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文档简介

临床微生物学检验题目 一、单选题 1.下列检查中除哪项外均可用于霍乱的诊断:E A.大便悬滴法检查 B.大便碱性蛋白胨水培养 C.大便涂片革兰染色 D.霍乱血清凝集试验找特异性抗体 E.血培养找霍乱弧菌 2.近年来发现对痢疾杆菌较敏感的抗菌药物为:D A.卡那霉素 B.庆 大霉素 C.SMZ D.氟喹诺酮类 E.氨苄 青霉素 3.在钩端螺旋体病血清学试验中,国内以下列哪种试验有较高的特异 性和敏感性:A A.显凝试验 B.炭凝试验 C.红细胞凝集试验 D.红细胞溶解试验 E.补体 结合试验 4.乙脑患者早期的特异性诊断检查:E A.腰穿检测脑压 B.脑 脊液化验检查 C.头颅CT检查 D.补体结合试验检测乙脑IgG抗体 E.酶联 免疫吸附试验,检测乙脑IgM抗体 5.流行性斑疹伤寒的实验室诊断方法常选:C A.血常规 B.病原体接种分离 C.外斐反应 D.立克次体凝集试验 E.补体 结合试验 6.血清流行病学调查时,若需要长期保存血清应置于:D A.4冰箱 B. 8冰箱 C. 10冰箱 D.20冰箱 E.以上都不对 7.用于血清流行病学调查的静脉采血量一般为:E A.1ml以下 B.1 2ml C.2 3ml D.35ml E.5ml以上 3 8.能长期或永久保存血清的温度条件是:E A.4 B.-10 C.-20 D.-40 E.-70 9.志贺菌属中,下列哪一项不正确:E A.在普通琼脂平板上生长形成中等大小、半透明的光滑型菌落 B.K抗原 为型特异型抗原 C.O抗原 为群特异性抗原 D.分解葡萄糖,产酸不产气 E.分解乳糖,产酸产气 10.宋内氏志贺氏菌有两个变异相,急性患者分离的菌株一般是:A A.相 B. 相 C. 相或 相 D.相和相 E.以上都不对 11.有关细菌培养基的描述,哪项是不正确的:B A.按物理状态可分为液体、固体和半固体三 类 B.SS培养基属于鉴别培养基 C.血 琼 脂平板属于营养培养基 D.蛋白胨水为常用的基础培养基 E.庖肉培养基属于厌氧培养基 12.新从病人分离的肠道杆菌菌落是:B A.R型 B.S型 C.R或 S型 D.R和 S型 E.以上都不对 13.接种立克次体的鸡胚应置于下列哪一个温度的孵卵箱中孵育:A A. 3235 B. 37 38 C. 38 39 D. 3940 E. 40 41 14.用吉姆尼茨染色法染色立克次体时加石炭酸复红染色液一般需要 :C A. 1分钟 B. 2分 钟 C. 5分 钟 D. 10分钟 E. 15分 钟 15.最早采用的检测方法为:B A. 分离培养 B. 直接涂片镜检 C. 血清学 试验 D. 动物试验 5 E. 电镜检查 16.下列哪种细菌的最适生长温度为25:C A. 肠炎沙门菌 B. 空肠 弯曲菌 C. 假结 核耶尔森菌 D. O157:H7大肠杆菌 E. 宋内志 贺菌 17.常用琼脂扩散试验的琼脂浓度为:B A.0.30.5% B.1 2% C.3 4% D.56% E.7 8% 18.宋内志贺菌:D A. 快速发酵乳糖 B. 为B群 C. 包括 10型 D. 培养中常出现扁平的粗糙型菌落 E. 为A群 19.下列哪一项是痢疾志贺菌的特性:A A. 可产生志贺毒素 B. 只有 1型 C. 迟缓发 酵乳糖 D. 有15个型 E. 培养中常出现扁平的粗糙型菌落 20.测定HIV 感染的最简便方法是下列哪一个:A A. 测定HIV抗体 B. 分离 HIV病毒 C. 测定 HIV抗原 D. 测定HIV核酸 E. HIV基因测序 21.庆大霉素培养基适用于培养何种细菌:C A. 鼠疫杆菌 B. 布鲁 氏菌 C. 霍乱弧菌 D. 白喉杆菌 E. 奈瑟氏菌 22.HBV的抗原成分中哪一种与病毒的中和性作用有关:B A. HBvAg B. HBsAg C. HBcAg D. HBeAg E. HBuAg 23.甲型肝炎实验室诊断方法主要依赖于检测患者血清中的下列哪种 成分:C A. 抗HAV的IgA 7 B. 抗HAV的IgG C. 抗HAV的IgM D. 抗HAV的IgD E. 抗HAV的 IgE 24.沙门菌属在普通平板上的菌落特点为:A A. 中等大小,无色半透明 B. 针尖状小菌落,不透明 C. 中等大小,粘液型 D. 针尖状小菌落,粘液型 E. 扁平粗糙型 25.立克次体病原学检查,脏器组织和节肢动物可做切片检查,切法要 求越薄越好,一般不超过:A A.34微米 B.7 8微米 C.10 15微米 D.2025微米 E.30 40微米 26.做补体结合试验前血清加热灭活以破坏它所含有的补体,通常羊 血清用下列哪一个温度灭活:B A. 48 B. 58 C. 68 D. 78 E. 88 27.在CFT 反 应中为了查Ag,常常降低反应温度,称为冷CFT,冷CFT 反应温度通常是:E A. 37 B. 18 C. 24 D. 30 E. 4 28.当进行抗球蛋白试验查不完Ab时,其中一个重要 试剂是第二Ab , 在抗球蛋白试验中第二抗体是:A A. 双价抗体 B. 单价抗体 C. IgE抗体 D. 半抗体 E. IgD抗体 29.在CFT 反 应中有5种成份:Ag、被检血清、补体、溶血素和SRBC,C FT反应 中补体的作用是:E A. 特异性结合 B. 指示 剂 C. 抑制 剂 D. 中和作用 E. 非特异性结合 30.在进行免疫血清学检查时进行Ag- Ab反应,进行此反应有许多影响因素,一般 Ag- Ab反应中无电解质时:B 9 A. 敏感性下降 B. 不反 应 C. 敏感性上升 D. 反应正常 E. 提高特异性 31.某菌属的一个血清群只有1个血清型,诊断时需同时含有相和 相抗血清,这一菌属为:A A.志贺氏菌 B.艾希氏菌 C.沙 门 氏菌 D.大肠杆菌 E.耶尔 森氏菌 32.某菌属的一个血清群只有1个血清型,诊断时需同时含有相和 相抗血清,这一菌属分为几个血清群:B A.1 B.4 C.30 D.18 E.20 33.某菌属的一个血清群只有1个血清型,诊断时需同时含有相和 相抗血清,所述血清群为第几群:D A.A群 B.B群 C.C群 D.D群 E.以上都不对 34.有关放射免疫测定,哪种说法是不正确的:D A.放射性强度常用毫居里(mCi)或微居里(Ci)表示 B.广泛应用于蛋白质、酶的测定 C.广泛应用于半抗原和药物的测定 D.其特点是特异性强,但敏感性低 E.可能存在的放射性污染为其缺点之一 35.Sereny 试验是测试细菌:C A.产生志贺样毒素的能力 B.产 生 肠毒素的能力 C.侵 袭 力 D.产生内毒素的能力 E.粘附能力 36.军团菌培养时,BCYE- 琼脂与BCYE 琼脂成分不同之处在于前者含有:B A.苏氨酸 B.酮 戊二酸 C.头孢羟唑 D.多粘菌素 E.茴香霉素 37.鲎试验用于何种物质的测定:C A. 外毒素 11 B. 类毒素 C. 内毒素 D. 神经毒素 E. 肠毒素 38.可用于扩增未知序列的PCR方法是:B A. 对称PCR B. 反向 PCR C. RT-PCR D. 不对称PCR E. 嵌套 PCR 39.把外源质粒导入细菌中的方法称为:B A. 转导 B. 转化 C. 转染 D. 转入 E. 克隆 40.从有正常菌群存在的部位所采取的标本应接种在哪种培养基中分 离培养病原菌:C A.增菌培养基 B.营 养培养基 C.选择鉴别培养基 D.基础培养基 E.特殊培养基 二、多选题 1.可从粪便标本中分离的病毒有:ACDE A.甲型肝炎病毒 B.麻疹病毒 C.脊髓灰质炎病毒 D.人类轮状病毒 E.ECHO病毒 2.血清学诊断法,正确的是:ABCD A.伤寒肥达反应 B.风 湿病 抗“O”试验 C.斑疹伤寒外斐反应 D.梅毒瓦色曼试验 E.莱姆病 IgA抗体检测 三、简答题 1.什么是PCR技术,典型的PCR 技术分几个步骤? 答:PCR 技术 全称聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reacti- on)技 术,是一种扩增、复制小分子核酸片段的分子生物学技 术。典型 的PCR 技术 分为预变性,变性,退火,延伸,最后延伸 5个步骤。 2.什么是ELISA技术,依据原理不同ELISA技术一般可分为几类? 答:ELISA技术全称为酶联免疫吸附技术。依据原理不同 ELISA技术 可分为双抗体夹心法、双抗原夹心法、间接法、竞争法和捕获包被法。 13 3.常用的药物敏感性测试(AST)技术有哪些? 答:纸片扩散法(K-B法)、E- Test法、琼脂稀释法、肉汤稀释法(仅列出要点)。 4.细菌培养基按照其用途不同可分为哪五类? 答:基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基( 仅列出要点)。 5.霍乱弧菌在碱性蛋白胨水中培养形成菌膜的原因是什么? 答:霍乱弧菌为好氧、动力活泼菌,繁殖迅速,故在气液面形成菌膜( 仅列出要点)。 6.核酸探针杂交技术有哪几种? 答:共分为两种,分别为DNA 印迹杂交(Southern blot)与RNA印迹杂交(Northern blot) (仅列出要点)。 三、论述题 1.在食源性疾病暴发疫情的现场处置过程中,针对细菌性病原,如何 进行样本采集与分离鉴定? 答:采集粪便用于细菌检测,最好是在病人使用抗菌药物之前,采集 新鲜粪便。既可以使用灭菌棉拭子直接从消化道下端采集,也可以蘸 取病人排泄物样本。采集的粪便样品一般有两种处理办法: (1)立即投入到相应致病菌增菌液中进行培养增菌,如用于霍乱 增菌的APW和用于检测EHEC的mEC 增菌肉 汤中。 (2)将采集的粪便拭子插入到Cary- Blair运送培养基中送至相关实验室进行检测 。 在进行分离鉴定时: (1)针对 霍乱等弧菌,可将粪便拭子样本投入碱胨水(APW )中增 菌6- 8小时后用四号琼脂、庆大霉素琼脂或TCBS琼脂划线分离培养用于 检测霍乱弧菌。而继续增菌16- 18小时,接种麦康凯琼脂划线分离培养,可用以检测嗜水气单胞菌与 类志贺邻单胞菌、副溶血弧菌等。 (2)针对肠 杆菌,可将粪便拭子投入SBG/SF/SC增菌液中增菌16- 18小时后用沙门科玛嘉平板划线分离检测沙门氏菌;可将粪便拭子投 入mEC肉汤中增菌16- 18小时后用O157免疫磁珠富集/科玛嘉平板划线分离检测EHEC O157。还可直接将粪便拭子转种麦康凯/SS培养基 37度培养16- 18小时检测志贺菌与大肠杆菌。对于可疑大肠埃希氏菌,可用多重PC R的方法检测 EA/ET/EI/EP/EH五种致泻大肠杆菌。 (3)针对 弯曲菌,可将粪便拭子转种与CCDA或skirrow绵羊血平板 ,37度微需氧 环境下培养24- 48小时检测空肠、结肠弯曲菌等。在整个分离培养过程中获得的可疑 菌落也可以根据实际情况使用API、Vitek等系 统生化鉴定方法进行鉴 定与报告。 (4)在应 急检测 中,也可以使用PCR 技术进行致病菌的核酸检测。 2.PCR技术 近年来在传染性病原的快速诊断领域中得到越来越广泛的 应用,请概述PCR 技术的原理,反应的基本成分,基本步骤及操作注 意事项。 答:PCR 技术 的原理是:双链DNA在高温条件下可以变性解旋成单链 ,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互 补配对原则复制成同样的两分 子挎贝,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控 15 制DNA的变性和复性,加入 设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完 成特定基因的体外复制。 典型PCR 反 应的基本成分为:特异性引物,热稳定DNA聚合酶/缓 冲液(包含Mg离子), 4种dNTPs ,模板、 灭菌去离子水。 PCR由 变性 -退火- 延伸三个基本反应步骤构成:模板DNA 的 变性:模板DNA经加热至 94- 98左右一定 时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DN A解离,使之成为单链,以便它与引物结合, 为下轮反应作准备;模 板DNA 与引物的退火(复性):模板DNA 经加 热变性成单链后,温度降 至40- 55左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;引物的延伸 :DNA模板- 引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以 dNTP为反应原料,靶序列 为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板D NA链互补的半保留复制 链,重复循 环变性-退火- 延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链 ”,而且这种新链又可成为 下次循环的模板。每完成一个循环需24分钟,23小时就能将待扩 目的基因扩增放大几百万倍。 PCR操作注意事项:1.严格操作,避免交叉污染与气溶胶污染; 2.确保引物、试剂与扩增模板质量与配比; 3.产物电泳小心处理EB染料,防止污染和对 人体造成危害。 3.请解释伤寒诊断中肥达氏反应O抗体与H抗体的诊断意义。 答:肥达反应是诊断伤寒副伤寒的辅助诊断。其结果的解释必须结合 临床变现和病程,病史,以及地区流行病学情况。机体患伤寒、副伤寒, 一般于发病后1 2周内血液中出现特异性抗体并且随着病程延长而效价渐升,此时即 可为阳性,第4周可达峰值,以后又逐渐降低。一般以“O”凝集效价在1 :80或以上和“H”在1:160或以上为阳性。抗体主要是IgM ,出现较早;H 抗体主要是IgG,出

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