医学微生物学真菌学.ppt

1、Fungus,真菌学,卜相索，男，要求治疗一种“ 顽固”的皮肤病。他诉说两大腿内侧起皮肤病已数月，经搽过几种皮质类固醇激素软膏治疗，不但没有效果，皮疹反而扩大，病情日益加重。局部涂或服用抗生素也没有什么效果。经检查发现患者两大腿内侧对称分布大块潮红的斑疹，边缘尚清楚，隐约可见小部分隆起成堤状。,真菌的定义,真菌是一大类具有细胞壁和真核结构，不分根、茎、叶，以寄生或腐生方式存在于自然界中，能进行有性或无性繁殖的低等生物。其中一部分为单细胞，大多数为有分枝或不分枝的菌丝体及孢子组成的多细胞微生物。,一、概 况,真菌的特点,真核细胞型微生物； 部分为单细胞，大多数为多细胞； 繁殖方式多样，能进行有性

2、或无性繁殖； 以寄生或腐生为营养方式；,真菌的结构,有典型的细胞核和完整的细胞器。 由细胞壁、细胞质膜、细胞质和细胞核组成。,特点：1、细胞壁：几丁质； 2、无叶绿素； 3、无根、茎、叶的分化；,分布广泛，种类繁多 多数有益，少数有害 目前真菌病呈明显上升趋势 抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂滥用 器官移植、介入性治疗等新型技术的开展 艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病致免疫 力低下,2019年据CBS新闻报道，一种名为耳念珠菌的多重耐药性真菌近日在美国多地爆发，截至2月底，全美已有587例确诊病例。耳念珠菌的来源目前还不明确，近50%的感染者会在90天内身亡，感染者会有发高烧症状，并伴随各种器官衰

3、竭、呼吸衰竭等表现。目前，也有国内媒体报道，中国确诊18例超级真菌感染。,真菌与细菌的不同,二、生物学特性,1. 形态：多种多样； 分类：单细胞和多细胞真菌 2、单细胞真菌： 圆形或卵圆形,酵母型真菌,无菌丝， 母细胞以牙生方式繁殖 菌落与细菌的菌落类似,类酵母型真菌,以牙生方式繁殖 有假菌丝：牙生孢子继续延长不分裂不与母细胞脱离，产生较长的细胞链，深入培养基方式繁殖,酵母菌/类酵母菌,3、多细胞真菌： 孢子(spore)：真菌的生殖结构，由生 殖菌丝生产 菌丝(hypha)：孢子生出嫩芽称为牙 管，管逐渐延长成丝，称为菌丝,霉菌或丝状菌,菌丝按功能分：,营养菌丝,生殖菌丝,气中（生）菌丝,4

4、、菌丝体(mycelium)： 菌丝可长出很多分枝，交织成团,菌丝按结构分,无隔菌丝：为多核单细胞。,（致病性接合菌）,菌丝可有螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状和梳状等多种形态，故菌丝的不同形态，有助于鉴别真菌。,菌丝按形态分,螺旋状菌丝 结节状菌丝,球拍状菌丝 破梳状菌丝,鹿角状菌丝,竹节状菌丝,5.孢子,生殖结构：具有繁殖作用的真菌结构。,5.1有性孢子,由同一菌体或不同菌体上的两个细胞融合而成。（非致病性真菌） 有性孢子类型： 1、休眠孢子囊； 2、卵孢子； 3、结合孢子； 4、子囊孢子； 5、担孢子；,5.2 无性孢子,分生孢子：菌丝转化而来。,类型：大分生孢子和小分生孢子,类型有：1、

5、芽生孢子； 2、厚膜孢子； 3、关节孢子；,大分生孢子,小分生孢子,生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成；也可从菌丝侧面出芽形成,上图：芽生孢子,中图：厚膜孢子,下图：关节孢子,菌丝体细胞出芽生成,由菌丝内胞浆浓缩和胞壁增厚形成,由菌丝体细胞分化形成长方形节段链状排列，胞壁增厚形成,孢子囊孢子,毛霉菌示意图,由菌丝末端形成一种囊性结构,最适宜pH46 最适宜温度2228、37,6.真菌的培养特性,营养要求不高，一般细菌培养基上可生长，检查时常用 sabouraud(沙保 ) 培养基。,繁殖方式：有性繁殖和无性繁殖（芽生、 裂殖、芽管和隔殖）,6.真菌的培养特性,酵母型菌落,丝状菌落,酵母型菌落,隐球

6、菌菌落,是单细胞真菌的菌落形式，菌落湿润，柔软而致密。,假菌丝由菌落向下生长，深入培养基中。,类酵母型菌落,假菌丝,白色假丝酵母菌菌落,丝状菌落,绒毛状 棉絮状 粉末状,是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。,霉菌和酵母菌培养特征的区别,双相性：有些真菌因环境条件的改 变，而两种形态的互变。,7.变异性,8.真菌的抵抗力,对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有较强抵抗力。 不耐热：60 1小时可杀灭菌丝和孢子。 2%石炭酸、2.5%碘酊、0.1%升汞和10%甲醛较敏感。 抗真菌的抗菌素：灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素和克霉素。,三、真菌的致病性,1. 致病性真菌感染：主要为外源性真菌 2.

7、 条件致病性真菌感染：内源性真菌 3. 真菌超敏反应性疾病： 性质分：感染性和接触性超敏反应 部位分：皮肤、呼吸道和消化道超敏反应,三、真菌的致病性,4. 真菌性中毒症：摄入真菌或真菌毒素引起 急、慢性中毒症 真菌代谢产生毒素 5. 真菌毒素与肿瘤：如黄曲霉毒素,四、真菌的免疫性,1. 天然免疫（非特异性免疫）: 皮肤粘膜屏障作用； 正常菌群间的相互拮抗作用（如白假丝酵母菌）； 吞噬作用（中性粒细胞和巨噬细胞） 2. 获得性免疫（特异性免疫）： 体液免疫 细胞免疫, 浅部真菌感染：,五、真菌的感染类型, 深部真菌感染：,侵犯皮肤及其附属器官 （毛发、爪甲）,侵犯皮下组织、内脏器官及中枢神经系统

8、,侵犯特定器官、组织。,疾病一开始就侵犯深部组织或病变从局部开始进一步发展，侵犯各脏器、组织形成感染灶。 真菌败血症（fungemia）, 全身性真菌感染：, 局限性真菌感染：, 细胞构造方面； 高分子毒素方面； 真菌的粘附能力，真菌抑制免疫系统功能，及胞壁中的酶类。,真菌致病机理,第36章 主要病原性真菌,一、浅部（表面）感染真菌 二、皮肤癣真菌 三、皮下组织真菌感染 四、机会性治病真菌,一、表面感染真菌,位置：寄居于人体皮肤和毛干的最表层。不 接触组织细胞，少引起宿主细胞反应。 症状：皮肤表面出现花斑癣（汗斑）,秕糠马拉癣菌,二、皮肤癣真菌,皮肤癣真菌是一类主要引起皮肤浅部感染的真菌，具嗜

9、角质性，只侵犯角化的表皮、毛发和指（趾）甲，由真菌增殖及代谢产物刺激宿主引起一系列病理反应。,1 皮肤癣真菌的特点,侵犯部位：嗜角质蛋白，角化的表皮， 毛发，指（趾）甲。 病理变化：由真菌增殖及代谢产物刺 激宿主引起。 症状：皮肤癣，特别是手足癣。 种类：毛癣菌、表皮癣菌、小孢子癣 菌。,一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变； 相同部位的病变也可由不同的皮肤癣菌引起；,致病特点：,脚癣,手癣,股癣,黑点癣,白癣,脓癣,皮肤癣菌可在沙保培养基上形成丝状菌落，其菌落形态、颜色及大小分生孢子可作为皮肤癣菌初步鉴定的依据。,玫瑰色毛癣菌菌落,玫瑰色毛癣菌 大分生孢子,絮状表皮癣菌菌落,絮状表皮癣菌 厚膜孢

10、子,石膏样小孢子菌菌落,石膏样小孢子菌 大分生孢子,10%KOH 菌丝（皮屑与甲屑） 皮肤、指（趾）镜检 甲屑或病发 菌丝和孢子（病发）,2 微生物学检查法,1、传统的癣药水和目前市面上较多的唑 类药物对足癣疗效甚佳； 2、内服药物适用于角化过度型足癣或有 较广泛癣病者；,3 治 疗,治疗注意事项： 疗程要足。 防止癣病再感染。,为腐生真菌，存在于土壤和植物中； 经创伤部位侵入人体皮下组织； 一般感染只限于局部，也可播散到其他器官引起深部感染； 主要有：着色真菌和孢子丝真菌,三、皮下组织真菌感染,分类相近，引起临床症状相似的一些真菌的总称。 侵犯颜面、肢体皮肤 病损皮肤暗红色或黑色 着色真菌病

11、：下肢、脚外伤处侵入丘疹结节 疣状 or 菜花状疤痕形成 肢体橡皮肿 卡氏枝孢霉和裴氏着色芽生菌。,1 着色真菌,着色芽生菌橡皮肿,微生物学检查 镜检：厚壁孢子、棕色菌丝 培养：生长缓慢，数月后形成暗棕色 or 黑色菌落镜检： 棕色有隔菌丝 、分生孢子（树枝形、剑顶形、花瓶形）,2申克孢子丝菌 (Sporotrix schenckii),腐生性、双相型 培养： 沙保弱培养基（25）：灰褐色皱膜状菌落 含胱氨酸血平板（37）：芽生方式形成酵 母型菌落 形态特征：有隔菌丝，成群梨形小分生孢子,申克孢子丝菌小分生孢子（400）,感染途径： 1、皮肤接触：染菌土壤或植物 2、经口或呼吸道侵入 疾病：

12、孢子丝菌性下疳(sporotrichotic chancre) 孢子丝菌侵入皮下组织、淋巴管，形成亚急性或慢性肉芽肿，使淋巴管出现链状硬结。,孢子丝菌下疳,微生物学检查 直接镜检： 梭形 or 圆形孢子 分离培养 黑褐色菌落，有皱褶 分枝状,有隔菌丝、梨状小分生孢子,四、条件致病性真菌,白色假丝酵母菌 曲霉 毛霉 卡氏肺孢菌 新生隐球菌,深部真菌：侵犯表皮及其附属器官以外的组织和器官。多为病原性真菌或机会致病性真菌, 俗称白色念珠菌 单细胞真菌 条件致病菌 引起皮肤、黏膜、内脏的急性 或慢性炎症（念珠菌病）,1.白假丝酵母菌,1.1生物学特性： 圆形、卵圆形、出芽方式繁殖 +有假菌丝。,白假丝

13、酵母菌菌落,白假丝酵母菌的假菌丝和厚膜孢子 （1000）,白假丝酵母菌的孢子（1000）,念珠菌性甲沟炎,鹅口疮,婴儿泛发性皮肤念珠菌病,肾脏白念珠菌感染,食道白念珠菌感染,可有脑膜炎、脑膜脑炎和脑脓肿等,1.直接镜检：圆形或卵形芽生孢子 假菌丝 2.分离培养 沙保弱培养基：乳白色酵母样菌落 镜下所见：假菌丝 成群的卵圆形芽生孢子 3.鉴别和鉴定 芽管形成试验 厚膜孢子形成试验: 检查致病力 动物试验,1.2 微生物学检查,标本 （痰、脓、脑脊液等）,Gram染色,镜检 （芽生孢子、假菌丝）,荧光显微镜下观察血清培养的白假丝酵母菌芽管形成,快速显色培养基,侵袭深部组织和内脏以及全身的真菌。 外

14、源性感染，致病性较强，引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡和坏死。 代表：新生隐球菌。,主要致病性真菌深部真菌感染,属于隐球菌属。隐球菌属种类繁多，在自然界分布广泛，鸽粪中大量存在。人因吸入鸽粪污染的空气而感染，特别是免疫功能低下者引起肺脑的急性/亚急性/慢性感染。,2.新生隐球菌,形态特征：圆形酵母样细胞 外周有厚荚膜 繁殖方式：芽生，无假菌丝 菌 落：酵母型菌落 荚膜多糖：A/B/C/D 4个血清型 临床：AD型,荚膜,2.1 生物学特性：,非致病性隐球菌无荚膜,新生隐球菌菌落,新生隐球菌形态 （1000）,致病性: 隐球菌病（cryptococcosis） 感 染：外源性（多数） 内源性（少数）

15、致病物质：荚膜多糖 感染途径：呼吸道 所致疾病：肺部感染 播散感染：最易侵犯CNS，预后不良,引发肺和脑的急性、亚急性或慢性感染。,隐球菌肺炎 X线显示右肺中野有大片阴影,2.2 微生物学检查法 1.直接镜检（墨汁涂片法）： 圆形菌体，透明的肥厚荚膜 2.分离培养 培养：沙保弱培养基，25或37，25d 菌落：酵母型菌落， 镜检：圆形或卵圆形菌体，无假菌丝 3.其它检查方法：胶乳凝集试验 荧光抗体技术 尿素酶试验,新生隐球菌-直接镜检（痰）,脚癣,手癣,股癣,黑点癣,白癣,脓癣,着色芽生菌橡皮肿,孢子丝菌下疳,肾脏白念珠菌感染,食道白念珠菌感染,可有脑膜炎、脑膜脑炎和脑脓肿等,总结：真菌的微生物学检查法,标本： 浅部感染真菌：毛发、皮屑、指甲 深部感染真菌：痰、血液、脑脊液等,直接镜检: 浅部标本-KOH处理后镜检 假丝酵母菌-革兰染色（假菌丝、厚膜孢子） 隐球菌-墨汁负染（厚荚膜）,真菌的形态和结构有一定的特殊