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文档简介
实验三 乳胶凝集试验 Latex Agglutination Test,LAT,一、目的和要求,1掌握乳胶凝集试验的操作技术 2学会结果观察和判定,二、实验原理,1、凝集试验 细菌、红细胞等颗粒性抗原或吸附在其他物体(乳胶、白陶土、离子交换树脂和红细胞等)的抗原,与相应的抗体结合,在有适当电解质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块,称为凝集试验。 参与凝集反应的抗原为凝集原,抗体为凝集素。由于凝集反应的抗原为颗粒状,在单位体积内含量少,而抗体分子小,单位体积内含量多,易出现前带现象,所以通常固定抗原,稀释抗体。,2、间接凝集试验: 将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无关的、一定大小的不溶性颗粒(统称为载体颗粒)的表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的适宜条件下,所出现的特异性凝集反应称为间接凝集反应。 常用的载体:红细胞(“O”型人红细胞、绵羊红细胞)、聚苯乙烯乳胶颗粒、白陶土、离子交换树脂、火棉胶等。,3、乳胶凝集试验:乳胶是聚苯乙烯聚合的高分子乳状液,对蛋白质、核酸等高分子物质具有良好吸附性能,可用作载体吸附某些抗原(抗体)来测定相应的抗体(或抗原)。 优点:本法具有快速简便、保存方便、比较准确等优点。,三、实验步骤,1、将抗原用稀释液(经过处理的2%的空白乳胶)按1:30-1:300的比例稀释混匀。置37,1小时。 2、将血清(标准阳性、标准阴性和待检)按1:2-1:10倍稀释。 3、将上述稀释好的抗原抗体混匀,轻请旋转,室温静置反应数分钟。观察结果。,四、结果判定,:no agglutination, latex beads retain their original form; +: mild agglutination in 2 to 3 min, fine clumping when observed carefully +: moderate agglutination in 1 to 2 min, visible small and homogeneous clumps +:heavy agglutination within 30 s to 1 min, big clumps +: v
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