课件：微生物知识及洁净区作业及卫生.ppt

微生物知识及洁净区作业及卫生 培训,质量部 李均 2015.01,2019,-,1,目录,一、微生物知识 1、微生物概念及特点 2、微生物类群和形态结构 3、微生物的营养 4、消毒与灭菌的概念 5、消毒与灭菌的方法 6、GMP与微生物 7、微生物污染的途径 8、防止微生物污染的原则,微生物知识,2019,-,2,微生物知识,微生物(microorganism)：是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。 特点： 1）种类多、分布广 2）个体小、面积大 3）吸收多、转化快 4）适应强、易变异,细菌的形态,1、微生物概念及特点,2019,-,3,2、微生物的类群和形态结构,1.1 细菌 1.2 真菌 1.3 霉菌 1.4 酵母菌 1.5 病毒,微生物知识,2019,-,4,1.1 细菌形态构造,细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。,微生物知识,2019,-,5,充足的营养 合适的PH值 ：7.2-7.6 适宜的温度 ：嗜温菌为20-40C 必要的气体：CO2和氧气,1.1 细菌生长条件,微生物知识,2019,-,6,真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。 单细胞：呈圆形或卵圆形，称为酵母菌 多细胞：由菌丝和孢子组成，并交织成 团，称丝状菌或霉菌,2.1 真菌概念及分类,微生物知识,2019,-,7,最适的温度为2228，最适的pH值为46。 真菌对热的抵抗力不强，一般加热6070 1小时即被杀死 对干燥、日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力 对2.5碘酒、10甲醛则较敏感,2.1 真菌生长条件,微生物知识,2019,-,8,霉菌是丝状真菌的俗称 构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。 霉菌主要依靠产生形形色色的孢子进行繁殖。 对人类的不利之处则是易于造成污染、霉变和易于传播动植物的霉菌病害。 菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。,3.1 霉菌概念,微生物知识,2019,-,9,尤其喜欢在偏酸性且含糖较多的环境中生长 酵母菌是单细胞真核微生物 包括无性繁殖和有性繁殖。 菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。,4.1 酵母菌概念及特点,微生物知识,2019,-,10,病毒属非细胞型微生物 形态：杆状、球状和这两种形态结合的复合型 结构：螺旋对称型、20面体立体对称型和复合对称型。 增殖：只有在宿主的活细胞里才能进行增殖,5.1 病毒概念及特点,乙肝病毒,微生物知识,2019,-,11,多数病毒耐冷不耐热。 pH59范围内稳定，强酸或强碱条件下可被灭活。 X射线、射线和紫外线都能灭活病毒。 化学消毒剂、抗生素及中草药等。除强酸、强碱消毒剂外，酚类、氧化剂、卤素类、醇类等对病毒均有灭活作用。,5.1 病毒理化因素对病毒的影响,微生物知识,2019,-,12,水 碳源：为有机碳源（异养微生物）和无机碳源（自养微生物）两大类 氮源：主要是供给合成菌体结构的原料 无机盐类： P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等 生长因子：主要是B族维生素的化合物等,3、微生物的营养,2019,-,13,消毒（disinfection) 杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant)。 灭菌（sterilization） 杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。,4、消毒与灭菌的概念,微生物知识,2019,-,14,5.1 物理学方法： 用于消毒灭菌的物理因素有热力、辐射、过滤等。 5.2 化学方法： 影响微生物的化学组成、物理结构和生理活性。 洁净室(区)应定期消毒，使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。,5、消毒与灭菌的方法,微生物知识,2019,-,15,紫外线：作用于DNA，使细菌DNA的复制和转录受到干扰，导致细菌变异或死亡。常用于室内的空气消毒。 电离辐射 ： 对各种细菌均有致死作用。常用于大量一次性医用塑料制品的消毒和食品的消毒。 微波 ：多用于检验室用品、无菌室的用具的消毒。,5.1 物理方法辐射灭菌,微生物知识,2019,-,16,高温对细菌具有明显的致死作用，因此最常用于消毒与灭菌。 多数无芽孢的细菌经5560作用3060分钟后死亡。 干热灭菌法 湿热灭菌法 相同温度下，湿热灭菌法的灭菌效力比干热灭菌法大。,5.1 物理方法热力灭菌,微生物知识,2019,-,17,用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的。 滤菌器含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 。 适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。,5.1 物理方法滤过除菌,微生物知识,2019,-,18,5.1 化学方法消毒剂种类,微生物知识,2019,-,19,酒精能使菌体蛋白质脱水变性，常用酒精杀菌浓度为70-75%。 氯的消毒作用，即是HCLO作用，HCLO是中性分子，可以扩散至带负电的细菌表面，并穿过细胞膜进入细胞内部，由于氯原子的氧化作用，破坏某些酶系统，最终致细菌死亡。 表面活性剂作用：破坏细胞膜，使蛋白质变性。,5.1 化学方法消毒剂杀菌原理,微生物知识,2019,-,20,法规要求： 中国药典微生物限度检查法规定的检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数和控制菌检查； 药品生产质量管理规范也对药品生产的环境提出了具体的要求，包括但不限于沉降菌、浮游菌、表面微生物、尘埃粒子等。 药品内在质量要求： 微生物会使得原辅料、产品变质、使药品含量、杂质、纯度、外观等质量指标发生变化，这些指标的改变可能使药品失效，甚至在上述变化过程中还会产生有毒有害的物质而威胁人们的健康。,6、GMP与微生物,微生物知识,2019,-,21,7.1 空气 7.2 制药用水 7.3 表面 7.4 人员 7.5 物料,7、微生物污染的途径,微生物知识,2019,-,22,传播污染的第一帮凶就是空气，空气携带着敌人来污染药品。 每立方米的空气中至少含有60万颗尘粒，同时还存在着大量的微 生物，在这样的空气条件下进行生产，肯定会污染药品。 因此，要杜绝带有大量尘埃微粒和微生物的空气污染药品的办 法是对空气采取过滤的措施，把隐藏在空气中的敌人通通过滤掉 ，使空气质量达到我们的要求。这就是要建立密闭厂房和空气净 化系统的原因。对空气处理，只过滤了尘粒，但还有大量微生物 存在空气中，所以采取对空气消毒的措施来消灭微生物，例如： 臭氧消毒的方式等杀死微生物。但是常使用一种消毒剂会使微生 物产生耐药性，因此，在使用消毒剂时，必须定期交替使用。,7.1 空气,微生物知识,2019,-,23,减少空气中微生物的方法： （1）空气洁净技术采用的过滤方法 空气净化装置可用于整个房间如无菌操作室，也可只 限于操作区域局部如超净工作台。 （2）化学消毒方法：采用消毒剂作用于室内空气和物体表 面。 （3）紫外线照射方法 ：采用紫外线对室内空气进行照射。,7.1 空气,微生物知识,2019,-,24,第二个帮凶是水，从理论上来讲，微生物在纯水中是不能生长的。但是，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜或过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和盐类。正是这些可溶性的物质可被微生物利用作为它们生长的养料源泉。 水是我们药品生产不可缺少的要素之一，不只是用于生产中，还用于设施、设备清洗中。当带有大量尘埃粒子和微生物的水用于生产或清洗设施、设备时，就转移到药品上面，污染了药品。 因此，我们直接用于药品生产的水必须经过处理，以防止微生物通过水来污染产品。,7.2 制药用水,微生物知识,2019,-,25,减少制药用水中微生物的方法： （1）化学消毒剂方法 对水的消毒以化学消毒剂方法较常用，效果也最好。 常使用次氯酸钠或通氯气。 （2）膜过滤法 适用于水系统的连续循环处理 （3）紫外线照射法 在水系统中应用紫外线照射消毒，适 用于需要特殊处理的水（如光学透明度要求高），一 般在末端之前。,7.2 制药用水,微生物知识,2019,-,26,第三个帮凶是表面，包括：天花板、墙壁、地面、设 备、容器、工具或桌子； 由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油膜易受到尘粒污染。 表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受到污染。 请记住：一个表面看起来很干净，而实际上已经被千百万个微生物所污染，除非已经做了正确的消毒灭菌,7.3 表面,微生物知识,2019,-,27,第四个帮凶可能是大家都不会想到的，它就是我们自己，人 体是一个永不休止的污染媒介。当您每天来药厂上班时，您 也许随身将几百万细菌带入工厂。 人体体表皮肤与外界相通的腔道如口腔、鼻腔、肠道、眼结 膜、泌尿生殖道等均存在不同种类的微生物，其中有些微生 物可以长期寄居在人的体表、皮肤和黏膜上。,7.4 人员,微生物知识,2019,-,28,人员污染的途径和方式,人的头发和皮肤：每分钟从人类皮肤中要散发出约10,000个微生物 嘴巴和鼻子水滴：呼吸、咳嗽和喷嚏将产生出大量水滴，这种水滴既含有尘粒污染也含有微生物污染。咳嗽一次的发菌量为70700个(min人)，喷嚏一次的发菌量为400060000个(min人). 衣着：洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量为10300个/(min人)，躯体一般活动时的发菌量为1501000个(min人)，快步行走时的发菌量为9002500个(min人) 化妆品和珠宝手饰：发胶、气雾除臭剂、眼脸膏、香粉等，为微生物污染提供了极好的源泉。耳环、戒指、项链、手链等首饰，因为它们难于清洗，所以可能成为感染源或污染源。 生产过程中的人为差错：当员工没有按照SOP进行工作时，车间的污染程度增加。,微生物知识,2019,-,29,人体不同部位所带细菌数量,微生物知识,2019,-,30,人体的发尘洁净室操作人员是最主要的发尘源。,微生物知识,2019,-,31,第五个帮凶为物料，系指原料、辅料和包装材料等。 原则是尽量减少微生物数量，预防发生污染。 符合要求的物料是生产合格产品的前提，因此用于生产的物 料必须是符合质量标准的。一方面我们所使用的物料必须经 检验合格，最重要的另一方面必须保证物料在使用的过程中 不得受到污染。 切记：（1）进入洁净区的物料必须对其外包装处理。 （2）流转过程的物料必须密闭。 （3）盛装物料的容器具必须是经过无毒的。,7.5 物料,微生物知识,2019,-,32,了解污染源：对药品生产全过程可能造成污染的来源，进行深入的了解研究 进行微生物监测： 对洁净室空气中的浮游菌、沉降菌的监测； 对无菌设备清洁灭菌的验证； 对非无菌药品进行细菌和活菌数测定和病原菌的限制性检查等。,8、防止微生物污染的原则,微生物知识,2019,-,33,目录,二、洁净区作业及卫生要求培训 1、洁净区操作常识 2、药品生产洁净室（区）空气洁净度级别 3、人员进出入洁净区程序 4、物料进出洁净区程序 5、物品及工具进出洁净区程序 6、洁净区生产管理,洁净区作业及卫生,2019,-,34,人员要求 -对新职工进行全面的健康检查 -建立生产人员健康档案 -培养药品生产人员良好的个人卫生习惯 -进入洁净区不得化妆，佩戴饰物。 -不得将工作服穿离工作区。 -应养成良好的卫生习惯，勤洗澡、修指甲、刮脸，进入 洁净区不得佩带戒指等首饰和手表、不得化妆。患有皮 肤病、传染病和呼吸道疾病的人员不宜上岗。 -洁净区各室之间、洁净区与非洁净区之间严禁串岗。 -洁净区应限制进入该区域人员的数量 。,1、洁净区操作常识,洁净区作业及卫生,2019,-,35,生产环境卫生要求,1、洁净区操作常识,洁净区作业及卫生,2019,-,36,2、药品生产洁净室（区）空气洁净度级别,洁净区作业及卫生,2019,-,37,（1）进入洁净区一更室后，脱下一般区工作鞋，放入更鞋柜 外侧 。 （2）转身从更鞋柜内侧取出洁净工作鞋换上 。 （3）脱下一般生产区工作服，装入袋中。 （4）按口罩工作服上衣工作裤的顺序穿好 （5）整理工作服 （6）手消毒,3、人员进出入洁净区程序,洁净区作业及卫生,2019,-,38,将物料送入缓冲间，关闭缓冲间门，脱去外包或进行清洁（去尘、擦净）处理，开启紫外灯照射30分钟并填写紫外灯使用记录或在缓冲间用75%乙醇对物料表面进行擦拭消毒。 洁净区接料人从缓冲间取出物料，关缓冲间门，将物料运至暂存间或指定地点。 物料出洁净区时，将物料送入缓冲间，关缓冲间门。 取料人从缓冲间取出物料，关缓冲间门，即可将物料运至指定地点。,4、物料进出洁净区程序,洁净区作业及卫生,2019,-,39,进入的工具、仪器、零部件、设备等均应进行擦洗、除尘或除去外包装、消毒等必要的净化处理，并按规定程序进行清洁、消毒后方可放入。 尽量减少使用不易清洁的凹陷或凸出的壁架和设备。 清洁工具应干燥，防止生霉现象。清洁剂、消毒剂应替换使用，防止微生物产生耐药性。 设有密闭的废弃物放置点，放置点周围干净、无污渍、无洒漏。并按规定在工作后将其及时清除出洁净区。 不设告示板、记事板，不得在墙壁粘贴无关布告、指示。 工具、器具和容器不得随便送出洁净区外，所有再次进入的物品必须经过重新清洁、消毒，不允许物品随便进出。 记录用的纸、笔需经洁净、消毒程序后方可带入。 所有原辅料、药用包材必须除去外包装，同时清洁内包装表面，进行消毒。,5、物品及工具进出洁净区程序,洁净区作业及卫生,2019,-