气相色谱仪培训教程

气相色谱仪应用培训,2018/05/19,主要内容,气相色谱的分离原理,3,GC利用物质的沸点，极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离,气相色谱与液相色谱的比较,4,GC& LC-流动相,GC,LC,气体（载气）种类少对分离结果影响不大参数优化较简单成本低,液体种类多对分离结果贡献大参数优化稍难成本高,5,GC& LC-固定相,GC,LC,选定一种载气，然后通过改变色谱柱 (即固定相)以及操作参数(柱温和载气流速等)来优化分离。,选定色谱柱后，通过改变流动相的种类和组成以及操作参数(柱温和流动相流速等)来优化分离。,6,GC& LC-分析对象,GC,LC,可挥发、热稳定沸点 500 占已知化合物中2025%,除可直接GC分析的化合物，其余原则上可用LC分析,7,GC& LC-检测技术,GC,LC,热导检测器(TCD)火焰离子化检测器(FID)电子俘获检测器(ECD)氮磷检测器(NPD) 其中FID对大部分有机化合物均有响应，且灵敏度相当高，最小检测限可达纳克(ng)级,紫外-可见光吸收检测器(UV-Vis)示差折光检测器(RID)。荧光检测器（FLD）蒸发光闪射检测器（ELSD）,8,GC& LC-制备分离,GC,LC,气体馏分容易除去但柱容量小应有有限可用填充柱进行,制备LC应用广泛,9,气相色谱的组成,10,组分能否分开，关键在于色谱柱；分离后组分能否鉴定出来则在于检测器，所以分离系统和检测系统是仪器的核心。,气路系统,柱系统,气源 高压钢瓶气体发生器气路控制系统 控制阀电子气路控制,柱温箱温度程序实现的基础当被分析组分的沸点范围很宽时，以等温的方法进行色谱分析就很难得到满意的分析结果，此时宜采用程序升温的办法。色谱柱填充柱和毛细管柱,11,填充柱与毛细管柱的比较,12,毛细管柱,特点无固体填料，气阻比填充柱小可以采用较长的柱管和较小的内径，以及较高的载气流速既没有涡流扩散，又减小了纵向扩散造成的谱带展宽。较薄的液膜又在一定程度上抵消了由于载气流速增大引起的传质阻力增大。,13,缺点柱容量小，进样量小，对进样技术要求更高。载气流速的控制要求更加精确对检测器的灵敏度要求更高,长度,直径,涂膜厚度,分流和分流比,14,分流比 = 分流流量/柱流量,进样系统,进样口/气化室自动进样/手动进样顶空进样,15,过程:自动加热使汽液两相达到平衡。将液面上气体注入到气相色谱并实现分离。,顶空进样器什么时候采用?,需要定量分析挥发性有机物时样品不适合直接进样时想要最少的样品前处理时想要提高分析效率痕量化合物 / 低浓度,检测系统,17,FID 火焰离子化检测器,工作原理:在火焰燃烧处和收集极（电极）上加一电压 ,有机物都在火焰中燃烧(2000F)。在电极之间产生离子化介质和电子。带电粒子被收集极吸引和捕获。离子流被放大和记录。FID检测器的响应:离子数目正比于碳原子数目(C-H键).一些官能团如羰基(CO=)、羟基(OH）、卤素（X）、胺（NH4+）则很少或根本不会离子化。对无机气体如H2O, CO2, SO2, 和Nox不灵敏。,18,检测器温度应比柱温箱设定的最高温度高30，且大于150以防止水凝结在检测器上。,ECD 电子俘获检测器,工作原理射线粒子使载气离子化: N2 + N2 + e-在电场中生成的正离子和电子向两极移动形成基流。当电负性样品进入后即捕获慢速低能量电子使基流下降形成信号。e- + sample current loss对卤素、过氧化物、醌类金属有机物及硝基化合物非常灵敏。 而对胺类、醇类及碳氢化合物不灵敏。,19,不论是否使用ECD检测器，一定要有补充气通过检测器。,TCD 热导检测器,工作原理利用被测组分和载气的热导系数不同而响应浓度型检测器,几乎对所有物质均有响应。有测量臂和参考臂两部分，当进样后，测量臂中是载气和组分的混合物的气体，参考臂中是纯的载气，两边的热导系数不一样而得到组分的响应。,20,NPD 氮磷检测器,FPD 火焰光度检测器,NPD对氮磷化合物灵敏度高，专一性好，专用于痕量氮磷化合物的检测。,主要用于含硫、磷化合物、特别是硫化物的痕量检测。近年也用于有机金属化合物或其他杂原子化合物的痕量检测。,21,MSD 质谱检测器,(1)联用 即将GC和MS通过接口联接起来，GC将复杂混合物分离成单组分进入MS进行检测或鉴定。(2)常规气相色谱检测器 自80年代初出现小型或台式GCMS(benchtop GCMS)后，特别是进入90年代，由于适于GCMS的应用与日俱增，MS外形尺寸变小、成本和复杂性下降，以及稳定性和耐用性的提高,已使它成为常规气相色谱检测器之一。称为质谱检测器。 优点：既可对未知化合物定性，又可对痕量组分定量。它灵敏度高、使用范围广。,22,不同检测器可测定的化合物,23,不同检测器安装时气体的要求,24,气相色谱的应用,25,药物分析中的应用实例-1,1）原料药中有机溶剂残留的检测色谱条件：色谱柱：聚乙二醇毛细管柱（30 m0.32 mm，1m）气化室温度：200检测器温度：250 柱温：起始为30，维持4分钟，再以30/min升至 205 并维持7分钟载气：氮气进样量：1l检测器：FID溶剂：二甲亚砜,26,例1：雷公藤内酯 原料中石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷和氯仿残留测定,药物分析中的应用实例-2,2）成分含量测定色谱条件：色谱柱：聚乙二醇毛细管柱（30m0.32mm，1m）气化室温度：200检测器温度：250 柱温：起始为80，维持2分钟，再以10/min升至110，30/min至180，维持2min载气：氮气溶剂：20乙醇的水溶液,27,例2：芙莱克森（Flexogan）纳米乳软膏透皮接收液中樟脑，薄荷脑含量测定,对照品图,接收液图,主要内容,认识我们的GC,Pictures of PE Clarus 600,29,Clarus 600 coupled with HS-16,30,GC主机,31,顶空进样部件,32,样品盘,传输线,手动进样和自动进样,33,主要内容,触摸屏的使用,35,开机和方法调用,开启载气，打开仪器电源开关，仪器自检完成后，仪器显示如左图画面，按Log in进入仪器状态画面。按屏幕显示方法开始加热各部分温度，当所有部分都达到设定值后，屏幕显示“ READY ”即可进样分析。,36,按Tools 键，选择Method Editor菜单，进入方法编辑。在方法编辑里面，可以打开，编辑，存储，删除，激活方法。在方法编辑页面下，点击要设置的项目，如进样口，柱温箱，检测器。设置相应的参数，存储并激活该方法。,37,Atten：衰减倍数 1， 2， 4，64 软件 -6，-5，-4，0,38,39,顶空进样器触摸屏的使用,40,几个温度：进样口传输线 取样针炉温 中间间隔最好在10以上 几个时间： 加压时间：13 min 进样时间：0.050.1 min 拔针时间：0.20.5 min 保温时间：2045 min GC循环时间：分析时间加至少 0.5 min一个压力：顶空压力比GC柱头压至少高57 psi,连接顶空时GC主机触摸屏：tools-配置-进样口-连接顶空进样,Total chrom软件的使用,41,推荐使用方法, 将气体钢瓶打开，打开电脑主机，然后打开仪器电源。待仪器自检完成后，登陆，按屏幕显示方法加热各部分温度，达到设定值后，屏幕显示“Ready”。启动GC工作站，编辑新方法或调用已有方法、报告模板和样品序列表。 进入setup画面，确定后联机。成功后工作站的仪器状态成绿色。点击触摸屏“开始”键或工作站“Run”键运行序列表进行样品分析。 使用顶空进样器时，只能使用触摸屏“开始”键运行,42,关机步骤, 将各进样口Injector Oven 设为 Off，Detector Oven 设为Off，将柱温箱设为30，保持载气流量（可编辑一方法运行）。 等到进样口，检测器温度均低于70，柱温箱降到40以下。关闭GC主电源。关闭各钢瓶气。,43,常见问题及注意事项,Attention,44,气相色谱对气体的要求,高纯氦(氮) 纯度：99.999% 减压表输出压力范围0-0.6 Mpa高纯氢 纯度：99.995% 减压表输出压力范围0-0.6 Mpa压缩空气：无油, 无水, 无烃, 减压表输出压力范围0-0.6 Mpa,45,触摸屏上显示PPC SHUTDOWN ，软件不能控制仪器.应该如何处理？,仪器主机具有自我保护功能.如果某项参数长时间达不到要求，仪器就会报警并关闭所有加热及气路模块.这时软件将不能控制仪器.退出软件并重起GC主机可以解决此问题.,46,进样口,47,1.各种类型的进样口，在哪里可以看到？,返回,在触摸屏上可以看到CAP（普通毛细柱进样口），PSS（可编程毛细柱进样口）PKD（填充柱进样口）,2.色谱柱柱头压，流速哪里可以看到？,返回,3. 分流流量哪里可以看到？在哪里可以实测？,返回,前侧进样口分流,后侧进样口分流,色谱柱的安装,51,色谱柱的安装,安装毛细管柱需要用到的工具注意石墨压环的方向,返回,色谱柱两端采用的螺母和石墨压环不一样.,进样口端应该留多长：不同的进样口不一样（测量时到螺母的末端）,检测器端的尺寸从哪里开始计算？ 色谱柱尖端到螺母的末端,在触摸屏里有长度的详细纪录,返回,不同检测器的长度纪录,5.如何切割毛细柱.（切割要求：尖端要平齐）,检测器,59,1. 如何确认FID已经点着火呢？,在触摸屏上选择范围为1（不要选20 ）观察火焰的基流信号，非0.0x mv时就算点着了.,2.为什么FID点不着火呢？,氢气和空气流量设定不合适：正确流量氢气45 空气450最好实际测量一下氢气和空气流量点火线圈是否亮：有无红色,3.为什么只有基线，没有色谱峰,可能火焰没点着.自动调零不合适，基线跑到软件记录线以下了（去掉软件中的自动调零可以解决）,返回,4.实际测量氢气和空气的流量需要的工具,返回,5.没有进样的状态下为什么会出现很多杂峰？,问题可能来自好几个方面：进样口，色谱柱，检测器为了使问题简单化：将检测器用封堵堵上采集信号，判断杂峰是不是来自检测器.如果检测器没有问题，可以更换一根色谱柱来判断是不是色谱柱流失.清理进样口后采集信号，判断是否进样口污染.,顶空进样器,65,注意事项,顶空进样器插入进样口