第20章衣原体

医学微生物学医学微生物学2衣原体衣原体南南 华华 大学医学院微生物学教研室大学医学院微生物学教研室吴移吴移 谋谋 教授教授重 点 与 难 点 重点：1.生物学性状原体、始体、包涵体的概念、原体与始体的比 较2.主要病原性衣原体(1) 沙眼衣原体分型及其所致疾病(2) 肺炎嗜衣原体与 鹦鹉热 嗜衣原体所致疾病难 点：1.人 类 致病衣原体的致病性与致病机制2.致病衣原体的微生物学 检查定 义 ：衣原体 一 类严 格真核 细 胞内寄生，具有独特 发 育周期，并能通 过细 菌 滤 器的原核 细 胞型微生物， 归 属于 细 菌学范畴 。第一 节 概 述共同特性 ： 有 细 胞壁， 革 兰 阴性 ，呈 圆 形或 椭圆形 ， 具有独特的 发 育周期， 类 似 细 菌的二分裂方式繁殖 。 有 DNA和 RNA， 含核糖体；具有 严 格的 细 胞内寄生性 ， 对 多种抗生素敏感。衣原体科衣原体属 (3个种 )沙眼衣原体鼠衣原体猪衣原体嗜衣原体属 (6个种 )肺炎嗜衣原体鹦鹉热嗜衣原体兽类嗜衣原体流产嗜衣原体猫嗜性衣原体豚鼠嗜性衣原体分 类 ：四种衣原体的性状比 较性 状 沙眼衣原体 肺炎嗜衣原体 鹦鹉热 嗜衣原体 兽类 嗜衣原体自然宿主 人、小鼠 人 鸟类 、低等哺乳 动物 牛、羊原体形 态 圆 形、 椭圆形 梨 形 圆 形、 椭圆 形 圆 形基因 组 (bp) 1,044,459 1,230,230 1,169,374 1,106,197G+C (%) 41 44.2 40 41.3 39.3DNA同源性（同种不同菌株 间 ） 90% 90% 14% 95% 88% 100%血清型 19 1 8 3质 粒 + （ N16株除外） + +噬菌体 + + +Pmp基因 9 21 10 ？注： Pmp： Polymorphic membrane proteins（多形 态 膜蛋白）（一） 发 育周期与形 态 染色一、生物学性状原体（ Elementary body, EB） ： 呈球形、 椭圆 形或梨形，直径 0.2 0.4 m， 是 发 育成熟的衣原体。具有 强 感染性，在宿主 细 胞外 较稳 定，无繁殖能力。Giemsa染色呈紫色， Macchiavello染色呈 红 色。网状体 （ Reticulate body， RB) ，亦称始体（ initial body） ： 圆 形或 椭圆 形， 直径 0.5 1.0 m， 无 细 胞壁，代 谢 活跃 。 网状体是衣原体 发 育周期中的繁殖型，不具感染性 ， Macchivello染色呈 蓝 色。性 状 原 体 始 体大小（ m） 0.2 0.4 0.5 1.0 细 胞壁 -代 谢 活性 - 胞外 稳 定性 -感染性 -繁殖能力 - RNA:DNA 1:1 3:1细 胞毒性 -原体和始体的比 较衣原体的 发 育周期（二） 培养特性鸡 胚接种 ： 6 8日 龄鸡 胚卵黄囊 中 繁殖，感染后 3 6天 致 鸡 胚死亡，并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体 颗 粒。组织细 胞培养 ： 可在 HeLa、 McCoy或 HL等 细 胞中生 长 良好 ， 可将接种有 标本的 细 胞离心以促使衣原体穿入 细 胞 。 属特异性抗原： 位于 细 胞壁的共同抗原， 为脂多糖， 类 似于 G-菌的脂蛋白 -脂多糖复合物，可用 补 体 结 合 试验检测 。（三） 抗原 结 构 种特异性抗原：大多数衣原体种特异性抗原位于主要外膜蛋白（ major outer membrane protein, MOMP）上，可用 补 体 结 合 试验 和中和 试验鉴别 不同种衣原体 。 型特异性抗原：根据 MOMP可 变 区氨基酸序列的不同，可将每种衣原体分 为 不同的血清型或生物型（ biovar） 。 衣原体耐冷不耐 热 ， 60 仅 能存活 5 10min；在 -60 感染性可保持 5年，液氮内可保存 10年以上，冷 冻 干燥保存 30年以上仍可复 苏 。 对 常用消毒 剂 敏感，紫外 线 照射可迅速 灭 活。 四 环 素、 氯 霉素、 强 力霉素和 红 霉素等抗生素有抑制衣原体繁殖的作用。 （四） 抵抗力 能 产 生 类 似 G-菌内毒素的毒性物 质 ，能抑制宿主 细 胞代 谢 ，直接破坏宿主 细 胞。 MOMP能阻止吞噬体与溶 酶 体融合，表位易 变 异，在体内可逃避特异性抗体的中和作用而 继续 感染 细 胞 。 热 休克蛋白（ HSP）能刺激机体巨噬 细 胞 产 生TNF-、 IL-1、 IL-6等炎症性 细 胞因子 。二、 致病性与免疫性（一） 致病性产 生特异性 细 胞免疫和体液免疫，以 细胞免疫 为 主 。但免疫力不 强 ，且 为时 短暂 ，因而易造成反复感染、持 续 性感染或 隐性感染。 （二） 免疫性第二 节 主要病原性 衣原体沙眼衣原体的 发现1956年， 汤飞 凡等首次分离培养出沙眼衣原体， 结 束了半个多世 纪 关于沙眼病原的争 论 。他是世界上 发现 重要病原体的第一个中国人。生物分型沙眼生物型（ Biovar trachoma）性病淋巴肉芽 肿 生物型（ biovar lymphogramuloma venereum, LGV）一、 沙眼衣原体(一 ) 生物学性状1. 形 态 染色 原体 为圆 形或 椭圆 形， Giemsa染色呈紫 红 色。原体能合成糖原，故被碘溶液染成棕褐色。 网状体核 质 分散， Giemsa染色 为 深 蓝 或暗紫色。2. 血清学分型 根据 MOMP表位氨基酸序列的差异，将沙眼衣原体分 为 19个血清型 。沙眼生物型 ： 4个血清型 （ A、 B、 Ba和 C）生殖生物型： 11个血清型（ D、 Da、 E、 F、 G、H、 I、 Ia、 J、 Ja和 K ）LGV生物型 ： 4个血清型 （ L1、 L2、 L2a和 L3）。(二 ) 致病性与免疫性1.所致疾病（ 1）沙眼通 过 眼 -手 -眼途径直接或 间 接接触 传 播。由 A、 B、 Ba和 C血清型引起。早期流泪 ， 后期 结 膜瘢痕、 睑 内翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜 损 害，影响 视 力或致盲 。（ 2） 包涵体 结 膜炎由 B、 Ba、 D、 Da、 E、 F、 G、 H、 I、 Ia、 J、 Ja及 K血清型引起。 婴 儿 结 膜炎： 引起急性化 脓 性 结 膜炎（包涵体 脓 漏眼） ，不侵犯角膜，能自愈；成人 结 膜炎：可 经 两性接触、 经 手至眼或 污 染的 游泳池水感染，引起 滤 泡性 结 膜炎，又称游泳池 结 膜炎，一般 经 数周或数月痊愈，无后 遗 症。（ 3）泌尿生殖道感染沙眼生物型 D K血清型引起 ， 男性多表 现为 非淋菌性尿道炎，并可合并附睾炎、前列腺炎、直 肠 炎等 ； 女性表 现为 尿道炎、 宫颈 炎、 输 卵管炎与盆腔炎等。（ 4） 婴 幼儿肺炎生殖生物型 D K血清型均可引起 婴 幼儿肺炎。侵犯男性腹股沟淋巴 结 ，引起化 脓 性淋巴 结 炎和慢性淋巴肉芽 肿 ，常形成瘘管；亦可侵犯女性会阴、肛 门 、直 肠 ，引起会阴 -肛 门 -直 肠组织 狭窄。（ 5）性病淋巴肉芽 肿2.免疫性以 细 胞免疫 为 主。沙眼衣原体型 别 多，且 MOMP易 发 生 变 异，病后建立的免疫力不持久。1.直接涂片 镜检 取 结 膜或 宫颈 刮片， Giemsa或碘液及 荧 光抗体染色 镜检 ， 观 察上皮细 胞 浆 内有无包涵体 。沙眼衣原体感染 宫颈 刮片 图片（ 荧 光染色）沙眼衣原体包涵体的 镜下形 态 （碘染色）(三 ) 微生物学 检查 法2. 分离培养取感染 组织 的渗出液或刮取物，接种于 鸡 胚卵黄囊或 传 代 细 胞，再用 IFA或 ELISA检测 培养物中的沙眼衣原体。3. 衣原体抗原与核酸 组 分 检测 ELISA： 检测 沙眼衣原体 LPS和 MOMP的 PCR和LCR（ 连 接 酶 链 反 应 ）等 扩 增技 术检测 沙眼衣原体DNA。1.预 防重点是注意个人 卫 生，避免直接或 间 接的接触 传 染。2.治 疗药 物 选 用 强 力霉素、 罗红 霉素、阿奇霉素、加替沙星等 。3.目前尚无有效的沙眼衣原体疫苗， MOMP是其主要候 选 抗原。由于 MOMP的多型性，其疫苗不易 对 所有型 别 沙眼衣原体都 产 生保 护 性，故增加了 MOMP作 为 疫苗的 难 度。(四 ) 防治原