08抗体分类鉴定试验 (凝聚胺法)

东莞常平医院 血库 文件编号： DGCPH-BK-SOP-08 版序：2005-1 抗体分类鉴定试验 （凝聚胺法） 页码：第 1 页，共 3 页 原理 凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应， 再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞 间的距离缩短。距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成 免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的 复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。如没有 免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。抗体分类鉴定是用于鉴定患者血清 （浆）中存在的具有临床意义的红细胞异体抗体种类。 试剂组成 1抗体分类鉴定红细胞 2凝聚胺试剂： *1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。 *2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。 *3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。 *4 阳性对照血清：含抗 D 血清，氯化钠及稳定剂。 试剂保存和稳定性 1筛检红细胞，凝聚胺试剂须保存在 2-8。 2有效期内可使用。 标本收集和准备 抽取受血者静脉血 3-4ml（操作中小心防止红细胞破损） ，放入一已贴标 签干燥洁净的试管中为血清管。待标本凝固后离心分离血清使用。 以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品， 且输用时间超过 12 小时的，必须重新采集标本。 东莞常平医院 血库 文件编号： DGCPH-BK-SOP-08 版序：2005-1 抗体分类鉴定试验 （凝聚胺法） 页码：第 2 页，共 3 页 操作步骤 1取出 10 支干燥洁净小试管分别标记测试（1） 、 （2）（10）： 测试（1）：加入被检血清 2 滴，再加入 3-5%鉴定红细胞（1）1 滴。 测试（2）：加入被检血清 2 滴，再加入 3-5%鉴定红细胞（2）1 滴。 测试（10）：加入被检血清 2 滴，再加入 3-5%鉴定红细胞（10）1 滴。 2各加入*1 低离子介质溶液 0.6ml，轻轻混匀，于室温下静置 1 分钟。 3再滴入 2 滴*2 凝聚胺溶液，轻轻混匀，于室温下静置 15 秒。 43400rpm 离心 1 分钟，然后把上清液倒掉，管底保留大约 0.1ml 的液体。 5目测红细胞有无变成凝块，如果没有凝块，则必须重做， （请看注意事项 6） 。重做后仍然没有凝集现象出现，可能试剂失效。 6各滴入 2 滴*3 复悬液，并轻轻混匀，观察结果。若为凝聚胺引起的非免 疫性凝集，应该在 1 分钟内散开抗体鉴定结果为阴性；若是异体抗体所 引起的免疫性凝集，则不会散开，抗体鉴定结果为阳性。 结果判断 若抗体鉴定结果为阴性，即对应于该鉴定红细胞抗原的抗体为阴性。 若抗体鉴定结果为阳性，即对应于该鉴定红细胞抗原的抗体为阳性。可再 进一步对该抗体进行鉴定。 质量控制和附注 1试剂超过有效期或有污染现象出现，必须更换。 2检验人员必须熟悉操作步骤，尤其是凝聚胺所引起的凝集反应，更要特 别注意。 3在冬天气温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清（浆）中 可能含有寒冷凝集素等因子而导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，请 再滴入 2 滴*3 复悬液，将试管立即置入 37 C 水浴中轻轻混匀，并在一分 钟内观察结果。 东莞常平医院 血库 文件编号： DGCPH-BK-SOP-08 版序：2005-1 抗体分类鉴定试验 （凝聚胺法） 页码：第 3 页，共 3 页 4如果不凝集，可能是标本中含有肝素。如洗肾病人的标本或其他干扰存 在，此时需多加 2-4 滴*2 凝聚胺溶液以中和肝素或