课件：常见浅部真菌的标本采集及初步鉴定无视频.ppt

,常见浅部真菌的标本采集及初步鉴定,广东省中医院大学城医院检验科 张伟铮,2019,-,1,浅部真菌病,定义：浅部真菌病( Superficial mycosis)是指由致病真菌或条件致病真菌感染人体皮肤、毛发和甲等浅表组织而引起的一组疾病。临床上常见有头癣、体癣、股癣、手癣、足癣及癣菌疹等。,2019,-,2,浅部真菌病,主要致病菌种： 毛癣菌属 小孢子菌属 表皮癣菌属 念珠菌属 曲霉菌属 暗色真菌,2019,-,3,标本采集,一、标本需要量 皮屑：刮取尽量多 甲屑：尽量多 毛发：约15根 耳道：2拭子或尽量多刮取 眼角膜：2拭子，23滴眼分泌物或尽量多刮取 组织：适量,2019,-,4,标本采集,二、采集的注意事项 皮屑： 1、检查前一周，皮损部位不应使用任何抗真菌药物，取材前局部用75%酒精消毒； 2、取材选取皮损边缘处，阳性率高； 3、指趾间皮损以第4、第5指趾间阳性率最高； 4、取部分皮屑置载玻片上，滴一滴510%KOH，盖上盖玻片后直接镜检，另取部分皮屑接种于含氯霉素的沙氏斜面培养基，置28培养两周，隔天观察。,2019,-,5,标本采集,二、采集的注意事项 甲屑： 1、取材前局部用75%酒精消毒，先刮去病甲上层； 2、刮取正常甲和病甲交界处并且贴近甲床部分的甲屑，一般甲根部的甲屑阳性率高； 3、取部分甲屑置载玻片上，滴一滴1020%KOH，盖上盖玻片后直接镜检，另取部分甲屑接种于含氯霉素的沙氏斜面培养基，置28培养两周，隔天观察。,2019,-,6,标本采集,二、采集的注意事项 毛发： 1、直接检查取35根病发标本，加1020%KOH，火焰上快速通过数次，以不煮沸为度； 2、取毛发标本510根接种于含氯霉素的沙氏斜面培养基，要划破斜面稍稍掩埋，置28培养两周，隔天观察。,2019,-,7,标本采集,三、标本采集工具,2019,-,8,直接镜检,红色毛癣菌,2019,-,9,直接镜检,红色毛癣菌,2019,-,10,直接镜检,胶红酵母,2019,-,11,直接镜检,糠秕马拉色菌,2019,-,12,直接镜检,黄曲霉,2019,-,13,直接镜检,互格链格孢,2019,-,14,常见浅部真菌的鉴定,形态学特征 生长速度：2528生长一周的菌落大小 生长非常快：直径9cm 生长快： 直径3-9cm 生长速度中等：直径1-3cm 生长慢： 直径0.5-1cm 生长非常慢：直径0.5cm 质地：可见绒毛状、羊毛状、粉末状、颗粒状、蜡样等，表面可 高起或平坦，有或无皱折 颜色：红、白、黄、紫等，色素可渗透到培养基中,2019,-,15,常见浅部真菌的鉴定,形态学特征 孢子：形态和排列方式是鉴定癣菌的重要依据 小分生孢子：体积小，单细胞性，壁薄，呈圆形、梨形、棍棒型等 大分生孢子：体积大，多细胞性，分隔为数个室、壁薄或厚，光滑或粗糙，呈纺锤形、棍棒状、铅笔状等 厚壁孢子：是菌丝前端或中间的细胞质凝集，周围有厚壁包绕的一种抵抗力增强的孢子,2019,-,16,常见浅部真菌的鉴定,鉴定试验 DTM培养基 ：绝大多数皮肤癣菌在此培养基上生长37天，培养基由黄变红，大多数酵母菌和霉菌不变色 米饭培养基：用于鉴别犬小孢子菌和奥杜盎小孢子菌 米粉培养基：用于鉴别念珠菌属、丝孢酵母属和地霉属 尿素酶试验：用于鉴别红色毛癣菌和须癣毛癣菌 玉米粉吐温琼脂试验：用于鉴别红色毛癣菌和其他皮肤癣菌 毛发穿孔试验：用于鉴别红色毛癣菌和须癣毛癣菌,2019,-,17,常见浅部真菌的鉴定,一、毛癣菌属 毛癣菌属包括22个种，其中11个种与人类的体股癣、足癣、头癣和甲癣有关。有4个种仅能从动物分离，其余为人畜共患 生态学：亲人型、亲动物型、亲土型 直接镜检：一般为发内孢子、菌丝等，皮屑、甲屑内菌丝或孢子,2019,-,18,常见浅部真菌的鉴定,一、毛癣菌属 红色毛癣菌 最常见，是体股癣、手足癣和甲癣的主要病原菌 须癣毛癣菌 又称石膏样毛癣菌，第二大病原菌 许兰毛癣菌 曾经是我国主要的头癣病原菌，现已很少见 同心毛癣菌 又称叠瓦癣，主要侵犯皮肤，不侵犯毛发 疣状毛癣菌 亲动物型癣菌，一般炎症反应强烈 紫色毛癣菌 亲人型，是黑癣的主要致病菌 断发毛癣菌 亲人型，引起黑癣，头发出头皮即断，形似黑点,2019,-,19,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum）,2019,-,20,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum） 菌落特征： I 羊毛状：菌落充满斜面，为羊毛状菌丝，呈卷筒状，背面葡萄酒色 II 绒毛状：生长快，菌落约占斜面的2/3，表面有稀疏的绒毛状菌丝，边缘整齐，背面呈葡萄酒色或红色 III 粉末状：生长快，表面粉末中央凸起，菌落约占斜面的2/3，正面粉红色，背面暗红色，边缘清楚 IV 沟纹状：生长快，表面有少许菌丝及放射状沟纹，边缘清楚，背面暗红色 V 颗粒状：又称胭脂型，似紫色毛癣菌，表面胭脂色，呈颗粒状，日久有少许白色绒毛状菌落，背面暗红色，菌落质地松脆,2019,-,21,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum）,绒毛状 粉末状 沟纹状 颗粒状,2019,-,22,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum） 镜下形态： I 羊毛状、II 绒毛状、IV 沟纹状： 可见分枝分隔菌丝，小分生孢子侧生于菌丝两侧或在短分生孢子柄的末端，数目或多或少，呈梨形或棒形，间或可见少数大分生孢子，间生厚壁孢子，球拍菌丝及结节菌丝 III 粉末状、V 颗粒状： 可见较多的大分生孢子，呈棒状或笔状，薄壁光滑有3-10隔，小分生孢子梨形或棒形，侧生，无柄或短柄,2019,-,23,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum） 镜下形态：,2019,-,24,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum） 鉴定要点： 1、菌落特征及色素 2、分生孢子的形态 3、玉米粉吐温琼脂上产生红色色素 4、毛发穿孔试验阴性 5、尿素酶试验阴性,2019,-,25,常见浅部真菌的鉴定,（二）、须癣毛癣菌（Trychophyton mentagrophytes）,2019,-,26,常见浅部真菌的鉴定,（二）、须癣毛癣菌（Trychophyton mentagrophytes） 菌落特征： I 羊毛状：菌落充满斜面，为羊毛状菌丝，呈卷筒状，正面白色背面淡黄色 II 绒毛状：绒毛状菌落中央有乳头状突起，边缘整齐如刀切，正面雪白背面棕黄或棕红 III 乳皮状：部分粉末状，中央有皱折边缘不整齐，正乳白或微黄背面棕黄或棕红 IV 粉末状：充满斜面间有少量气生菌丝，正面黄或奶油色，背面棕黄或棕红 V 颗粒状：菌落高低不平堆集成颗粒状，正面黄或微黄带红色小片，背面棕红,2019,-,27,常见浅部真菌的鉴定,（二）、须癣毛癣菌（Trychophyton mentagrophytes）,绒毛状 粉末状,2019,-,28,常见浅部真菌的鉴定,（二）、须癣毛癣菌（Trychophyton mentagrophytes） 镜下形态： I 羊毛状：小分生孢子圆形或梨形，无大分生孢子及螺旋菌丝，偶见球拍菌丝及结节菌丝 II 绒毛状：可见较多的圆形或梨形小分生孢子，侧生或呈葡萄簇状排列，无大分生孢子及螺旋菌丝 III 乳皮状：可见大量螺旋菌丝，大分生孢子不多，棒形5-7隔，壁薄而光滑，小分生孢子球形，呈葡萄簇状 IV 粉末状、V 颗粒状：可见大量大分生孢子，圆形小分生孢子葡萄簇状，有螺旋菌丝，有时可见球拍菌丝,2019,-,29,常见浅部真菌的鉴定,（一）、红色毛癣菌（Trychophyton rubrum） 镜下形态：,2019,-,30,常见浅部真菌的鉴定,（二）、须癣毛癣菌（Trychophyton mentagrophytes） 鉴定要点： 1、菌落形态 2、分生孢子的形态 3、较多的螺旋菌丝 4、毛发穿孔试验阳性 5、尿素酶试验阳性,2019,-,31,2019,-,32,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属 小孢子菌属包括17个种，有5种主要从人类分离出来，7个种主要从动物中分离出来。感染皮肤和毛发，但很少感染甲 生态学：包括亲人型、亲动物型和亲土型 直接镜检：发外镶嵌状小孢子，皮屑中菌丝,2019,-,33,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属 犬小孢子菌 石膏样小孢子菌 铁锈色小孢子菌 猪小孢子菌,2019,-,34,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属 犬小孢子菌（Microsporum canis） 又称羊毛状小孢子菌，亲动物型，我国白癣的首位病原菌,2019,-,35,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属-犬小孢子菌（Microsporum canis） 培养特征: 生长快，开始较扁平，有少数白色绒毛状菌丝，两周后羊毛状菌丝充满斜面，正面橘黄色，背面为棕黄色。,2019,-,36,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属-犬小孢子菌（Microsporum canis） 镜下形态: 可见很多纺锤形的大分生孢子，壁厚有刺，顶端可有“帽样”肥大，分隔为6-12隔,2019,-,37,常见浅部真菌的鉴定,二、小孢子菌属-犬小孢子菌（Microsporum canis） 鉴定要点： 1、发外镶嵌状孢子 2、菌落形态和颜色 3、大分生孢子形态特别是末端的帽样肥大 4、在米饭培养基上生长良好，可产生大量大分生孢子 5、PDA培养基上能产生黄色色素,2019,-,38,常见浅部真菌的鉴定,三、表皮癣菌属 絮状表皮癣菌（Epidermophyton floccsum） 亲人型，侵犯人的皮肤和指甲，但不侵犯毛发,2019,-,39,常见浅部真菌的鉴定,三、表皮癣菌属 絮状表皮癣菌（Epidermophyton floccsum） 培养特征: 生长快，开始蜡状，中央高起，上覆一层黄绿色菌丝，不规则折叠，外围有放射状菌丝，背面呈枯草绿色。,2019,-,40,常见浅部真菌的鉴定,三、表皮癣菌属 絮状表皮癣菌（Epidermophyton floccsum） 镜下形态: 可见典型网球拍样的大分生孢子，24个分隔，壁薄而光滑，无小分生孢子,2019,-,41,常见浅部真菌的鉴定,三、表皮癣菌属 絮状表皮癣菌（Epidermophyton floccsum） 鉴定要点： 1、菌落特征 2、大分生