过敏原

过敏原血清学检测,目录,一.过敏原概述二.过敏原常见方法学比较三.欧蒙过敏原产品特性及印迹法的特点四.过敏原体外检测常见问题及解答,一、过敏原概述,1906年von Piguet提出了allergy一词。其概念为：机体对抗原刺激产生的一种“改变了反应性”的状态。这种状态可能是保护性的，即产生了免疫力；也可能是破坏性的，即产生了超敏反应。超敏反应是机体对某抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。,过敏原,吸入过敏原食物过敏原接触过敏原输注过敏原,空气中的吸入过敏原 (例如. 植物花粉, 动物毛发, 室内灰尘或虫螨等),过敏原,通过胃肠道吸收 (例如. 鱼、肉、蛋、 坚果和蔬菜等),吸入过敏原食物过敏原接触过敏原输注过敏原,过敏原,皮肤接触（例如：金属饰品、化妆品和生活日用品等）,吸入过敏原食物过敏原接触过敏原输注过敏原,过敏原,直接输入体内 (例如：昆虫或动物的毒液, 注射类药品等),吸入过敏原食物过敏原接触过敏原输注过敏原,过敏的损害,过敏是以损害粘膜为主要表现的过敏性结膜炎（眼粘膜） 过敏性鼻炎（鼻粘膜） 过敏性哮喘（气管粘膜） 过敏性紫癜（皮肤粘膜） 过敏性肠绞痛（肠粘膜） 过敏性紫癜肾炎（肾内粘膜） 心脏有粘膜组织，心脏是肯定会受到损 。心肌酶升高，特别是特异性的CK-MB（肌酸激酶同工酶 ）。 CK-MB分布在心肌和结缔组织。心电图表现主要是心肌膜的损害，表现为传导阻滞。,1.皮肤科（30）：急慢性荨麻疹、异位性皮炎等2.耳鼻咽喉科（30）：以过敏性鼻炎为主3.内科（25）：以哮喘、过敏性肺泡炎为主4.小儿科（15）：儿童变态反应病的诊治5.变态反应专科（参考范围 可能存在过敏反应 16岁,100 IU/ml,总IgE ELISA: 结果解释,总IgE 超出参考范围大多数是由于过敏反应导致例外: 寄生虫病; 免疫抑制; HIV; 重度烧伤 临床相关特异性IgE结果与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床过敏反应的可能性就越大.,总IgE ELISA: 结果解释举例,特异性 IgE总IgE,特异性 IgE5 IU/ml (kU/l)总IgE 200 IU/ml,患者1,特异性 IgE5 IU/ml (kU/l)总IgE 25 IU/ml,患者2,总IgE ELISA: 总结,简单和快捷的实验操作低检出限 (1IU/ml)高重复性 (批内实验: 5%) 通过4份标准品计算定量结果标准品采用WHO标准通过ELISA工作站实现自动分析,特异性 IgE,EUROLINEALLERCOATTM6,DP 3713 E 吸入性及食物性过敏原,特异性 IgEEUROLINE,简便和快捷的实验操作仅需少量样本 (过夜温育)结果基于广泛应用的EAST分级系统与 Pharmacia CAP具有良好的相关性自动温育 通过EUROLineScan程序实现结果的自动判读,特异性IgE分级标准及临床意义,特异性 IgEEUROLINE 血清温育,颜色反应,色原,底物,膜条,抗原提取物,温育,60 min 二抗反应,10 min 底物温育,AP标记二抗,清洗 3 x 5min,清洗 3 x 5min,自动化判读或肉眼观察,60 min未稀释,过夜1:11 稀释,EUROLINE检测系统,结果判读: EUROLineScan,特异性 IgE欧蒙印迹法自动化,欧蒙印迹法过敏原谱,中欧吸入儿童吸入食物特应性交叉反应儿童昆虫毒液,亚洲中国吸入中国食物中国特应性韩国吸入1 + 2韩国食物1 + 2东南亚吸入东南亚食物,地中海中东地中海吸入中东吸入中东食物Inhal. Screen AEFood Screen AE海湾吸入海湾食物,特异性 IgE 欧蒙印迹法各种组合,为不同过敏原组合提供可能: 在一条膜条上包被36种以上过敏原 大约170种以上过敏原 满足新过敏原组合的需要: 市场信息反馈 目标过敏原的定位和其它参数确认 提供特殊过敏原的原材料 提供阳性血清,二、过敏原常见方法学比较,既往病史皮试: 刺试, 抓试, 皮外试, 皮内试实验室检查: IgE检测 CAST (细胞抗原刺激实验)激发试验: (金标准) - 鼻腔激发试验 - 双盲稳定剂控制的食物刺激试验 (DBPCFC),二、过敏原常见方法学比较,二、过敏原常见方法学比较,体外诊断的优势,对患者来说不存在风险 尤其适合5岁以下儿童，可避免强烈的皮肤反应 与其它皮肤病区别 不需附加其它药物 适合无法进行皮试的食物过敏原的检查,二、欧蒙过敏原产品特性及印迹法特点,同类产品中单一膜条内过敏原数量最多不添加任何增效剂针对中国人设计的过敏原对患者来说不存在风险不需停止服用抗组胺药物独家包被有CCD指示带，解释交叉反应的假阳性结果所有厂家中样本使用体积最小（100ul）快速测试过敏原，整个实验完成仅需要2.5-3小时,欧蒙过敏原体外诊断的优势,同类产品中单一膜条内过敏原数量最多,可一次检测20大项，30小项过敏原,不添加任何增效剂,现在有些产品为了增大反应强度，在产品中添加增效剂，加大了反应强度。导致了判定结果与临床有不符现象。欧蒙产品不添加任何增效剂，本着科学、实事求是的精神真实、准确的判定实验结果。,针对中国人设计的过敏原,过敏原采集于中国，提高特异性检出率DP3713-1601E（中国组合）针对中国人设计的组合,对患者来说不存在风险,无痛检测：通过血清中IgE抗体与过敏原结合，测试过敏反应避免了人体与过敏原直接反应导致的风险,用点刺针穿过液滴，轻轻刺入皮内,将可疑致敏物质敷贴于患者皮肤上,斑贴试验,点刺试验,不需停止服用抗组胺药物,以往过敏原检测需要患者体检停止服用抗组胺药物。以便提高试验的准确性。 欧蒙过敏原检测试剂无需患者停止服用抗组胺药物。（常用的有苯海拉明、异丙臻、扑尔敏、赛庚啶、息斯敏、特非拉丁等 ）,独家包被有CCD指示带,独家包被有CCD指示带，解释交叉反应的假阳性结果CCD是“交叉反应性碳水化合物决定因子”CCD存在于多种植物性或动物源性的过敏原中，由于结果相似性导致一些独特的交叉反应出现CCD的检测对于患者提示：虽然对于某些过敏原没有临床症状，但是在过敏进程中对有些具有交叉反应的过敏原可能会有改变，所以对于患者又针对性的预防交叉过敏反应，有着重要的临床指导意义。,欧蒙印迹法的特点,一次可以检测多项过敏原8-20项，常见食物及吸入组合，如葎草，艾蒿，豚草，常见树花粉，霉菌，尘螨， 猫毛，狗毛，蟑螂，鸡蛋，牛奶，鱼，虾，蟹，花生，大豆等。适合体检筛查。采血量少100-1000微升血清可以检测多项，特别适合儿童患者。性价比高一次可得到多种过敏原信息谱。适合各类人群一定范围内脂血、溶血、黄疸血清或血浆样本对检测结果无影响。,有配套仪器软件可以省时省力全自动操作，判读软件，2.5h出结果。无需暗室孵育。半定量可以直接获得结果可以直接用肉眼判读，也可以用欧蒙配套软 件判读。EAST 分级并有数字及单位结果。易于保存原始数据结果样式可灵活设计。结果可转为excel 表，方便科研。,欧蒙印迹法的特点,四、过敏原体外检测常见问题及解答,Q1:为何患者sIgE结果阳性与临床表现不符,过敏原-特异性 IgEEUROLINE 产品调整,提供CCD检测指标,何谓 CCDs?,CCD 是“Crossreactive Carbohydrate Determinants（交叉反应性碳水化合物决定子）”的英文缩写. 该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。依据糖基化作用的不同而产生不同的结构。,举例: MMXF (Man1-6(Man1-3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-4 (Fuc1-3)GlcNAc),CCDs 在自然界中的存在?,CCDs 存在于多种植物性或动物源性的过敏原中。由于结构的相似性导致一些独特的交叉反应出现。,典型含CCD结构的过敏原: 植物花粉 植物性食物 植物乳胶 昆虫毒液,抗CCD IgE 结果的临床价值?,大部分糖蛋白仅含有一个IgE结合的多聚糖，因此无法促进结合有IgE抗体的肥大细胞表面受体形成二聚体化，进而无法活化肥大细胞发生脱核及释放组胺的作用，因此对于仅为抗CCD IgE抗体阳性的患者而言往往无临床症状的表现。,在何种情况下应排除抗CCD IgE 的干扰?,当体外实验结果与临床症状或皮试结果不符的情况下.当某一患者出现多个特异性IgE结果阳性时举例: 花生: 特异性 IgE 阳性但并不表现出临床症状出现多个食物相关的阳性结果但缺乏临床症状表现.植物乳胶: 针对花粉敏感的患者抗植物乳胶阳性，但无相关接触史。 昆虫毒液: 针对蜜蜂和马蜂特异性IgE阳性的患者可能存在交叉反应。,Q2:如何解释总IgE结果与sIgE结果不符,解释1:总IgE浓度与sIgE水平并不存在必然相关性,约20-30%超敏疾病患者特异性IgE可能较高，但总IgE可维持正常，甚至低于几何均值。 如患者仅对牛奶高度过敏，其特异性IgE为18kU/L。对于特异性IgE而言，该结果已属于严重过敏（IV级）的范畴。从理论上讲，该患者的总IgE也应该为18kU/L。而对于总IgE来说，这个结果是很低的；总IgE升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总IgE也不总是一定升高。这一要点在评价总IgE检测结果时非常重要。,结果解释1、不同批号产品所使用过敏原提取物的