双乙酰的测定方法有气相色谱法.doc

双乙酰的测定方法有气相色谱法、极谱法和比色法等等。邻苯二胺比色法是凡遇连二酮类都能发生显色反应的方法，所以，此法测得之值为双乙酰与戊二酮的总量，结果偏高，但此法测定快速简便。1原理用蒸汽将双乙酰从样品中蒸馏出来，加入邻苯二胺后，形成2，3-二甲基喹喔啉。在335nm 波长下有一最大吸收峰，其吸光度与双乙酰的含量符合朗伯-比尔定律，可对样品的双乙酰含量进行定量测定。2试剂（1）4mol/L 盐酸取浓盐酸150mL，注入300mL 蒸馏水中。（2）1%邻苯二胺精密称取分析纯邻苯二胺0.25g 溶解于4mol/L 盐酸中，并定容至25mL，摇匀。贮存于棕色瓶中，应当日配制。3仪器（1）紫外分光光度计（2）双乙酰蒸馏装置一套 (见图6-1)4测定步骤（1）蒸馏按图 6-1 把双乙酰蒸馏器安装好，把排气夹子7 打开，置内装2.5mL 蒸馏水的容量瓶(或量筒)于冷凝器下端，使馏出口尖端浸没在水面下，外加冰水冷却。加热蒸汽发生器至沸，通汽加热夹套蒸馏器，备用。于100mL 量筒中先加入24 滴消泡剂，再注入5左右未除气啤酒100mL。待夹套蒸馏器下端冒大汽时，打开进样口瓶塞，将啤酒迅速注入到蒸馏器内，再用约10mL 蒸馏水冲洗量筒，洗液同时倒入，迅速盖好进样口塞子。用水封口，待夹套蒸馏器下端再次冒大汽时，将排气夹子夹住，开始蒸馏，接馏液，直到馏出液接近25mL 时取下容量瓶，用水定容至25mL，摇匀(蒸馏应在3 分钟内完成。)（2）显色混匀馏出液，分别吸取馏出液 10mL 于两支比色管中。一管作为样品管加入0.5mL1%邻苯二胺溶液，另一管不加作空白，充分摇匀后，同时置于暗处放置2030 分钟，然后于样品管中加2mL 4 mol/L 盐酸溶液，于空白管中加2.5mL4mol/L 盐酸溶液，混匀。（3）测定在 335nm 波长处，用2cm 比色皿以空白作对照测定样品吸光度。5计算(mg/L) 1.2 235 双乙酰 = A 式中 样品吸光度，指用2cm 比色皿测得的，若用1cm 比色皿，则吸光度乘以2；1.2换算系数，系多次用纯双乙酰测得的吸光度和双乙酰含量的换算系数6注意事项1）在能达到消泡效果的情况下，消泡剂的用量越少越好。用量过高会使测定结果出现较大的正误差。2）蒸馏时加入试样要迅速，勿使双乙酰损失。蒸馏要求在3 分钟内完成。严格控制蒸汽量，勿使泡沫过高，被蒸汽带出而导致蒸馏失败。3）显色反应在暗处进行，否则导致结果偏高4）发酵液、清酒液、桶(罐)装啤酒，采样后应立即测定，不需经过样品处理。5）瓶(听)装啤酒：先将原瓶(听)装啤酒浸入冰水浴，使其品温降至5以下，开盖，立即注入已加消泡剂的100 mL 量筒，无须进行样品处理。7允许差在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过 0.01 mgL。酱油中盐分的测定、酱油中食盐的测定、罐头食品中氯化钠的测定铵盐1原理铵盐在弱碱性溶液中加热蒸馏，使氨游离蒸出，被硼酸溶液吸收，然后用盐酸标准溶液滴定，计算出铵盐的含量。2试剂（1）氧化镁（2）2%硼酸溶液（3）混合指示剂0.2%甲基红乙醇溶液1 mL 与0.2%溴甲酚绿乙醇溶液5 mL 相混合。（4）0.10mol/L 盐酸标准溶液3仪器一般冷凝蒸馏装置4操作方法准确称取酱油或酱类 2.0g，置于500mL 蒸馏瓶中，加水约150mL，氧化镁约1 g。接好蒸馏装置，并使冷凝管尖端插入接受瓶内的液面以下，瓶内预先放有2%硼酸溶液10mL 及混合指示剂3 滴，加热蒸馏。收集馏出溶液约 150mL，用少量水洗涤冷凝管尖端，停止蒸馏，用0.1mol/L 盐酸标准溶液滴定至灰红色终点为止。记录消耗盐酸标准溶液的体积。5计算( ) 0.017 100 1 2 =mx V V c式中 x样品中铵盐（以氨计）的质量分数（%）；V1滴定样液消耗盐酸标准溶液体积(mL)；V2滴定空白消耗盐酸标准溶液体积（mL）；c盐酸标准滴定溶液的实际浓度（mol/L）m样品重量（g）0.017与1.00mL 盐酸标准滴定溶液c（HCl）=1.000mol/L相当的氨的质量（g）硫酸盐的测定一、铬酸比色法1原理样液中的硫酸盐在盐酸中与铬酸钡生成硫酸钡沉淀，样液被中和后，多余的铬酸钡和生成的硫酸钡呈沉淀状态，可以过滤除去。滤液中含有硫酸根所取代出的铬酸离子，可以比色测定求出硫酸盐的量。2试剂（1）铬酸钡悬浮液称取 19.44g 铬酸钾和24.44g 氯化钡，分别溶于1000mL 水中，加热至沸腾后，两液倾入3000mL 烧杯内，生成黄色铬酸钡沉淀。待沉淀下沉后，倾出上层液体，用水1000mL 冲洗沉淀5 次左右，最终加水至1000mL，呈悬浮液。于每次使用前混匀。（2）2.5 molL 盐酸溶液（3）1:2 氨水溶液（4）硫酸盐标准溶液 准确称取1.4787g 经干燥的无水硫酸钠，溶于水中，移入1000 mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液为每毫升相当于1 mg 硫酸根（ ）的标准溶液。3仪器分光光度计4操作方法（1）样品测定称取食盐2.04.0g，移入三角烧瓶中，加入50mL 水，待食盐溶解后，加入1 mL 2.5 molL 盐酸溶液，加热煮沸5 min。然后加入2.5mL 铬酸钡悬浮液，再煮沸5min 左右，使铬酸钡和硫酸盐生成硫酸钡沉淀。冷却，加入1:2 氨水溶液中和直至溶液呈柠檬黄色为止。将溶液过滤于50mL 比色管中，用少量水洗涤三角烧瓶，收集滤液于比色管中，用水稀释至刻度。以水为空白对照，用分光光度计在波长420nm 处测得吸光度，并从标准曲线中查出硫酸盐含量。（2）标准曲线的绘制准确吸取上述硫酸盐标准溶液 0.0，0.5、1.0、1.5、2.0 和2.5mL，移入三角烧瓶中，加水至50mL，以下操作方法按样品测定方法进行，测得各浓