L-苯丙氨酸质量标准和检验规程.doc

20-20目 的：规范检验操作，确保检验结果的准确可靠。适用范围：适用于L-苯丙氨酸的检验。责 任 者：化验员。名 称：L-苯丙氨酸（L-Phenylalanine）化学名：L-氨基-苯丙酸（L-Amino-phenylpropionic Acid）结构式：分子式：C9H11NO2 分子量：165.19 CAS: 63-91-2一、中国药典2005年版（CP2005）本品为L-氨基-苯丙酸。按干燥品计算，含C9H11NO2不得少于98.5%。在热水中易溶，在水中略溶，在乙醇中不溶；在稀酸或氢氧化钠试液中易溶。检验操作规程：1.性状：本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。1.1取本品适量于白色干净纸上观察，可轻闻其味道。 2.比旋度：本品比旋度范围为33.0至35.02.1样品溶液：取本品1g，精密称定至0.0001g，加水溶解并稀释成50ml的溶液（每1ml中约含20mg的溶液）。样品溶解一定要完全，可用超声机助溶，溶解完溶液需澄清。2.2空白溶剂：取溶解样品用超纯水适量。2.3测定：用读数至0.001并经过检定的旋光计检测。将测定管用空白溶剂冲洗数次，缓缓注入空白溶剂适量（注意勿使发生气泡，测定管两端的玻璃镜片要擦拭干净），置于旋光计内校正读数，即空白溶剂的旋光度要为0。校正完毕以后用相同的方法检测样品溶液并记录下来，用同法读取旋光度3次，取3次的平均数。2.4计算： 比旋度VL m （1W）式中：V稀释倍数；所测旋光度的均值；L测定用管的长度（dm） m称样量；W样品的干燥失重量2.5以上溶液及测定的过程一定要调节温度至200.53.鉴别：本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集983图)一致。4.酸度：本品的pH值应为5.46.0。4.1pH计校正用标准缓冲液的配置。4.1.1邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（pH4.0）：精密称取在1155干燥23小时的邻苯二甲酸氢钾KHC8H4O410.21g，加水使溶解并稀释至1000ml。4.1.2 磷酸盐标准缓冲液（pH6.8）：精密称取在1155干燥23小时的无水磷酸氢二钠3.55g与磷酸二氢钾3.40g，加水使溶解并稀释至1000ml。4.1.3硼砂标准缓冲液（pH9.2）：精密称取硼砂Na2B4O710H2O3.81g（注意：避免风化），加水使溶解并稀释至1000ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。4.2pH计的校正：取邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液对仪器进行校正，使仪器示值与表列数值一致。温度邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液磷酸盐标准缓冲液（pH6.8）硼砂标准缓冲液04.016.989.6454.006.959.40104.006.929.33154.006.909.28204.006.889.23254.016.869.18304.026.859.14354.026.849.10404.046.849.07454.056.839.04504.066.839.01554.086.838.99604.096.848.96仪器校正后，再用磷酸盐标准缓冲液核对仪器示值，误差应不大于0.02pH单位。若大于此偏差，则应小心调节斜率，使示值与磷酸盐标准缓冲液的表列数值相符。重复上述定位与斜率调节操作，至仪器示值与标准缓冲液的规定数值相差不大于0.02pH单位，否则，须检查仪器或更换电极后再行校正至符合要求。4.3样品的测定：4.3.1样品液的配制：取本品0.20g，加水20ml完全溶解后，待测。4.3.2测定法：将已校正好的pH计电极帽轻轻取下，用纯化水充分洗涤电极，然后用滤纸将水吸尽，将电极放入所测样品溶液中，轻轻搅动10s后让它静止并观察读数的变化，待稳定后即可记录数据。5.透光率：在430nm的波长处测定透光率，不得低于98.0%。5.1配套吸收池的校正：将仪器调至波长430nm，开机预热约30分钟。用纯化水润洗吸收池35次后，装入纯化水约4/5后用擦镜纸将吸收池两边的光滑面擦拭干净，在“A”状态下调“0”，在“T”状态下调“100%”将另一吸收池也用纯化水润洗吸收池35次后，装入溶剂约4/5后同样用擦镜纸将吸收池两边的光滑面擦拭干净，在相同波长测定透光率，透光率应在99.8%100.2%之间，如不在此范围，须把吸收池用洗液浸泡5分钟后，用水洗净，重复以上操作符合规定后，方可进行下一步检测。5.2样品液的配置：取本品0.50g，加纯化水25ml完全溶解后，待测。5.3样品的测定：将仪器调至所需状态下即“T”（测透光率）。用溶解好的样品液润洗第二个吸收池35次后，装入溶剂约4/5后用擦镜纸将吸收池两边的光滑面擦拭干净然后放入槽中进行检测，每检测一批样须验证仪器是否处于正常状态，最后读取数据。6.干燥失重：减失重量不得过0.2%6.1扁型称量瓶的恒重：取扁型称量瓶，在105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重后，再置105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。6.2检测法：取供试品，混合均匀。分取约1g，置于105下干燥至恒重的扁形称瓶中（供试品干燥时，应平铺在扁形称瓶中，厚度不可超过5mm）精密称定。放入烘箱进行干燥时，应将瓶盖半开进行干燥，3个小时后取出。取出时，须将称瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器放冷至室温（约30分钟），然后称定重量。称定扁形称量瓶和供试品以及干燥后的恒重，均应准确至0.1mg位。6.3计算： 干燥失重%W1W2100%W1W0式中：W0空瓶重(g); W1供试品+瓶重(g); W2干燥后供试品+瓶重(g)7. 炽灼残渣：遗留残渣不得过0.1%7.1坩埚的恒重：将坩埚在600炽灼3小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重后，再置600炽灼2小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。7.2样品的测定：取供试品2.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，在电炉上缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；加硫酸0.51ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，再放入600的高温炉中炽灼使完全灰化，3个小时后关闭高温炉待炉温降至300左右再移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在600炽灼至恒重，即得。7.3计算： 炽灼残渣%W2W0100%W1W0式中：W0空坩埚重(g); W1供试品+坩埚重(g); W2炽灼后供试品+坩埚重(g)8.重金属：含重金属不得过百万分之十。8.1试剂的配制：8.1.1标准铅溶液的制备：称取在105干燥至恒重硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Pb）。配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。8.1.2氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得8.1.3醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5，用水稀释到100ml，即得。8.1.4硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒，冷却，立即使用。8.2检测法：取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中用同法蒸干后，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液2.0ml，再用水稀释成25ml；再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，供试品管中显出的颜色与对照品管比较，不得更深。9.砷盐：含砷盐不得过百万分之一。9.1试剂的配制：9.1.1标准砷溶液：精密称取在105干燥至恒重的三氧化二砷 0.132g，置 1000ml量瓶中，加 20%氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液 10ml，置 1000ml量瓶中，加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每 lml相当于1ug 的As）。9.1.2碘化钾试液：取碘化钾16.5g，加水使溶解成100ml，即得。（本液应临用新制）9.1.3酸性氯化亚锡试液：取氯化亚锡20g，加盐酸使溶解成50ml，滤过，即得。（本液配成后3个月即不适用）9.1.4乙醇制溴化汞试液：取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热溶解，即得。（本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存）9.1.5溴化汞试纸：取质地较疏松的中速定量滤纸条浸入乙醇制溴化汞试液中，1小时后取出，在暗处干燥，即得。（本试纸应置棕色磨口塞玻璃瓶中保存）9.1.6醋酸铅试液：取醋酸铅10g，加新沸过的冷水溶解后，滴加醋酸使溶液澄清，再加新沸过的冷水使成100ml，即得。9.1.7醋酸铅棉花：取脱脂棉花，浸入醋酸铅试液与水等容混合液中，湿透后，沥去过多的溶液，并使之疏松，在100以下干燥后，置棕色磨口塞玻璃瓶中保存。9.2检测法。9.2.1标准砷斑制备。取醋酸铅棉花（60100mg）撕成疏松状，每次少量，用细玻璃棒均匀地装入导气管中，装管高度为6080mm。于旋塞的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞盖并旋紧。精密量取标准砷溶液2ml，置测砷仪三角瓶中，加盐酸5ml与水 21ml，再加碘化钾试液 5ml与酸性氯化亚锡试液 5滴，在室温放置 10分钟后，加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气管密塞于 三角瓶上，并置2540水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。9.2.2样品检测取样品2g，置测砷仪三角瓶中，照标准砷斑的制备，自“加盐酸5ml与水 21ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。10.铁盐：含铁量不得过百万分之十。10.1试剂的配制：10.1.1稀盐酸（9.5%10.5%）：取盐酸234ml，缓缓加入适量水中，边加边搅拌，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，即得。10.1.2硫氰酸铵试液（30%）：取硫氰酸铵30g，加水使溶解成100ml，摇匀，即得。10.1.3标准铁贮备液（100g的Fe/ml）：取硫酸铁铵0.863g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得。10.2样品的检测：称取1g样品于小烧杯中，加水5ml，加稀盐酸4ml使样品溶解，加过硫酸铵0.05g，转移至纳氏比色管中，加水至35ml。最后加硫氰酸铵试液3ml，用水稀释至50ml，摇匀，即得样品管。精密量取0.1ml的标准铁贮备液于纳氏比色管中，加25ml水，加稀盐酸4ml，过硫酸铵0.05g，再加硫氰酸铵试液3ml，用水稀释至50ml，摇匀，即得标准管。在白纸上比较两管颜色，样品管颜色应该浅于标准管颜色。其中两管的操作应同时进行。11.硫酸盐：含硫酸根量不得过万分之二。11.1试剂的配制：11.1.1稀盐酸（9.5%10.5%）：取盐酸234ml，缓缓加入适量水中，边加边搅拌，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，即得。11.1.2氯化钡试液（25%）：取氯化钡的细粉25g，加水使溶解成100ml，摇匀，即得。11.1.3标准硫酸钾溶液（100g的SO4/ml）：取硫酸钾0.181g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。11.2样品的检测：称取0.7g样品于小烧杯中，加水5ml，加稀盐酸2ml使样品溶解，转移至纳氏比色管中，加氯化钡试液5ml，用水稀释至50ml，摇匀，放置10min即得样品管。精密量取1.4ml的标准硫酸钾溶液于纳氏比色管中，加25ml水，加稀盐酸2ml，加氯化钡试液5ml，用水稀释至50ml，摇匀后放置10min即得标准管。在黑色背景下比较两管颜色，样品管颜色应该浅于标准管颜色。其中两管的操作应同时进行。12.氯化物：含氯离子量不得过万分之二。12.1试剂的配制：12.1.1稀硝酸（9.5%10.5%）：取硝酸105ml，缓缓加入适量水中，边加边搅拌，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，即得。12.1.2硝酸银试液（0.1mol/L）：取硝酸银17.5g，加水使溶解成1000ml，摇匀，即得。12.1.3标准氯化钠贮备液（100g的Cl/ml）：取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。12.2样品的检测：称取0.3g样品于小烧杯中，加稀硝酸10ml试样品溶解。加水25ml后转移至纳氏比色管中，加入硝酸银试液1ml，用水稀释至50ml，充分摇匀，在暗处放置5min即得样品管。精密量取标准氯化钠贮备液0.6ml于纳氏比色管中，加水25ml溶解，加稀硝酸10ml，加入硝酸银试液1ml，用水稀释至50ml，充分摇匀，在暗处放置5min即得标准管。在黑色背景下比较两管颜色，样品管颜色应该浅于标准管颜色。其中两管的操作应同时进行。 13.含量测定：按干燥品计算，含量不得少于98.5%。13.1试剂的配制：13.1.1高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取无水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐230ml，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰乙酸适量使成10000ml,摇匀，放置24小时，即得。然后再用已经干燥至恒重的邻苯二甲酸氢钾标定具体浓度。13.1.2结晶紫指示液：取结晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，摇匀，即得。13.2样品的滴定：称取本品约0.13g，精密称定，放入250ml三角瓶中，加无水甲酸3ml使样品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴，立即用已标定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.52mg的C9H11NO2），溶液颜色由紫色变至蓝绿色为终点。同时另取一个空瓶进行空白试验，即加入无水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴后滴定至终点。记录滴定的体积和滴定时的温度。13.3计算： 含量%C （VV0） 0.1652100%1 + 0.0011 （tt0） m （1W）式中：C高氯酸滴定液的准确浓度（mol/L）；V样品滴定时消耗的滴定液的体积； V0空白试验中消耗的滴定液体积；t滴定时的室温；m样品的称样量；t0标定滴定液时的室温； W样品的干燥失重量14.铵盐 取本品0.10g，依法检查(附录 K)，与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更深(0.02%)。15.其他氨基酸 取本品，精密称定，加水制成每1ml中含6mg的溶液，照薄层色谱法(附录 B)试验，吸取上述溶液5l，点于硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(5:2:1)为展开剂，展开，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液(150)，在90加热至显色，立即检视，应只显一个紫色斑点。16.细菌内毒素 取本品，加入细菌内毒素检查用水，并加热至80使其溶解，依法检查(附录 E)，每1g苯丙氨酸中含内毒素的量应小于25EU（供注射用）。【类别】氨基酸类药。【贮藏】密封保存。二、美国食品化学法典第五版（FCCV）【描 述】L-苯丙氨酸为无色或白色片状结晶，或白色结晶性粉末，1g本品可溶解于35mL的水中，微溶于乙醇、稀酸以及碱性氢氧化物溶液中。在283左右时熔解，1:100的水溶液其pH为5.46.0。功能 营养物【要 求】鉴别 在相同波长下，按照相同的测试条件，样品的红外吸收谱图应与标准色谱图一致。含量 折干计算，应不小于98.5%且不大于101.5%铅 不大于5 mg/kg干燥失重 不大于0.2%比旋度 D20：33.235.2（折干计算）；或者D25：32.7 34.7（折干计算）灼烧残渣 不大于0.1%【检 验】含量 1.试剂的配制：1.1高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取无水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐230ml，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰乙酸适量使成10000ml,摇匀，放置24小时，即得。然后再用已经干燥至恒重的邻苯二甲酸氢钾标定具体浓度。1.2结晶紫指示液：取结晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，摇匀，即得。2.样品的滴定：称取本品约0.3g，精密称定，放入250ml三角瓶中，加无水甲酸3ml使样品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴，立即用已标定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.52mg的C9H11NO2），溶液颜色由紫色变至蓝绿色为终点。同时另取一个空瓶进行空白试验，即加入无水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴后滴定至终点。记录滴定的体积和滴定时的温度。3.计算： 含量%C （VV0） 0.1652100%1 + 0.0011 （tt0） m （1W）式中：C高氯酸滴定液的准确浓度（mol/L）； V样品滴定时消耗的滴定液的体积; V0空白试验中消耗的滴定液体积；t滴定时的室温；m样品的称样量；t0标定滴定液时的室温；W样品的干燥失重量铅 依据铅限度检测方法，附录IIIB，样品溶液的制备参考有机化合物的方法，标准铅（Pb）离子溶液控制在5ug之下。干燥失重 依据干燥失重的检测方法，附录IIC，将样品放置105烘干3小时。1.扁型称量瓶的恒重：取扁型称量瓶，在105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重后，再置105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。2.检测法：取供试品，混合均匀。分取约1g，置于105下干燥至恒重的扁形称瓶中（供试品干燥时，应平铺在扁形称瓶中，厚度不可超过5mm）精密称定。放入烘箱进行干燥时，应将瓶盖半开进行干燥，3个小时后取出。取出时，须将称瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器放冷至室温（约30分钟），然后称定重量。称定扁形称量瓶和供试品以及干燥后的恒重，均应准确至0.1mg位。3.计算： 干燥失重%W1W2100%W1W0式中：W0空瓶重(g); W1供试品+瓶重(g); W2干燥后供试品+瓶重(g)比旋度 依据比旋度的检测方法，附录IIB，将2 g的干燥样品充分溶解，制成100mL的溶液，依法检测。1.样品溶液：取本品1g，精密称定至0.0001g，加水溶解并稀释成50ml的溶液（每1ml中约含20mg的溶液）。样品溶解一定要完全，可用超声机助溶，溶解完溶液需澄清。2.空白溶剂：取溶解样品用超纯水适量。3.测定：用读数至0.001并经过检定的旋光计检测。将测定管用空白溶剂冲洗数次，缓缓注入空白溶剂适量（注意勿使发生气泡，测定管两端的玻璃镜片要擦拭干净），置于旋光计内校正读数，即空白溶剂的旋光度要为0。校正完毕以后用相同的方法检测样品溶液并记录下来，用同法读取旋光度3次，取3次的平均数。4.计算： 比旋度VL m （1W）式中：V稀释倍数；所测旋光度的均值；L测定用管的长度（dm） m称样量；W样品的干燥失重量5.以上溶液及测定的过程一定要调节温度至200.5灼烧残渣 依据灼烧残渣的检测方法，附录IIC，灼烧1g的样品。1.坩埚的恒重：将坩埚在600炽灼3小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重后，再置600炽灼2小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。2.样品的测定：取供试品2.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，在电炉上缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；加硫酸0.51ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，再放入600的高温炉中炽灼使完全灰化，3个小时后关闭高温炉待炉温降至300左右再移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在600炽灼至恒重，即得。3.计算： 炽灼残渣%W2W0100%W1W0式中：W0空坩埚重(g)； W1供试品+坩埚重(g)； W2炽灼后供试品+坩埚重(g)包装和存储 密闭容器中避光保存。*备注：附录部分可以参考CP2005相对应的详细附录三、美国食品化学法典第四版（FCCIV）【描 述】L-苯丙氨酸为无色或白色片状结晶，或白色结晶性粉末，1g本品可溶解于35mL的水中，微溶于乙醇、稀酸以及碱性氢氧化物溶液中。在283左右时溶解，1:100的水溶液其pH为5.46.0。食品中的功能 营养物，食品添加物【要 求】鉴别 A、取0.1%试样液5mL, 加水合茚三酮试液1mL，加热，呈现红紫色。 B、取1%试样液5mL, 加几滴重铬酸钾指示液，有特殊气味产生。 C、取10mg样品，加上500mg的硝酸钾，以及2mL的硫酸，水浴中加热混合物10分钟，然后加入10ml的1N氢氧化钠溶液，呈现红紫色。含量 折干计算，应不小于98.5%且不大于101.5%重金属（以Pb计） 不大于0.002%铅 不大于10 mg/kg干燥失重 不大于0.2%灼烧残渣 不大于0.1%比旋度 D20：33.235.2（折干计算）；或者D25：32.7 34.7（折干计算）【检 验】含量 准确称取大约300mg的样品，溶解于3mL的甲酸和50mL的乙酸中，加入2滴的结晶紫指示剂，用0.1N的高氯酸滴定至青绿色终点。(注意 应在通风橱中操作使用高氯酸，)需滴定空白液（详见总则），并做校正修订。每1ml的0.1N的高氯酸相当于16.52 mg 的C9H11NO2。1.试剂的配制：1.1高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取无水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐230ml，边加边摇，加完后再振摇均匀，放冷，加无水冰乙酸适量使成10000ml,摇匀，放置24小时，即得。然后再用已经干燥至恒重的邻苯二甲酸氢钾标定具体浓度。1.2结晶紫指示液：取结晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，摇匀，即得。2.样品的滴定：称取本品约0.3g，精密称定，放入250ml三角瓶中，加无水甲酸3ml使样品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴，立即用已标定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.52mg的C9H11NO2），溶液颜色由紫色变至蓝绿色为终点。同时另取一个空瓶进行空白试验，即加入无水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入结晶紫指示液2滴后滴定至终点。记录滴定的体积和滴定时的温度。3.计算： 含量%C （VV0） 0.1652100%1 + 0.0011 （tt0） m （1W）式中：C高氯酸滴定液的准确浓度（mol/L）； V样品滴定时消耗的滴定液的体积; V0空白试验中消耗的滴定液体积；t滴定时的室温；m样品的称样量；t0标定滴定液时的室温；W样品的干燥失重量重金属 准确称取1g样品，按照重金属检测方法二，附录IIIB，标准铅（Pb）离子溶液控制在20ug。1.试剂的配制：1.1标准铅溶液的制备：称取在105干燥至恒重硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Pb）。配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。1.2氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得1.3醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5，用水稀释到100ml，即得。1.4硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒，冷却，立即使用。2.检测法：取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中用同法蒸干后，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液2.0ml，再用水稀释成25ml；再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，供试品管中显出的颜色与对照品管比较，不得更深。铅 依据铅限度检测方法，附录IIIB，样品溶液的制备参考有机化合物的方法，标准铅（Pb）离子溶液控制在10ug。干燥失重 依据干燥失重的检测方法，附录IIC，将样品放置105烘干3小时。1.扁型称量瓶的恒重：取扁型称量瓶，在105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重后，再置105干燥1小时，取出置干燥器冷却至室温（约30分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。2.检测法：取供试品，混合均匀。分取约1g，置于105下干燥至恒重的扁形称瓶中（供试品干燥时，应平铺在扁形称瓶中，厚度不可超过5mm）精密称定。放入烘箱进行干燥时，应将瓶盖半开进行干燥，3个小时后取出。取出时，须将称瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器放冷至室温（约30分钟），然后称定重量。称定扁形称量瓶和供试品以及干燥后的恒重，均应准确至0.1mg位。3.计算： 干燥失重%W1W2100%W1W0式中：W0空瓶重(g)；W1供试品+瓶重(g)； W2干燥后供试品+瓶重(g)比旋度 依据比旋度的检测方法，附录IIB，将2 g的干燥样品充分溶解，制成100mL的溶液，依法检测。1.样品溶液：取本品1g，精密称定至0.0001g，加水溶解并稀释成50ml的溶液（每1ml中约含20mg的溶液）。样品溶解一定要完全，可用超声机助溶，溶解完溶液需澄清。2.空白溶剂：取溶解样品用超纯水适量。3.测定：用读数至0.001并经过检定的旋光计检测。将测定管用空白溶剂冲洗数次，缓缓注入空白溶剂适量（注意勿使发生气泡，测定管两端的玻璃镜片要擦拭干净），置于旋光计内校正读数，即空白溶剂的旋光度要为0。校正完毕以后用相同的方法检测样品溶液并记录下来，用同法读取旋光度3次，取3次的平均数。4.计算： 比旋度VL m （1W）式中：V稀释倍数；所测旋光度的均值；L测定用管的长度（dm） m称样量； W样品的干燥失重量5.以上溶液及测定的过程一定要调节温度至200.5灼烧残渣 依据灼烧残渣的检测方法，附录IIC，灼烧1g的样品。1.坩埚的恒重：将坩埚在600炽灼3小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重后，再置600炽灼2小时，取出置干燥器冷却至室温（约60分钟），精密称重，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下，方可进行以下步骤。2.样品的测定：取供试品2.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，在电炉上缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；加硫酸0.51ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，再放入600的高温炉中炽灼使完全灰化，3个小时后关闭高温炉待炉温降至300左右再移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在600炽灼至恒重，即得。3.计算： 炽灼残渣%W2W0100%W1W0式中：W0空坩埚重(g); W1供试品+坩埚重(g); W2炽灼后供试品+坩埚重(g)包装和存储 密闭容器中避光保存。*备注：附录部分可以参考CP2005相对应的详细附录四、美国药典第29版（USP29）含量：98.5%101.5%（C9H11NO2即L-苯丙氨酸，成品按干品计）包装与储存：放置在密封容器内USP对照标准品（11）：USPL-苯丙氨酸对照标准品L-酪氨酸对照标准品。鉴别：红外吸收（197K）比旋度（781S）：-32.7-34.7样品溶液：20mg/ml(溶于水)PH（791）：5.46.0，按1：100溶解干燥失重（731）：于105干燥3小时，0.3%炽灼残渣（281）：0.4%氯化物（221）：0.73g样品所含的氯化物不能超过相当于0.50ml的0.02mol/L的盐酸量，0.05%硫酸盐：0.33g样品所含的硫酸盐不能超过0.10ml的0.02mol/L硫酸量，0.03%铁盐（241）：0.003%重金属，方法（231）：0.0015%色谱纯度吸附剂0.25mm厚的层析硅胶G混合物。稀释液配制冰乙酸水溶液（50：50）样品溶液精确称量L-苯丙氨酸用稀释液溶解成10mg/ml，吸取5ul.标准品溶液精确称量USP L-苯丙氨酸对照标准品用稀释液溶解成0.05mg/ml,吸取5ul（备注：该标准品溶液的浓度相当于0.5%的样品溶液。）相应系统溶液用稀释液配制0.4mg/ml的USP L-苯丙氨酸对照标准品溶液和0.4mg/ml的USP L-酪氨酸对照标准品溶液，各吸取5ul 。喷雾显色剂0.2g茚三酮溶于100ml正丁醇乙酸溶液中（按95：5配制）。显影溶剂正丁醇，冰乙酸和水按60：20：20混合。操作过程：直接按照色谱法下的薄层色谱法操作。硅胶板在空气中自然晾干，喷以喷雾显色剂，在100105下加热15min，后在白光下观察结果。系统适应性溶液得到的图谱是两个清晰独立的点。由样品溶液得到的图谱中的任何第二个点都不得大于或更深于有标准溶液得到的图谱中的第一个点：任何单个杂质0.5%，杂质的总和2.0%有机的挥发性杂质：符合方法（467）要求。残留溶剂：符合方法（467）要求。含量：精确称量160mg苯丙氨酸到125ml三角瓶，加入3ml的蚁酸和50ml的冰乙酸混合液溶解，用0.1N的高氯酸滴定，通过电位滴定法判断终点，需做空白实验和必要的校正。每1ml的0.1N高氯酸相当于16.52mg的C9H11NO2。*备注：附录部分可以参考CP2005相对应的详细附录五、企业标准（食品）本标准所采用的试剂和水，在没有其他特殊要求时，均使用符合GB/T603-2002和GB/T6682-1992规定的分析纯试剂和蒸馏水或相当纯度的水。5.1感官指标取本品少许，放于无色烧杯中，在良好的自然光线下，用肉眼观察其色泽、形态，并用鼻嗅、口尝方法，品其滋、气味。5.2理化指标5.2.1鉴别5.2.1.1试剂5.2.1.1.1 水合茚三酮试液: 取水合茚三酮 (C9H4O3 H2O)200mg溶于水, 定容至100mL；5.2.1.1.2 硝酸钾；5.2.1.1.3 硫酸；5.2.1.1.4 溴酚蓝试液: 取溴酚蓝100mg, 溶于100mL50%的乙醇中, 必要时过滤；5.2.1.1.5 氢氧化钾乙醇液: 35g氢氧化钾溶于20mL水, 加无醛乙醇试液至1000mL, 然后进行标定；(0.5mol/L)5.2.1.1.6 盐酸羟氨试液: 取盐酸羟氨3.5g, 溶于95mL60%的乙醇, 加0.1%溴酚蓝试液0.5mL及0.5mol/L氢氧化钾乙醇液, 至出现淡绿色为止. 再用60%乙醇定容至100mL；5.2.1.1.7 氢氧化钠试液: 取氢氧化钠4.3g, 溶于水, 定容至100mL.(本试液约为1mol/L)。5.2.1.2仪器和设备5.2.1.2.1 1mL刻度的具玻塞量筒：100mL；5.2.1.2.2 恒温水浴；5.2.1.2.3 分析天平；5.2.1.2.4 标定后的刻度滴定管（精确度0.01mL）。5.2.1.3分析步骤5.2.1.3.1氨基试验取1%试样液5mL, 加水合茚三酮试液1mL, 共热,阳性结果是红紫色。5.2.1.3.2羧基试验取试样10mg, 加硝酸钾500mg和硫酸2mL, 在水浴上加热20min, 冷却后，加盐酸羟氨试液2mL, 浸入冰水中10min后加氢氧化钠试液10mL, 阳性结果是红紫色。5.2.2 L-苯丙氨酸含量5.2.2.1试剂和溶液5.2.2.1.1 无水甲酸；5.2.2.1.2 冰醋酸；5.2.2.1.3 高氯酸标准滴定液： C (HClO4)=0.1000mol/L；5.2.2.1.4 结晶紫指示液：5g/L。5.2.2.2 仪器和设备5.2.2.2.1 烧杯：150mL；5.2.2.2.2 微量滴定管：10mL。5.2.2.3 分析步骤准确称取0.3000g本产品，放到一个150mL烧杯中，加入3mL无水甲酸，溶解后，再加50mL冰醋酸。加结晶紫指示液，立即用0.1 mol/L高氯酸标准滴定液滴定到蓝绿色终点，同时进行一个空白对照，做一个必要的校准。每毫升0.1 mol/L高氯酸相当于L-苯丙氨酸（C9H11NO2）16.52mg。5.2.2.4分析结果的表述L-苯丙氨酸含量（以C9H11NO2计）的质量百分数X1按式（1）式计算：X1 =C(V1V2) 0.1652100(1)m式中：C高氯酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）；V1样品滴定中高氯酸标准滴定溶液的消耗体积，单位为毫升（mL）；V2空白试验中高氯酸标准滴定溶液的消耗体积，单位为毫升（mL）；0.1652与1.00mL高氯酸标准滴定溶液C (HClO4)=0.1000mol/L 相当的以g表示的本产品的质量；m本产品试样的质量，单位为克（g）。5.2.2.5校正若滴定试样与标定高氯酸标准液时，室温差别超过10时，则应重新标定；若未超过10时，则可根据式（2）将高氯酸标准液的浓度C1加以校正。C2=C1(2)1+0.0011 (t2 - t1)式中：1+0.0011冰乙酸的膨胀系数；t2标定高氯酸时的室温，单位为摄氏度（）；t1滴定试样时的室温，单位为摄氏度（）；C1t2时高氯酸标准液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）。5.2.3水分按GB/T5009.3-2003中规定第二法测定。5.2.4比旋光度D20将1.000g样品溶在水中，定容体积为100mL，用旋光仪在30min内检测样品溶液。计算方法：xt 100a/lpd100a/lC （3）式中：a直接观察的旋光度，单位为度；t温度；x使用的光的波长；l旋光计管的长度，单位为分米；d液体或固体溶液在此温度下的比重；p100g溶液中溶质的含量；C100mL溶液中溶质的浓度。注： P和C在干燥或无水基础上被计算。5.2.5灰分的测定按GB/T5009.4-2003中规定的方法测定。5.2.6重金属按GB/T5009.74-2003中规定的方法进行测定.5.2.7砷按GB/T5009.76-2003中规定的方法进行测定.5.2.