精制益母草生物碱对兔心肌缺血血流动力学的影响.doc精制益母草生物碱对兔心肌缺血血流动力学的影响.doc

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科生毕业论文(设计)1精制益母草生物碱对兔心肌缺血血流动力学的影响摘要目的探讨益母草注射液对心肌缺血血流动力学的作用及其机制。方法新西兰白兔48只平均分成假手术对照组,心肌缺血模型组,益母草注射液高剂量组,益母草注射液中剂量组,益母草注射液低剂量组,硝酸甘油033MG/KG阳性药物对照组,在左冠状动脉前降支近第一分支处结扎建立心肌缺血模型,检测兔冠脉结扎后10分钟和60分钟药物对各项指标的影响。结果益母草注射液高剂量组兔冠脉结扎后10分钟和60分钟心率减慢,MAP下降,CO降低,LVSP降低,LVEDP升高,RPP下降均十分明显P001,优于硝酸甘油组。当胶原诱导聚集时,益母草注射液中剂量组和益母草注射液高剂量组的血小板聚集率明显低于模型对照组;当ADP诱导聚集时益母草注射液各剂量组的血小板聚集率明显低于模型对照组;当AA诱导聚集时,益母草注射液各剂量组的血小板聚集率与模型对照组相比也有降低趋势。结论益母草生物碱具有良好的抗心肌缺血作用,其机制与其明显改善心肌梗死后心脏的血液动力学低下状况,抑制血小板聚集作用有关。关键词益母草;心肌缺血;血流动力学科生毕业论文(设计)2THEEFFECTOFHERBALEONURIINJECTIONONTHEHEMODYNAMICOFRABBITHEARTMUSCLEISCHEMIAABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEEFFECTOFHERBALEONURIINJECTIONONTHEHEMODYNAMICOFRABBITHEARTMUSCLEISCHEMIAANDITSMECHANISMMETHODDIVIDED48RABBITSINTOSHCONTROLGROUP,MIANALOGGROUP,HDHERBALEONURIGROUP,MDHERBALEONURIGROUP,LDHERBALEONURIGROUPANDNITROGLYCERINCONTROLGROUPAMODELOFMYOCARDIACISCHEMICINJURYWASESTABLISHEDTODETECTTHEEFFECTOFHERBALEONURIINJECTIONONTHEINDEXESOFRAMUSDESCENDENSANTERIORARTERIAECORONARIAESINISTRAEDELIGATIONTREATEDWITH10MINAND60MINRESULTSTHEHDHERBALEONURIINJECTIONGROUPDECREASEDHEARTRATE,MAP,CO,LVSP,LVEDPANDRPPOBVIOUSLYANDBETTERTHENNITROGLYCERINCONTROLGROUPWHENPLATELETAGGREGATIONDERIVNEDBYCOL、AAANDADP,THERATEOFPLATELETAGGREGATIONLOWERTHENANALOGCONTROLGROUPCONCLUSIONSHERBALEONURIALKALOIDSHOWEDPROTECTIVEEFFECTSAGAINSTMYOCYTESISCHEMIC,ITSMECHANISMSPROBABLYASSOCIATEWITHIMPROVINGBLOODKINESICSINDEXANDRESTRAINTINGPLATELETAGGREGATIONKEYWORDSHERBALEONURI;HEARTMUSCLEISCHEMIA;HAEMODYNAMICS科生毕业论文(设计)3前言心肌缺血是心血管疾病的常见病理改变。心脏的缺血性疾病具有发病急、进展快、危害大的特点。心肌缺血可引起心肌代谢功能障碍和结构损伤,持续性的心肌缺血可导致心肌坏死,并可进一步导致心律失常、心力衰竭12。治疗和保护缺血心肌是目前心血管疾病防治研究的热点之一34。增加心肌供血、减少心肌耗能是药物抗心肌缺血的基本原则5。当前治疗心肌缺血的主要药物有硝酸酯类、Β肾上腺素受体阻滞剂、钙通道拮抗剂等,均通过扩张冠脉,改善心脏和全身的血流动力学,增加心肌供血、减少心肌耗能的达到治疗目的167。益母草,神农本草经原名茺蔚,为唇形科益母草属植物益母草LEONURUSHETEROPHYLLUSSWEETLEONURUS的全草,我国大部分地区都有分布,具有来源广、常规剂量无毒副作用的特点,是我国药用植物最早、最普遍的一种89。中医药文献记载其功用为活血、祛瘀、调经、消水,素有“血脉圣药“经产良方”之称10。现代药理研究,益母草具有扩张冠脉、增加冠脉血流、溶栓、抗凝、降脂、降血黏度、降低红细胞聚集、抑制血小板聚集、改善微循环、抗氧自由基、减少细胞内钙超载、兴奋子宫、利尿等诸多作用,从而为其用于临床提供了广泛的药理学基础111213。益母草的主要化学成分有生物碱类,二萜类,黄酮类,挥发油类,微量元素等等,其中生物碱类一直被认为是益母草的有效成分,用作质量控制的指标1415。针对益母草类制剂在抗心肌缺血临床运用方科生毕业论文(设计)4面的不足,本研究组已按照中药注射剂研究的技术要求和中药新药制备工艺研究的技术要求16171819,通过不同现代中药提取方法的研究比较,筛选出益母草生物碱注射液最佳提取工艺,制备出静脉注射用针剂。本课题旨在按中药注射剂研究的技术要求和中药、天然药物研究技术指导原则开展益母草注射液的临床前药效学研究,探讨益母草注射液的抗心肌缺血作用及其机制,为开发新型具有抗心肌缺血或心血管保护作用的临床用药奠定基础。1实验材料11实验试剂和仪器111实验材料注射用益母草生物碱自制,本研究组已按筛选的最佳工艺,从益母草粗粉中分离纯化出益母草生物碱。硝酸甘油注射液,每1ML含硝酸甘油5MG,由广州明兴制药厂生产,生产批号050505。戊巴比妥钠(购自中国医药集团上海化学试剂公司提供,批号20020915)。09氯化钠注射液由北京双鹤药业股份有限公司生产,批号03072212。二磷酸腺苷(ADP)二钠盐由中国科学院生物化学研究所生产,批号030906,用生理盐水配制成10MM/L的溶液,4℃保存备用。花生四烯酸AA为FLUKAAG产品,临用时用10MM/LNAOH配科生毕业论文(设计)5制成钠盐,浓度为50G/L。胶原(100UG/ML)KOKEN公司产品。112试验动物新西兰白兔48只,2022KG,4月龄,雌雄各半。动物置于符合中国实验动物质量国家清洁级标准的实验室中饲养,室温2025℃,相对湿度5570。113仪器FA1004型电子天平为上海天平仪器厂产品;SDZA1型体外血栓形成仪,江苏无锡县电子仪器厂生产;LBYNJ2型血小板聚集仪,北京生化仪器厂产品;PCLAB3808八通道生物医学信号采集处理系统,北京微信斯达科技发展有限责任公司。12实验方法121实验分组新西兰兔48只,雌雄各半,随机分为共6组,每组8只,组间兔体重、雌雄无显著性差异。(1)假手术对照组予开胸手术后,不予其它处理。(2)心肌缺血模型组予以左冠状动脉前降支结扎,造梗阻性心肌缺血模型,方法见后。(3)益母草注射液高剂量组予以左冠状动脉前降支结扎和益母草注射液100MG/KG静脉滴注。科生毕业论文(设计)6(4)益母草注射液中剂量组予以左冠状动脉前降支结扎和益母草注射液20MF/KG静脉滴注。(5)益母草注射液高剂量组予以左冠状动脉前降支结扎和益母草注射液04MG/KG静脉滴注。(6)硝酸甘油阳性药物对照组予以左冠状动脉前降支结扎和硝酸甘油033MG/KG静脉滴注。122兔心肌缺血模型的建立静注戊巴比妥钠30MG/KG麻醉,气管切开插入导管机械呼吸;以针形电极插入四肢皮下连续监测标准Ⅱ导联心电图;股动脉置管监测动脉压。再经胸骨正中入胸腔,暴露心脏,分离升主动脉,以多普勒测定升主动脉血流即心排出量。在左冠状动脉前降支近第一分支处穿引无损伤缝合线。心尖处用20G动脉穿刺针直接穿刺并固定,连接于动脉测压的同一换能器,以三通转换监测动脉血压和左室压。操作完成后平稳20MIN。各预处理组分别开始与益母草注射液或阳性对照药静脉滴注处理。将置于左冠状动脉前降支近第一分支处的缝合线套以小橡皮管,收紧橡皮管使血流中断,供血区心肌颜色转为暗紫,心电图示ST段弓背向上抬高大于05MV,证实心脏局部缺血形成,维持60MIN后放血处死动物。123心脏血液动力学检测用PCLAB3808八通道生物医学信号采集处理系统检测动物HR(心率)、MAP(平均地脉压)、CO(心输出量)左室收缩压LVSP、左室舒张末压LVEDP和心率收缩压乘积RPP。科生毕业论文(设计)7124血小板凝集率的检测硅化注射器穿刺耳中动脉取血,38%枸橼酸钠溶液抗凝血抗凝剂91,200RMIN离心8MIN,取上清部分即富血小板血浆PRP,剩余部分2200RMIN离心10MIN,取上清部分即贫血小板血浆PPP。PRP中血小板计数为40105/MM3左右。按照BORN’S比浊法,将盛有200ULPRP及1小磁棒的比浊管置于LBYNJ2血小板聚集仪中,接通聚集仪电源,使之预热15MIN,同时调节聚集仪恒温旋钮,使其恒温在3701℃。分别取PRP及PPP各450GL于比浊管中,置于预热孔内,恒温孵育5MIN3701℃。测定时用PPP管调零,在搅拌情况下加入诱导剂诱导聚集。所用诱导剂的终浓度为ADP476UMOL/L、AA7820UMOL/L、胶原40MG/L。根据仪器自动打印出来的聚集曲线及最大聚集率分析药物对血小板聚集的影响。最大聚集率计算公式为聚集后PRP透光度聚集前PRP透光度最大聚集率100PPP透光度聚集前PRP透光度125资料的统计和分析所有数据以均数标准差表示,用SPSS130统计软件进行方差和相关分析。P005为有显著性统计学差异。
编号:201311211641140187    类型:共享资源    大小:135.84KB    格式:DOC    上传时间:2013-11-21
  
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