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文档简介
1、实验11 植物的组织培养,实验目的: 1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用,快速繁殖,植物组织培养技术有何意义?,我国用花药培养法先后培育出优质高产的经济作物、粮食和蔬菜等新品种,广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。 借助于组织培养生产人工种子,解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。,生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如:紫杉醇,生物碱、紫草素等。 转基因植物的培育 植物去病毒,基础知识回顾 (一)植物组织培养的基本过程 1.细胞全能性 2.细胞分化的概念; 3.离体植物细胞的脱分化和再分化。,植物组织培养的基本过程,基础知识回顾 (二)影响植物组织培养的因素
2、 培养基配制 外植体的选取 消毒接种 培养 移栽和栽培等。,1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 3、不同植物激素使用顺序和使用量,影响植物组织培养的因素,4、消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境原因: 5、pH、温度、光照 菊花: pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h,植物组织培养用的培养基,含有植物生长发育所需
3、要的各种营养物质,这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上,细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,而且它们会产生毒素,使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此,植物组织培养要想取得成功,必须有效地防止细菌等的污染,保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求,就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。,实验材料用具,培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜和橡皮圈、有棉球的广口瓶、酒精灯、三角漏斗、培养皿 MS培养基 萘乙酸、苄基腺嘌呤 发芽培养基 生根培养基,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,
4、生芽,栽 培,实验过程,移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,生根,此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物体的光能自养。,在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一个个体的演变过程。,1、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?,2、培养过程中为什么需要进行光照,思 考,?,1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,3、在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?,4、激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响。,5、激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响,结果分析与评价,(一)对接种操
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