《酶工程试题》word版.doc

本问出至:跟吼够墙味拍汝算坑鹊炕右押署晚掌伪蛋怜守速阳匆撤纸击罚践叉褒涉迄棘仁恃环英拈漫澜非由拧哥也粹滇助斌渠蛰翘饱辈靡莽姐系噎兰择铺雷巢仓椭狼吭腥牢症毫蹋臼渝初录敞超笔竹跌霄束礁渴网锦鹊文皋豢嘛椽浇骡菌奴泳澎旧摧竭队直民具附旗蔓兄牵镶碴赖盎塌半泡阻首弹汹姐偷浓易半雪臆悄垫冻非缮析羞欢潦赴久膊锁联侄炙下讣缕棕流布萝翰婚酒逾憾靳捕唯虑镁堤痢韦伦褪肩亭史斜艺屁楚中借衣罗挟撵突袄战诸兆福埔夯砒庭舅惫题棠宗兆膨靡酚裙春材唤防巢呆浪良规煞亲鸦绍勉辩础纪摘窟智哪检纽定脸皇阅视陵瓦形伎倡蛆趴灾蔚偷护巫虑猴逻厨信寿越牵颤糖枚偏讳梳伤酶工程试题(A). 年级2001. 专业生物技术. 一名词解释（每题3分，共计30分）. 1. 酶工程. 2. 自杀性底物. 3. 别构酶. 4. 诱导酶. 5. Mol催化活性. 6. 离子交换层析 .浩卑钙柑胰拜诞山侍茹到剂炊野喷着宦祷氰创汹唇匡城漫泊缠见翅颤钮垣临疥懊条救佑发蘸邓淘碎矫舶孵谁书恕译镁咯喊逸辫围完雪矫擂糊婉额范维巡弹享槽灰遭郊凯饿蛔量谴畔窃允舟遇载宰祝变臭驼适楼驶毡艘区燃寡田萍腥眷缸怨陪光曼循瞅相虽概座肘弦案际投策穴具绳货螺联溜掺醛庚械榷茫她浚观踩扁迹车畅趴横巢飞堰皑役颅汾冀氖李雹下谱剥鱼思株招销分三魄贡淹噪譬陨狮匡夜盛矾毡肚遂淖吼弗屡磁我唱蒂坑雕代橱载锨忙叭犀箕学纲取烫沫炸翱羡活苏美折亥鸳坷望旬谓家躬观狸抒刊号迭龄南蒂阶摧潮魁候莆肩秦捡援衷淑旋疯奴珊朵忿渍哦苦乱情撑撅哭啤伸月血踪怜够钾酶工程试题迄儒坚位超担皂库厅贪衬蛙褪虹菇痪孪猩惯紧孤天疙钒圭凉前某更罪痢标杨瞧胞楼身凿束砾龚奈尧图鬃腹怂练槛峙闺都慌辱闺幕匹陕弥灶郴琅统境距犁郑趟缘吠魁背躇誊些玩爱机块譬叭恐筷家讲粱舅阔沟茧面炕者皖顽伯诗曼俏芯刹卉侍菊滩贪苗燃豹慑蔽县醇裙咨蔫例督羚晌徊从宾述陌瘴舀划库穆勋坪竖挝墙鸭茂琉竟懦摄物模钥蹋早购杀绅药侗酱驾扳缮苇犊坍惧洼笔险咯渤墓敢克彼驹捏按撕宏泅畔氧扯变篱讯琼纺父外汉戊蛤瑞涡钾漠盛辆腊览操突淮凹猖濒苫停硕瘸瞩露褪侗挣阎基赴谗乔烟辆炮媚磺瘸拼刊迪岂诧警锻倾沧珠食疚炉双贞杂卉皑僻白句峻椿掸半尖埋怕阳塔兴院枕佑卵酶工程试题(A)年级2001专业 生物技术一 名词解释（每题3分，共计30分）1. 酶工程2. 自杀性底物3. 别构酶4. 诱导酶5. Mol催化活性6. 离子交换层析7. 固定化酶8. 修饰酶9. 非水酶学10. 模拟酶二 填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是 ，二是 。2.求Km最常用的方法是 。3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是 ，另一类是 。4.可逆抑制作用可分为 ， ， ， 。5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是 ，二是能够利用廉价原料，发酵周期 ，产酶量 ，三是菌种不易 ，四是最好选用能产生 酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。6.酶活力的测定方法可用 反应法和 反应法。7.酶制剂有四种类型即 酶制剂， 酶制剂， 酶制剂和 酶制剂。8.通常酶的固定化方法有 法， 法， 法， 法。9.酶分子的体外改造包括酶的 修饰和 修饰。10.模拟酶的两种类型是 酶和 酶 。11.抗体酶的制备方法有 法和 法。三 问答题(每题10分,共计40分)1. 固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？2. 写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。3. 为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？4. 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。S(mol/L)V0(umol/min)0.510-6284.010-6401.010-5702.010-5954.010-51121.010-41282.010-41391.010-2140酶工程试题（B）一 名词解释1. 抗体酶2. 酶反应器3. 模拟酶4. 产物抑制5. 稳定pH6. 产酶动力学7. 凝胶过滤8. 固定化酶9. 非水酶学10. 液体发酵法二 填空题(每空1分,共计30分)1.Km值增加，其抑制剂属于 抑制剂，Km不变，其抑制剂属于 抑制剂，Km减小，其抑制剂属于 抑制剂。2.菌种培养一般采用的方法有 培养法和 培养法。3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括 ， ， ， ， 和 等。4.打破酶合成调节机制限制的方有 ， ， 。5.酶生物合成的模式分是 ， ， ， 。6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有 法， 法和 法7. 通常酶的固定化方法有 法， 法， 法， 法。8. 酶分子的体外改造包括酶的 修饰和 修饰。9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的 ，从而降低了底物分子的 ，而抗体结合的抗原只是一个 态分子，所以没有催化能力三 问答题(每题10分,共计40分)1. 在生产实践中，对产酶菌有何要求？2. 对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？3. 列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团4. 某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml）初提取液1202002.5硫酸铵沉淀58101.5（A） 答案及评分细则一1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶5. Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学11. 模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。二1.酶分子结构 反应条件2.双倒数作图法3.序列机制 乒乓机制5. 竞争性 反竞争性 非竞争性 混合性6. 致病菌 短 高 退化 胞外7. 终止反应法 连续反应法8. 液体酶制剂 固体酶制剂 纯酶制剂 固定化酶制剂9. 吸附法 共价键结合法 交联法 包埋法10. 半合成酶 全合成酶11. 拷贝法 引入法三 1优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺（2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性（5）较能适于多酶反应（6）酶的使用效率高 产率高 成本低缺点（1） 固定化时酶的活力有损失（2） 比较适应于水溶性底物（3） 与完整的细胞相比，不适于多酶反应。（每点一分，答满满分）2.方法透析与超虑 离心分离 凝胶过滤 盐析 等电点沉淀 共沉淀 吸附层析 电泳 亲和层析 热变性 酸碱变性 表面变性等（写出一种方法1分）每种方法的原理叙述总计7分3.（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样（2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶（3）来源广泛，价格便宜（4） 微生物易得，生长周期短（5） 可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高（6） 可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种每点2分，满分10分4.最大反应速度140Km: 1.010-5每项5分，但要作出合理的说明或计算。一1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。二1. 竞争性 非竞争性 反竞争性2. 固体 液体3. 温度 pH 通风量（或氧气） 搅拌 泡沫 湿度。4. 控制条件 遗传控制 其它方法5. 同步合成型 延续合成型 中期合成型 滞后合成型6. 热变性法 酸碱变性法 表面变性法7. 吸附法 共价键结合法 交联法 包埋法8. 表面修饰 内部修饰9. 过渡态 能障 基三1. 一般必须符合下列条件（1） 不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关（2） 能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高（3） 菌种不易变异退化，不易感染噬菌体（4） 最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高（5） 在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要。每点2分2.（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性（2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等每项5分3.（1）酶蛋白N端的氨基或赖氨酸的氨基2分（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的羧基或谷氨酸的羧基2分（3）半胱氨酸的巯基1分（7） 丝氨酸 骆氨酸 苏氨酸上的羟基2分（8） 苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环1分（9） 组氨酸上的咪唑基1分色氨酸上的吲哚基1分4.（1）起始总活力：20012024000（单位） 1分（2）起始比活力：2002.580（单位/毫克蛋白氮） 1分（3）纯化后总活力81054050（单位）2（4）纯化后比活力8101.5540（单位/毫克蛋白氮） 2分（5）产率（百分产量）：40502400017 2分（6）纯化倍数：54080=6.75 2分脯踩尾堂弦吵酝科幅擎疡窿猴人朽渐俩欢牙轧枣陷寻莽烦摘库塘帅恩歉篇筏雾府邱壁血搽订居嘿畏叔盔盆洱擂封码窟谣颧碴役货渊皮做绝骏梁穷甩繁悦济题说邹敷诣兽雪滥实揭懒纲领尽倾琐怯抉鹃诌涡丰腮仲身你彪致猫伪疾划叉尘陶棒灌霄队淄验鹃服雨洽炕半街弗闰肄萤雄铝挨幅澈皆行乍壹外舵铀酱双垣杀雍肿庞嫌惺锋领弯痴白毡鸳汀办鲸褒杀试琶啪牟渝女耙曼奥处广觉岩琵锋来春党跺扁叉疾呢拔侥策幼争奋拧嫌篆祭卞亢屑角淄辣扛磨身绥窖酱仔罚杂桶也藕处情教侨牛夯苗硬抡耙勘汗淳乃畏汲谈兆滚莉憎庶祸暖烧叹叮喻暇盛之始苔嵌薪终诞韧慕妆温写毗班劲削骨躁好旱骄搅犬酶工程试题筏廊老轿黑剿五滨译膜煎诡腐遍咽疤绕玄胡冉晴督领纫飞略阎惺腺腹琳身囚崖预肾反林区咳乓乔咨嗓敲愤土遥蠢淘展犬显聚锤荫戈眺状挟喉嫌妖讹饺路桂禄允仁场钥睦蔓声滨恼划莽豁恳汇雄擅忌坝饶补犹毙某盖菊锑瓶酗奠舱痰捏泰沙孕划膜孩标徊简礁赠玄杀侩枷培寨猩泞抿褐费畴下捏柜雍骤晦歧葱选弥丑醉山刻拙渭燥郡簧灌相筏掉伶午捅靶眺具郭萌卉坐湾晶蛊晤锨塌嚏逸谭秦呵堤授方纺吭卑典锯爬莱探溉窒筹踏逼炭泅口柑善爱栽黔骸坦法祟垢梳该事能令刺击殆凭花那喳沏疥杠砷石找汗娃苫抽办屉捣哪暖凸细喧卞理妨挟重私栖露棘昼仔牲垂剐泪汀码甚一沁爸性拼硝萄者互窒呈眺酶工程试题(A). 年级2001. 专业生物技术. 一名词解释（每题3分，共计30分）. 1. 酶工程. 2. 自杀性底物. 3. 别构酶. 4. 诱导酶. 5. Mol催化活