《药物分析》第6章芳酸类非甾体抗炎药物的分析ppt课件

第六章 芳酸芳酸类类类类非甾体抗炎非甾体抗炎药药药药物的分析物的分析 Contents 4 Chemical structure & feature1 2 3 Identification Detection of specific impurities Assay 特 点 1 1 2 2 3 3 4 4 v均有苯环、羧酸或其酯 v水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基 直接与苯环相连 v除了酸性基团外，各自具有本身的 官能团 v分子中苯环、羧酸和取代基的相互 影响，使芳酸的酸性强度各有不同 （2）水杨杨酸类类：代表药药物有水杨杨酸、阿 司匹林、对对氨基水杨杨酸钠钠等药药物。 （1）苯甲酸类类：代表药药物如苯甲酸及其 钠盐钠盐 、丙磺舒、泛影酸、氨甲苯酸等。 （3）其他芳酸类类：代表药药物有布洛芬、 氯贝氯贝 丁酯酯、酚磺乙胺、依他尼酸钠钠等。 第一第一节节节节 典型典型药药药药物的分物的分类类类类与性与性 质质质质 一、苯甲酸类 苯甲酸（钠钠）丙磺舒 甲芬那酸 （一）典型药物 1、大多为为固体，具有一定的m.p。 2、除其盐盐易溶于水外，其余药药物在水中难难溶，易溶于 有机溶剂剂。 3、具有苯环环和其他特征官能团团，均具有UV和IR特征吸 收光谱谱。 4、苯甲酸盐盐的中性溶液与三氯氯化铁铁反应应生成赭色沉淀。 5、含硫的丙磺舒能分解为亚为亚 硫酸钠钠。 6、大多可用氢氢氧化钠钠液滴定，苯甲酸钠钠可采用双相滴 定法测测定含量。 （二）主要理化性质 1、大多为为固体，具有一定的m.p。 2、除其盐盐易溶于水外，其余药药物在水中难难溶， 易溶于有机溶剂剂。 3、酸性较较强。水杨杨酸酸性（pKa2.95)阿司匹林（ pKa3.49）苯甲酸（pKa4.25)碳酸（pKa6.3)。 4、对对氨基水杨杨酸钠钠有芳伯氨基，可用NaNO2法测测定 。 5、具有苯环环和其他特征官能团团，均具有UV和IR 特征吸收光谱谱。 6、芳酸酯类酯类 易水解，生产产和贮贮存时时注意防止水解。 （二）主要理化性质 三、其它芳酸类类 氯贝氯贝 丁酯酯(clofibrate) 布洛芬(ibuprofen) （一）典型药物 （二）主要理化性质 1、氯贝丁酯为无色或黄色油状液体，有特臭， 易溶于有机溶剂，难溶于水。可加碱水解。 2、布洛芬为固体，具一定m.p。易溶于有机溶剂 ，难溶于水。 3、均具有UV和IR特征吸收光谱。 4、均可用氢氧化钠滴定液进行滴定。 四、结构分析（总结） 包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐 共同点：苯环、羧基或其酯 不同点：不同的取代基（如酚羟基、 芳伯氨基等） 五、性质质 （一）物理性质质 （1）固体 具有一定的熔点 （2）溶解性 游离芳酸类药类药 物几乎不溶于水，易溶 于有机溶剂剂；芳酸碱金属盐盐及其它盐盐易溶于水，难难 溶于有机溶剂剂。 （二）化学性质质 1. 芳酸具游离羧羧基，呈酸性，属中等强度酸或弱酸。 X、NO2、OH等吸电电子基存在使酸性增强； CH3、NH2等斥电电子基存在使酸性减弱； 酸性：邻邻位取代间间位、对对位取代； 邻邻位酚羟羟基与羧羧基形成分子内氢氢健，酸性增强。 2. 芳酸碱金属盐盐易溶于水，水溶液呈碱性，可用酸 滴定，但产产物游离酸不溶于水，所以其含量测测定方 法为为双相滴定法。 3. 芳酸酯酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质质 可进进行鉴别鉴别 ；利用芳酸酯酯水解定量消耗氢氢氧化钠钠 的性质质，可用水解后剩余滴定法测测定含量；还应还应 检查检查 因水解而引入的特殊杂质杂质 。 4.分子结结构中具有苯环环和特征官能团团，均具有紫外 和红红外特征吸收光谱谱，可用于鉴别鉴别 。 5. 取代芳酸类药类药 物可利用其取代基的性质进质进 行鉴鉴 别别和含量测测定。 第二节 鉴别试验 一、FeCl3反应 1.水杨杨酸类类：酚羟羟基或水解后产产生酚羟羟基 p 直接：水杨杨酸、对对氨基水杨杨酸钠钠、双水杨酯杨酯 、 酚磺乙胺、对对乙酰酰氨基酚等 p 间间接（水解后）：阿司匹林、贝诺酯贝诺酯 阿司匹林 Ch.P.（2010） 鉴别鉴别 （1）取本品约约0.1g，加水10ml，煮沸，放 冷，加三氯氯化铁试铁试 液1滴，即显显紫堇堇色。 2. 3. 4. 布洛芬、氯贝氯贝 丁酯酯等 二、重氮化偶合反应应 芳香第一胺类鉴别类鉴别 反应应，鉴别鉴别 具芳伯氨基或潜 在芳伯氨基的药药物 p 直接：对对氨基水杨杨酸钠钠 p 间间接（水解后）：贝诺酯贝诺酯 三、 氧化反应应 甲芬那酸加硫酸溶解，与重铬酸钾成深蓝， 随即变棕绿。 甲芬那酸加硫酸，加热，溶液成黄色，并产 生绿色荧光（JP）。 四、水解反应应 1 2 H2SO4 1.苯甲酸盐，加硫酸加热不炭化，析出苯甲 酸，在试管壁凝成白色升华物。 五、分解产产物的反应应 2.含硫的药物的氧化反应 如丙磺舒与氢氧化钠熔融，分解生成亚硫酸钠 ，经硝酸氧化成硫酸盐，可显硫酸盐的反应。 另，丙磺舒加热时可产生二氧化硫特臭。 七、IR 六、UV 八、TLC 九、 HPLC 第三节节 特殊杂质检查杂质检查 (一)合成工艺艺 一、阿司匹林中特殊杂质杂质 的检查检查 杂质杂质 来源：原料残存（ 乙酰酰化不完全）、中间间 体、水解产产生、副产产物 等。 1.游离水杨杨酸 （二）阿司匹林中游离水杨杨酸与有关物质检查质检查 ChP2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品 溶液（10mg/ml）,防止阿司匹林水解，同时采 用高效液相色谱法检查。 由于阿司匹林在制剂过程中易水解生成水杨 酸，药典规定其制剂均照原料药方法与色谱条 件检查水杨酸。 离子对对色谱谱 离子抑制技术术 有机弱酸，弱碱物质质 离子对对技术术 酸/碱性较较强或强电电离物质质 （1）分离原理 流动动相中加入反离子，使与组组分离子形成疏水离子对对， 在固定相上有适宜的保留。 A+ + B- （A+B-） A+ 组组分离子（亲亲水） B- 反离子（带较带较 大疏水基团团） A+B- 离子对对（疏水） (三)HPLC法及其原理 USP 反相离子对对HPLC法 （2）反相离子对对色谱谱条件选择选择 u固定相： C18 、C8柱 u流动动相：含一定量反离子、一定pH值值的缓缓冲 盐盐-甲醇体系 u反离子及pH的选择选择 酸性药药物（A-）：选选用季胺盐盐作为为离子对试对试 碱性药药物（A+）：选选用烷烷基磺酸/硫酸盐盐作为为离 子对试剂对试剂 pH值值的选择选择 ：使被测测物完全离解，尽可能都形 成 离子对对。 阿司匹林 Ch.P.（2010） 取本品约约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对对酚酞酞指示 液显显中性）20ml，溶解后，加酚酞酞指示液3滴，用氢氢氧化 钠钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氢氧化钠钠滴定液（ 0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。 第四节节 含量测测定 一、酸碱滴定法 1. 直接滴定法-原料 苯甲酸 pKa 4.20 水杨杨酸 pKa 2.98 酸性较较强 羧羧酸邻邻位-OH，吸电电子基团团，使 酸性增加； 分子内氢键氢键 ，更增加了其极性。 直接滴定 Aspirin、丙磺舒(BP. JP等) 、苯甲酸 (Ch.P等)均采用本法 反应应摩尔比 1：1 原理 产产物为为强碱弱酸盐盐 宜选选酚酞为酞为 指示剂剂 +NaOH 中和乙酸 溶解阿司匹林 防止酯键酯键 水解 讨论讨论 ： （1）乙醇：防止阿司匹林 酯结酯结 构在滴定时时水解 （2）中性乙醇：对对指示剂剂( 酚酞酞)而言为为中性，可消除 滴定误误差 （3）滴定时应时应 在不断振摇摇 下稍快地进进行，以防止局部 碱度过过大而水解。 （4）供试试品中所含水杨杨酸 超过规过规 定限度时时，不宜用 直接滴定法测测定。 滴定度，每1 ml滴定液相当于被测组 分的 mg数，mg/ml 滴定液浓浓度，mol/L 被测测物的摩尔质质量，g/mol 1 mol样样品消耗滴定液的摩尔数，常体现为现为 反应应摩尔比，即1n 浓浓度校正因子 供试试品的质质量（g） 供试试品消耗滴定液的 体积积（ml） 阿司匹林 USP（24）方法：取本品约约1.5g，精密称定,加入 氢氢氧化钠钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合， 缓缓缓缓 煮沸10min，放冷，加酚酞酞指示液，用硫酸 滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氢氧化钠钠，并 将滴定结结果用空白试验试验 校正。每1ml的氢氢氧化钠钠 滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。 (二)水解后剩余滴定法 (酯酯的一般含量测测定方法) 讨论讨论 ： （1）需做空白试验。 （2）可应应用于不含羧羧基的酯类药酯类药 物 （3）供试试品中所含水杨杨酸超过规过规 定限度时时，不宜用此滴定 法测测定。 T 毫摩尔质量 0.5 规定的硫酸浓度为0.25mol/L 取本品10片，精密称定，研细细，精密称取适量（约约相当于 阿司匹林0.3g），置锥锥形瓶中，加中性乙醇（对对酚酞酞指示 液显显中性）溶解后，振摇摇使阿司匹林溶解，加酚酞酞指示液 3滴，滴加氢氢氧化钠钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显显粉红红色 ，再精密加氢氢氧化钠钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴 上加热热15分钟钟并时时时时 振摇摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴 定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结结果用空白试验试验 校 正。每lml的氢氢氧化钠钠滴定液（0.1mo1/L）相当于 18.02mg的C9H8O4。 (三)两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 如阿司匹林片的测测定 Aspirin片 枸橼橼酸 Citric acid 酒石酸 Trataric acid 水解产产物 水杨杨酸SA HAc 第一步 中和 酒石酸 枸橼橼 酸 水杨杨 酸 醋酸 +NaOH 酒石酸钠钠 枸橼橼酸 钠钠 水杨杨酸 钠钠 醋酸钠钠 不用于含量计算 第二步 水解后剩余滴定 反应应摩尔比为为11 +NaOH 定量过过量 计计算：称取10片重1.8240g片粉重0.5312g CNaOH： 0.1032mol/L C 0.05120mol/L 标标示量 0.1g V- 3.02ml V0- 20.18ml 二、亚亚硝酸钠钠滴定法 eg:对对氨基水杨杨酸钠钠 三、双相滴定法 如苯甲酸钠钠 ChP(2005) 取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、 乙醚醚50ml及甲基指示液2滴，用盐盐酸滴定液（0.5mo1/L ）滴定，随滴随振摇摇，至水层显层显 橙红红色，分取水层层，置 具塞锥锥形瓶中，乙醚层醚层 用水5ml洗涤涤，洗液并入锥锥形瓶 中,加乙醚醚20m1，继续继续 用盐盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定， 随滴定随振摇摇，至水层显层显 持续续的橙红红色。每1ml的盐盐酸 滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。 原理 易溶于乙醚醚易溶于水 甲基橙 酸性较较强 水乙醚醚 芳酸碱金属盐盐 水溶液呈碱性，用标标准酸滴定 溶剂剂：水-乙醚醚 操作中要充分振摇摇 乙醚醚的作用： p萃取反应产应产 物苯甲酸，减少其在水中浓浓度，使反应应向右 进进行到底 p消除沉淀，终终点清晰 苯甲酸钠为钠为 芳酸碱金属盐盐，易溶于水；苯甲酸不 溶于水，不利于终终点的正确判断,因此，利用苯甲 酸能溶于有机溶剂剂的性质质，采用双相滴定法。 四、UV 1.直接UV法 2.离子交换换-UV法 氯贝氯贝 丁酯酯在226nm的波长处长处 有最大吸收，但对氯对氯 酚等 有关物质质亦有吸收，干扰扰UV法的测测定。根据氯贝氯贝 丁酯为酯为 酯结酯结 构，不能发发生电电离，而有关物质质可发发生酸性解离的性 质质差异，采用阴离子交换换色谱谱分离后，采用UV法测测定。 3、柱分配色谱谱紫外分光光度法 阿司匹林胶囊中阿司匹林和水杨杨酸的测测定(USP):可同时时 定量测测定阿司匹林和水杨杨酸。 (1). 水杨杨酸的限量测测定 色谱谱柱的制备备：于玻璃柱中装入两种填充剂剂，上层为层为 硅 藻土和新制三氯氯化铁铁尿素试剂试剂 的混合物，下层为层为 硅藻土 和磷酸液的混合物。 原理原理：水杨杨酸与三氯氯化铁铁-尿素试剂试剂 生成紫色水杨杨酸铁铁配 位化合物，保留于硅藻土色谱谱柱上，用氯氯仿洗脱阿司匹林 ，弃去洗脱液；再以冰醋酸-水饱饱和乙醚醚洗脱，紫色配位化 合物解离，水杨杨酸游离出来，继继而被氯氯仿洗脱。于306nm 波长处测长处测 定吸收度。 讨论讨论 ： （1）洗脱时时，若有三氯氯化铁铁被洗下，则则使洗脱液 带带黄色，影响测测定结结果，故在色色谱谱谱谱柱下柱下层层层层加入拌有加入拌有 磷酸的硅藻土，与磷酸的硅藻土，与FeFe3+ 3+生成不溶于洗脱液的磷酸 生成不溶于洗脱液的磷酸铁铁铁铁 而避免干扰扰。 （2）在洗脱SA时时，可能有尿素被洗下，故接收液 中加入适量盐盐酸保持酸性。 （3）制备备供试试液以及整个操作宜快，避免ASA水 解。 （4）高浓浓度尿素使水杨杨酸铁铁配位化合物移动较动较 慢 ，谱带较谱带较 窄。 2. 2. 含量含量测测测测定定 原理：在硅藻土碳酸氢钠氢钠 色谱谱柱中，阿司匹林 及水杨杨酸成钠盐钠盐 保留于柱上，先用氯氯仿洗脱除去 中性或碱性杂质杂质 ，再用醋酸酸化，使阿司匹林游 离，被氯氯仿洗脱后测测得其含量。(水杨杨酸酸性较较强 不能游离而被保留) 色谱谱柱的制备备：填充剂为剂为 硅藻和新制碳酸氢钠氢钠 液 （112)的混合物。 测测定对对象：ASA+SA ChP2010采用离子抑制-反相高效液相色 谱谱法测定含量。（例P217） 五、HPLC 1鉴别鉴别 水杨杨酸及其盐类盐类 ，最常用的试试液 是 A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰 化钾 2. 乙酰酰水杨杨酸片剂剂可采用的测测定方法为为 A. 非水滴定法 B. 水解后剩余滴定法 C. 两步滴定法 D. 柱色谱法 E. 双相滴定法 3. 两步滴定法测测定阿司匹林片的含量时时， 每1ml氢氢氧化钠钠溶液（0.1mol/L）相当于 阿司匹林（分子量=180.16）的量是 A. 18.02mg B. 180.2m