两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较

两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较 朱武军(贵州省贵阳市第六人民医院检验科 550005) 【摘要】 目的 比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测人类免疫缺陷病 毒抗体(抗一 HIV)的一 致性。方法 收集 45 份室间质评样本，分别用两种方法进行检测。结果 化学发光法检测 样本的吸光度临界值 比值明显高于 ELISA 法，两种方法对抗 HIV 检出率差异有统计学意义(Y2 25002，Po01)。结论 化学发光 法检测抗一 HIV 较 ELISA 法敏感性高、假阳性少，可以推广应用。 【关键词】 化学发光法； 酶联免疫吸附试验； 人类免疫缺陷病毒； 对比研究 中图分类号：R44661； R51291 文献标志码：B 文章编号：1672 9455(2009)06045502 艾滋病即获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒 (HIV)引起的严重疾病，迄今仍无法有效治疗，除了行为干预 等社会学手段外，阻断输血传播，及时发现 HIV 感染者并采取 针对性措施，是目前疫情控制的重要技术手段。由于 HIV 进 入人体后需要经过一段时间才会产生 HIV 抗体(抗一 HIV)，这 一时间医学上称为“窗口期” 。艾滋病研究的重点领域之一就 是尽可能缩短“窗口期” ，而达到这一目的最重要的手段就是高 质量的艾滋病诊断试剂盒和敏感性高的检测方法。化学发光 标记方法是近年来发展起来的一种新的非放射性免疫分析技 术。为比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测 抗一 HIV 的一致性，本文对同一份标本采取两种方法进行检测， 现将结果报道如下。 1 材料与方法 11 标本来源 所有标本均来自贵州省临床检验中心 2006 2008 年全省室间质评样本，一 20以下保存。 12 仪器化学发光仪 KPS-KM(北京科美东雅生物技术有 限公司生产)；酶标仪 Muhiskan MK3(芬兰) ；洗板机(芬兰雷 勃 Wwllwash Plus)。 13 试剂 ELISA 法检测试剂由北京万泰生物药业股份有 限公司提供，批号 120080101；化学发光法试剂为北京科美东 雅生物技术有限公司生产，批号 20070920。 14 方法 随机抽取室间质评 10 份阳性标本分别以 1：5 稀 释作为待测标本，与另外 35 份标本，共计 45 份标本分别用两 种方法进行检测，均严格按照各自的试剂盒说明书操作。 15 统计学方法 用 SPSSl20 统计软件进行数据处理，数 据资料比较采用 Y2 检验。 2 结 果 在 45 份标本中，化学发光法和 ELISA 法均为阳性 29 份， 其样本吸光度临界值(ODCO)范围分别为 2379179100 和 163328375；两种方法均为阴性的标本 12 例，其 ODCO 值范围分别为 00770525 和 00530617；在化学发光法 为阳性而 ELISA 法为阴性的 3 例标本中，ELISA 法的样本 ODCO 值范围为 06070849，而化学发光法的 ODCO 值 范围为 12301787。结果见表 1。 表 1 两种方法对 45 份样本抗一 HIV 检测结果(”) 由表 1 可以看出，化学发光法的敏感性高于 ELISA 法，两 种方法抗 HIV 检出率差异有统计学意义(Y225002，P 001)。 3 讨 论 艾滋病是由 HIV 感染所引起的一种获得性免疫缺陷性疾 病，可通过性传播、血液传播和母婴传播途径感染人类，检出 抗一 HIV 是艾滋病诊断的重要条件，而诊断 HIV 感染是艾滋病 预防控制工作的重要组成部分。因此，建立敏感、实用的检测 方法，对于监测、诊断或血液筛查以及控制艾滋病的流行显得 尤为重要。目前艾滋病诊断技术主要包括病毒检测和病毒特 异性抗体检测等。由于 HIV 病毒分离、病毒载量测定、病毒核 酸测定以及病毒抗原检测等方法难度大、费用高，因而抗体检 测是常规检测方法，包括 ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接 免疫荧光试验和斑点印迹在内的检测技术用于筛选实验，免疫 印迹试验用于确认实验。由此可见，提高敏感性、特异性，缩短 窗 El 期和方法简便、快速，是 HIV 检测试剂未来发展的主要 趋势。 白 1985 年第 1 代抗 HIV 检测试剂问世至今，HIV 血清 学检测试剂已经发展到第 4 代。但使用第 4 代试剂对艾滋病 病毒抗体进行检测，仍然有 23 周的窗口期。此外，由于把抗 宣石曲瓞一荟士浊包的击田休全 原和抗体同时包被在反应板上存在着相互干扰的可能，影响了 免疫反应的特异性。另外，从方法学上来讲，这种基于 ELISA 的分析方法，灵敏度终归是有限的1。本实验结果表明，化学 发光法检测样本的 ODCO 比值明显高于 ELISA 法，对于抗 体效价较低的弱阳性血清样本，化学发光法具有明显优势，可 以大大缩短“窗 V1 期” ，最大可能地避免漏检，降低窗 El 期导致 医院感染的风险，早期发现疾病，对防治艾滋病等传染病有着 更大的技术优势。而且该技术与国外普遍采用的管式发光法 不同，首创板式发光法，具有高通量的特点，更加适合我国国 情。目前，该方法的不足之处是试剂成本比较贵，但随着该技 术逐步实现产业化，试剂成本有望大幅降低。由于化学发光法 是测定发光强度的变化率，从而决定被测物质的浓度，不受黄 疸、溶血及脂血影响，因此其假阳性率较低z。该法具有高灵 敏度、宽线性、反应快速、影响因素少、结果准确等优点，其在免 疫学检验方面的应用日益受到人们的重视。相信在不久的将 来，化学发光分析技术将在艾滋病检测领域占有越来越重要的 地位，以进一步提高抗 HIV 的检出水平。 (志谢：感谢贵阳市第五人民医院检验科提供部分检测 样本。) 参考文献 1吕传臣，马雪梅，曾毅人类