测耳蜗组织中c AMP含量;用免疫组织化学技术检测PKA的蛋白表达水平;用RT-PCR技术检测PKA m RNA表达水平。,结果:1.小鼠一般情况的观察空白对照组小鼠:进食饮水正常,反应灵敏有活力,毛发浓密有光泽,经过长时间的饲养体重明显增加,二便正常。模型组小鼠:进食饮水量减少,衰老现象严重,D-半乳糖造模起明显作用,体质虚弱,体重减轻,宜静不宜动,毛发枯槁无光泽并有稀疏脱落现象,出现脊背隆起,精神状态欠佳等老年貌。,易于抓取。耳聋左慈丸低、中、高剂量组小鼠:经过灌胃治疗后,与模型组比较各组小鼠上述情况均有不同程

3、度改善,以高剂量组改善最为明显,小鼠情况更接近空白对照组。,2.耳蜗形态学观察基底膜铺片空白对照组小鼠:耳蜗内、外毛细胞,清晰可见,细胞大小一致,排列层次分明,界线清晰均匀分布,各层细胞基本无缺失;与空白对照组相比模型组小鼠耳蜗铺片有显著差异,耳蜗内、外毛细胞排列不整齐,分布紊乱,形态大小不一,存在严重的缺失或脱落;与模型组相比耳聋左慈丸治疗各组小鼠耳蜗有所改善,内、外毛细胞排列较整齐,分布较均匀,毛细胞缺失不明显,其中高剂量组与模型组比较差异明显。各组小鼠耳蜗组织匀浆中c AMP含量检测结果:与空白对照组相比,模型组小鼠耳蜗组织匀浆中的c AMP含量显著降低(P低剂量组小鼠耳蜗组织中c AMP含量升高不明显,与模型组比较无统计学差异。,4.耳蜗组织PKA的蛋白表达水平各组小鼠耳蜗组织PKA蛋白表水平检测结果:与空白对照组相比,模型组小鼠耳蜗组织的PKA含量显著降低(P0.01)。,3.耳蜗组织中c AMP含量结论:在老年性耳聋发生过程中伴随着c AMP含量及PKA表达水平的变化。给予耳聋左慈丸药物干预后,其耳蜗组织中c AMP的含量及PKA的表

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