显齿蛇葡萄的化学成分及药理作用研究进展.docx

显齿蛇葡萄的化学成分及药理作用研究进展 显齿蛇葡萄的化学成分及药理作用研究进展 显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata （Hand-Mazz） W.T.Wang是葡萄科蛇葡萄属的一种野生藤本植物，主要分布于广东、广西、云南、贵州、湖南、湖北、江西、福建等地。由显齿蛇葡萄的嫩叶经过杀青、揉捻、烘干而成的类茶饮料称为藤茶。藤茶为药食两用植物，其加工产品有藤茶饼、袋泡茶、速溶茶、含片以及果冻等2-4。 藤茶性微温，有疏风解毒、祛瘀消肿、止血止痛等功效。国内外学者在生药学、化学成分、药理作用、临床应用等方面对显齿蛇葡萄进行了大量研究，特别是从中发现了许多新的生物活性，并阐明了其作用机理。笔者对显齿蛇葡萄的化学成分及药理作用进行了综述，为其综合开发利用奠定基础。 1化学成分 1.1黄酮类化合物 显齿蛇葡萄中黄酮类化合物的含量高达45%（图1），主要有二氢杨梅素、（2R，3S） -5，7，3′，4′，5′-五羟基二氢黄酮醇、杨梅素、杨梅素-3-O-L-鼠李糖苷、杨梅素-3′-O-β-D-吡喃木糖苷、杨梅素-3-O-β-D-半乳糖苷、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、山柰酚、紫云英苷、阿福豆素、芹菜素、二氢山柰酚、5，7，3′，4′，5′-五羟基二氢黄酮、橙皮素、旗松素5-6。 1.2酚类目前，显齿蛇葡萄中酚类化合物有没食子酸、没食子酸乙酯、没食子酸甲酯、儿茶素、表儿茶素等。 1.3氨基酸类及微量元素 显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中总氨基酸含量高达2.53 g/l00 g，包含17种氨基酸，8种人体所必需的氨基酸，其中包括γ-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸。同时，研究发现显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中包含多种微量元素。其中，对人体健康与疾病防治有重要影响的无机元素如Fe、Cu、Mn、Zn、Se等在显齿蛇葡萄中均有较高含量。 1.4多糖 熊皓平等分析不同季节显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中水浸出物、水溶性糖和氨基酸总量发现，显齿蛇葡萄春、夏幼嫩茎叶的水浸出物含量最高，水溶性糖含量约为 10%，氨基酸含量约为5%。罗祖友等从显齿蛇葡萄中分离得到2种蛋白质的复合多糖AGP-3、AGP-4，经过鉴定两者均为分子量相对均一的蛋白多糖。 1.5甾体及萜类化合物 从该植物中分离得到的甾体主要有豆甾醇（stigmasterol）、齐墩果酸（oleanplic acid）、β-谷甾醇（β-sitosterol）等10-12。袁阿兴等研究发现显齿蛇葡萄中萜类化合物主要为龙涎香醇。 1.6挥发油类成分显齿蛇葡萄叶中香气成分主要有α-萜品醇、β-环梓檬醛、芳樟醇、壬酸、癸酸、橙花醇、香叶基丙酮、β-紫罗兰酮、2，4-二叔丁基苯酚、橙花叔醇、柏木脑、邻苯二甲酸异丁基辛基酯、金合欢基丙酮、氯二苯甲酮等；茎中香气成分为香叶醇、水杨酸甲酯、壬酸、癸酸、香叶基丙酮、6，10，14-三甲基-2-十五烷酮、柏木脑、β-毕橙茄醇、邻苯二甲酸二异丁酯。这些特征香气成分是造成显齿蛇葡萄制品具有特殊青味的成分。 2药理作用及其机制 2.1抗氧化作用 Wang等研究发现黄酮类和酚类是显齿蛇葡萄茎提取物中主要负责DPPH自由基清除活动的物质。梁琍等研究梵净山野生藤茶中二氢杨梅素的体外抗氧化作用发现，在试验浓度范围内，藤茶中二氢杨梅素清除 DPPH的能力高于芦丁，二氢杨梅素浓度达 50 mg/L 时，其清除率高于Vc；随着二氢杨梅素浓度的增加，其清除OH 的能力逐步提高。Zheng等研究发酵藤茶（显齿蛇葡萄）中主要总黄酮类化合物的成分和其抗氧化作用发现，大鼠给予100 mg/kg的二氢杨梅素后，在4 h时大鼠血清对DPPH还原水平达到最高，在4 h后开始下降；与二氢杨梅素相比，总黄酮类化合物显示出同样的时间依赖，但抗氧化活性更高。Kou等分析显齿蛇葡萄中蛇葡萄素对H2O2诱导的PC12细胞中的细胞凋亡的神经保护作用表明，蛇葡萄素可通过激活ERK和Akt的信号途径来强化细胞的抗氧化防御，同时诱导HO-1的表达，从而保护PC12细胞中H2O2诱导的细胞凋亡。肖浩等研究发现藤茶多酚是一种较好的天然抗氧化剂，在相同浓度的情况下，藤茶多酚对OH和O2本文由收集整理-的清除能力比Vc强。同时，藤茶多糖在一定浓度范围内也具有显著的体外抗活性氧能力。 2.2抑菌作用 显齿蛇葡萄的提取物对常见呼吸道致病菌如葡萄球菌、肺炎球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌等均有抑制效果。研究发现，显齿蛇葡萄总黄酮直接作用于金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌时有明显的抑菌作用，特别对临床分离金黄色葡萄球菌作用更强；显齿蛇葡萄总黄酮局部用药时，药物浓度达抑菌浓度以上，对某些细菌的抑菌作用优于华素片（西地碘）。显齿蛇葡萄总黄酮还具有一定的体内抑菌作用。广西藤茶提取物APS 对金葡菌、MRSA 的TdR、UR合成均有明显的抑制作用，但对绿脓杆菌的TdR、UR的合成无明显的抑制作用。熊大胜等通过体外抑菌试验表明，显齿蛇葡萄嫩茎叶提取物对金黄葡萄球菌、枯草杆菌均有很强的抑制作用，对黑曲霉、黄曲霉、青霉、交链霉均有不同程度的抑制效果。 2.3抗炎、镇痛 张亚兵研究发现蛇葡萄素能减轻三硝基苯磺酸/乙醇诱导的大鼠试验性结肠炎，其作用机制与蛇葡萄素下调结肠NF-kB p65表达、Th1促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和上调Th2抑炎性细胞因子IL-10有关。Hou等分析发现显齿蛇葡萄中二氢杨梅素通过抑制NF-kB的激活以及p38和JNK的磷酸化来发挥其局部抗炎作用；二氢杨梅素既能抑制LPS处理的小鼠体内促炎性细胞因子水平，如TNF-α、IL-1β和IL-6，也能增加抗炎细胞因子IL-10水平；二氢杨梅素能减少巨噬细胞中一氧化氮合酶（iNOS）、TNF-α和环氧合酶-2（COX-2）的蛋白表达量；二氢杨梅素抑制了经LPS刺激的巨噬细胞NF-kappa B（NF-κB）和IκBα的磷酸化以及p38和JNK的磷酸化。钟正贤等用小鼠耳廓肿胀和小鼠扭体试验研究显齿蛇葡萄提取物的消炎镇痛作用，结果表明其明显抑制小鼠耳廓肿胀，减少小鼠扭体次数，具有抗炎、镇痛作用。林建峰等证实显齿蛇葡萄水提取液对小鼠醋酸性扭体反应和热水反应有一定的镇痛作用，能提高小鼠的痛阈水平。 2.4抗癌作用Jeon等采用体外细胞毒性抑制试验，发现二氢杨梅素对人体常见致癌细胞， 如肺癌 H1299 细胞、白血病 HL-60、K562细胞均有较强的抑制作用。姚欣等通过采用流式 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率，研究显齿蛇葡萄提取物对人前列腺癌 LNcap 细胞凋亡的作用，结果表明，藤茶提取物可显著诱导 LNcap 细胞凋亡，在加入提取物24 h后，肿瘤细胞的凋亡率显著上升，且呈量效关系。杨秀芬等分析发现蛇葡萄素与苯并芘合用，可明显诱导CYP1A 1、CYP1A 2基因和谷胱甘肽-S转移酶基因GST-m 1、GST-pi的表达，表明两者合用可以加速苯并芘代谢形成非致癌物而解毒和加速排泄。Zhou等研究显齿蛇葡萄中二氢杨梅素对高转移性人乳腺癌MDA-MB-231细胞的细胞侵袭作用及其机制发现，二氢杨梅素能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖、明胶酶活性和MMP-2/-9蛋白质表达水平，并抑制MMP-2/-9 mRNA的表达水平；二氢杨梅素抑制MDA-MB-231细胞的侵袭来对抗癌细胞，侵袭的抑制可能与MMP-2/-9蛋白表达水平的下降有关。Zhao等研究发现显齿蛇葡萄中二氢杨梅素（DHM）潜在的抗肿瘤活性与p38 MAPK和AMPKα/ GSK-3β/ Sox2信号通路有关，且一些患者化疗后出现较低的p-AMPK表达量，表明DHM可以成为治疗骨肉瘤的候选药。Zeng等评估显齿蛇葡萄中DHM在细胞增殖、细胞周期分布和人类黑色素瘤SK-MEL-28细胞系中细胞凋亡的作用发现，DHM可作为一个抑制黑色素瘤细胞增长的新型有效的候选药物。此外，Xia等研究发现二氢杨梅素诱导的自噬抑制了HepG2细胞的细胞增殖，其机制参与抑制mTOR的激活和调节相关的上游信号通路。 2.5降血脂、降血糖 显齿蛇葡萄具有明显的降血脂作用，陈玉琼等研究恩施高硒藤茶水提取物（ESTC）发现，ESTC对大鼠TC、TG有明显的降低作用，对HDL-C有明显的升高作用，说明 ESTC 对试验大鼠有辅助降血脂作用；人体临床试验表明，试验组服用ESTC 30 d后，受试组血清胆固醇、甘油三酯明显下降，与试用前及对照组比较，差异极显著，说明ESTC对人体也具有辅助降血脂的功能。梁柱第等研究发现藤茶双氢杨梅素对动脉粥样硬化具有一定的防治作用，其作用机制是通过改善动脉粥样硬化大鼠炎症因子水平，抑制sPLA2-II AmRNA 的表达。黄先菊等研究蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠的降糖作用发现，高、低剂量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平。由于骨骼肌胰岛素抵抗（SMIR）在2型糖尿病的发病机理中起着重要的作用，Shi等研究二氢杨梅素对SMIR的影响及其机制表明，二氢杨梅素可通过由AMPK信号通路的激活诱导的自噬来改善SMIR，从而给2型糖尿病的治疗带来新思路。Jiang等研究二氢杨梅素对甲基乙二醛诱导的PC12细胞中氧化应激和葡萄糖转运活性影响及其相关机制发现，二氢杨梅素能够抑制PC12细胞中氧化应激，平衡葡萄糖代谢；二氢杨梅素降低GLUT4的转运功能障碍，提高Glo-1和 p-AMPKα的表达量；二氢杨梅素能够保护PC12细胞抵抗甲基乙二醛诱导的细胞凋亡和糖代谢紊乱，成为一种新型治疗糖尿病患者脑病的候选试剂。 2.6保肝作用 Murakamia等研究大鼠的D-氨基半乳糖诱导的肝损伤发现，显齿蛇葡萄茎和叶中保肝作用的主要成分是二氢杨梅素，含有1%的50%乙醇提取物和0.1%二氢杨梅素的食物显著地抑制了LDH、ALT、AST、α-维生素E水平和半乳糖胺引起的GSG/ GSSH的增加。徐静娟等采用保健食品检验与评价技术规范提供的方法，研究从显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的生物功效，发现二氢杨梅素能够有效地预防乙醇性肝损伤；二氢杨梅素毒性很小，对小鼠灌胃30 d 后能有效地阻止乙醇导致的肝脏GSH耗竭和MDA升高，能降低TG含量，减轻肝细胞脂肪变性。Chen等研究二氢杨梅素对非酒精性脂肪肝病人的葡萄糖和脂质代谢，炎症介质以及几个生物指标的影响，并进行了双盲临床试验，结果表明，二氢杨梅素的补充可改善非酒精性脂肪肝疾病患者的糖脂代谢以及各种生化参数，其治疗效果可能归因于其可改善胰岛素抵抗，降低肿瘤坏死因子-α、细胞角蛋白-18和成纤维细胞生长因子-21的血清水平。 2.7增强免疫 阎莉等报道显齿蛇葡萄总黄酮通过提高正常小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能，促进血清溶血素和补体C3的生成，增加总补体活性，能够增强正常小鼠的免疫功能。曾春晖等分析发现广西藤茶提取物APS可以明显提高小鼠的脾脏指数，增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的功能，增强淋巴细胞的增殖反应，增加溶血素抗体水平和2，4-二硝基氯苯诱导的小鼠耳肿胀，使小鼠免疫增强。此外，藤茶多糖也具有增强荷瘤小鼠免疫能力的作用。 2.8抗病毒阎莉等研究藤茶中APS的体内抗鸭乙肝病毒作用表明，APS对感染鸭血清DHBV-DNA水平均有显著的抑制作用，且停药3 d未见明显的反跳现象，说明APS有抑制乙肝病毒的作用。此外，藤茶还能防止敏感细胞感染艾滋病病毒（HIV-1），显著降低HIV-1P24抗原的表达，干扰HIV-1SF33吸附到MT-4细胞。 2.9其他作用 方会龙等研究显齿蛇葡萄提取物对血吸虫病肝纤维化的治疗作用表明，其提取物可改善血吸虫病肝脏形态及肝纤维化小鼠肝组织结构，减轻肝纤维化程度，对血吸虫病肝纤维化有明显的治疗作用。陈立峰等研究显齿蛇葡萄总黄酮抗口腔黏膜溃疡的作用发现，显齿蛇葡萄总黄酮能使表皮葡萄球菌性、乙酸性口腔黏膜溃疡模型的溃疡直径明显缩小，炎症指数降低，表明显齿蛇葡萄总黄酮有减轻口腔黏膜溃疡炎症、促进溃疡愈合的作用。Meng等对新生大鼠心肌细胞用二氢杨梅素预处理（0320 μmol/L），随后用Ang II（100 nmol/L）刺激24 h，通过细胞表面分析来评价肥大的程度，结果表明，二氢杨梅素对Ang II诱导的心肌细胞肥大有抗氧化活性衰减作用，且其衰减与以NO依赖方式的抗氧化活性有关。高辉等研究二氢杨梅素对运动耐力的影响发现，二氢杨梅素具有抗疲劳作用，这一作用可能与其抑制组织的过氧化水平有关。潘人琦等证