《发酵培养基》PPT课件.ppt

2019/4/18,1,第三章 发酵培养基,2019/4/18,2,：广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长 繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。,发酵培养基的作用：,满足菌体的生长 促进产物的形成,培养基,2019/4/18,3,发酵培养基的要求, 培养基能够满足产物最经济的合成。 发酵后所形成的副产物尽可能的少。 培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应。 所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。,2019/4/18,4,第一节 培养基的类型及功能,一、按纯度,合成培养基,天然培养基,2019/4/18,5,二、按状态,半固体培养基,液体培养基,固体培养基,2019/4/18,6,生理代谢 菌种筛选,种子培养,发酵培养,2019/4/18,7,三、按用途（从发酵生产应用考虑）,孢子（斜面）培养基,种子培养基,发酵培养基,2019/4/18,8,1种子培养基(包括摇瓶种子和小罐种子培养基),培养种子的目的： 1.扩大培养，增加细胞数量； 同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细胞。为了使细胞迅速进行分裂或菌丝快速生长。,2019/4/18,9,1. 必须有较完全和丰富的营养物质，特别需要充足的氮源和生长因子。 2. 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基，可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 3. 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。,种子培养基特点,2019/4/18,10,2发酵培养基,发酵培养基是发酵生产中最主要的培养基，它不仅耗用大量的原材料，而且也是决定发酵生产成功与否的重要因素。,2019/4/18,11,（1）根据产物合成的特点来设计培养基,对菌体生长与产物相偶联的发酵类型，充分满足细胞生长繁殖的培养基就能获得最大的产物。 对于生产氨基酸等含氮的化合物时，它的发酵培养基除供给充足的碳源物质外，还应该添加足够的铵盐或尿素等氮素化合物。,2019/4/18,12,（2）发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可能高些，这样在同等或相近的转化率条件下有利于提高单位容积发酵罐的利用率，增加经济效益。 （3）发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料来源、原材料的质量以及价格等必须予以重视。,2019/4/18,13,第二节 发酵培养基的成分及来源,一、碳源,1、作用,提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分,提供合成目的产物所必须的碳成分,2、来源,糖类、油脂、有机酸、正烷烃,2019/4/18,14,3、工业上常用的糖类, 葡萄糖,所有的微生物都能利用葡萄糖 但是会引起葡萄糖效应又称葡萄糖阻遏或分解代谢产生阻遏作用。葡萄糖或某些容易利用的碳源，其分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。如大肠埃希氏菌培养在含葡萄糖和乳糖的培养基上，在葡萄糖没有被利用完之前，乳糖操纵子就一直被阻遏，乳糖不能被利用，这是因为葡萄糖的分解物引起细胞内cAMP含量降低，启动子释放cAMP-CAP蛋白，RNA聚合酶不能与乳糖的启动基因结合，以至转录不能发生，直到葡萄糖被利用完后，乳糖操纵子才进行转录，形成利用乳糖的酶，这种现象称葡萄糖效应。,工业上常用淀粉水解糖,但是糖液必须达到一定的质量指标,2019/4/18,15,不同的制糖工艺生产的糖液质量差别很大,2019/4/18,16, 糖蜜,糖蜜是制糖生产时的结晶母液，它是制糖工业的副产物。,糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%75%。一般糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。,2019/4/18,17,不用加工方法对甘蔗糖蜜的影响,2019/4/18,18,糖蜜使用的注意点,除糖份外，含有较多的杂质，其中有些是有用的，但是许多都会对发酵产生不利的影响，需要进行预处理。,例：谷氨酸发酵,有害物资：胶体成分（起泡、结晶）、钙盐（结晶） 生物素（发酵控制）,预处理：澄清脱钙脱除生物素,例：柠檬酸发酵,有害物质：铁离子含量高（导致异柠檬酸的生成）,预处理：黄血盐,2019/4/18,19,糖蜜前处理的方法,1.加酸通风沉淀法 2.加热加酸沉淀法 3.添加絮凝剂澄清处理法,2019/4/18,20,1.加酸通风沉淀法,将糖蜜加水稀释至50Bx左右，加入0.2%0.3%浓硫酸，通入压缩空气1h，静止澄清8h，取出上清液作为制备糖蜜用。 通风一方面可赶走SO2或NO2等有害气体以及挥发性酸和其他挥发物质，另一方面可增加糖液中的含氧量，提高糖液的溶氧系数，以利微生物的生长和繁殖。,-冷酸通风处理法,2019/4/18,21,2.加热加酸沉淀法,在较高的温度和酸度下，对糖蜜中有害微生物的灭菌作用和胶体物质、灰分杂质的澄清沉淀作用均较强。 采用热酸处理法，通常把酸化、灭菌和澄清同时混合一道进行，工艺上稀释原糖蜜时采用阶段稀释法，第一阶段现用60温水将糖蜜稀释至5558Bx，同时添加浓硫酸调整酸度560，进行酸化，然后静止56h；第二阶段则将已酸化的糖液再稀释到培养所需的浓度。,-热酸处理法,2019/4/18,22,3.添加絮凝剂澄清处理法,添加聚丙烯酰胺(PAM)絮凝剂来作稀糖液的澄清处理，可大大缩短澄清时间。 聚丙烯酰胺是由4万个丙酰胺单位CH2=CH-CONH2组成的，它的化学结构式为,2019/4/18,23,聚丙烯酰胺(PAM),可以作为絮凝剂絮凝剂主要是带有正电（负)性的基团中和一些水中带有负(正）电性难于分离的一些粒子或者叫颗粒，降低其电势，使其处于不稳定状态，并利用其聚合性质使得这些颗粒，集中，并通过物理或者化学方法分离出来。 加速糖蜜中胶体物质、灰分和悬浮物的絮凝，从而使澄清糖液的纯度提高。添加絮凝剂的澄清工艺如下： 先将糖蜜加水稀释至3040Bx，加一定硫酸调PH值33.8，加热至90，添加8ppmPAM，搅拌均匀，澄清静止1h，取清液即可制备稀糖液用。,无色无臭的粘性液体,2019/4/18,24,国内大多数糖蜜酒精工厂只考虑对用作酒母的稀糖液进行澄清处理，而对基本糖液则不经澄清处理，这样可大大简化生产，提高效率，酒精发酵生产也不会受影响。,2019/4/18,25,谷氨酸发酵的糖蜜预处理,自以淀粉水解糖发酵生产谷氨酸研究成功并投入生产后,以廉价糖蜜代替淀粉水解糖制造谷氨酸,2019/4/18,26,一般谷氨酸发酵培养基以含生物素1-5g/L为适宜,糖蜜中的生物素含量为0.0410g/g 一般甘蔗糖蜜的生物素含量为110g/g 甜菜糖蜜的生物素含量为0.040.06g/g,如配成含糖10%的培养基，每升培养基的生物素含量将达82000g，显然不适于谷氨酸的发酵。解决这个问题的主要方法包括糖蜜预处理法、添加化学药剂法、追加糖蜜法及油酸缺陷型突变株等四种方法。,2019/4/18,27,1.糖蜜预处理法,此方法是发酵前将糖蜜先经过处理以除去其中过量的生物素,活性碳,树脂,亚硝酸,处理方法,2019/4/18,28,(1)活性碳处理法,单用活性碳处理时，用碳量为糖蜜的30%40% 如果先用漂白粉处理，再经活性碳处理，用碳量为糖蜜的10%20%。具体方法是先将糖蜜适当稀释后，用漂白粉处理(或通入氯气)后用碱调PH3.0，加入活性碳，60加热1h，进行过滤，即得精致糖蜜。,2019/4/18,29,(2)树脂处理法,甜菜糖蜜可用非离子型的脱色树脂处理，以吸附生物素。 先将糖蜜稀释到一定的浓度，后加酸调PH值至2.5，在120灭菌20min，用NaOH调PH4.0，将此糖液通过脱色树脂柱(树脂容积与糖液之比为1：0.67)，流出的糖液调至PH7.0后，用于制备发酵培养基。,2019/4/18,30,(3)亚硝酸处理法,先将糖蜜稀释至含糖10%30%，再加入亚硝酸盐和矿酸，亚硝酸盐的用量依糖蜜中的氨基态氮，氨态氮和生物素浓度而定，矿酸的用量以能使亚硝酸从亚硝酸盐游离而出为准，但以稍过量为好。生物素失活。,用亚硝酸处理糖蜜以破坏生物素,2019/4/18,31,2.添加化学药剂法,生物素对谷氨酸发酵的影响：,影响菌体细胞对谷氨酸的渗透性,生物素丰富时，菌体的细胞膜形成完整， 使谷氨酸不能渗透出菌体外,2019/4/18,32,采用其他的化学药剂,可以改变细胞膜的结构，增加细胞膜对谷氨酸的渗透性，而不必控制生物素的含量，可以添加青霉素或表面活性剂。,2019/4/18,33,(1)添加青霉素法,在培养初期加入少量青霉素，在培养基中生物素丰富条件下，能大大提高谷氨酸含量。,例如,使用谷氨酸小球菌NO.560进行转化糖蜜的发酵，1L发酵液中加入无菌青霉素G钾盐400单位，经过48h发酵，产酸达4%，不加青霉素的对照发酵，产酸量仅达0.4%。,2019/4/18,34,(2)添加表面活性剂法,表面活性剂(surfactant)是指具有固定的亲水亲油基团，在溶液的表面能定向排列，并能使表面张力显著下降的物质。 近年来添加表面活性剂于糖蜜原料发酵生产谷氨酸的研究进展很大，并用流加浓糖液法，可使发酵产酸达8%-9%。,2019/4/18,35,(3)添加抗氧剂法,使用乳糖发酵短杆菌No.2256进行甘蔗糖蜜发酵时，培养5h后，添加0.05mg/mL的硫二甘胆酸(Thiodiglycocholic acid)，发酵2030h，谷氨酸对糖产率为51.2%，而对照仅为45.0%。,利用抗氧剂可以保持谷氨酸的生产能力,例如,2019/4/18,36,3.追加糖蜜法,上述糖蜜预处理法和添加化学药剂法虽然可以提高谷氨酸生成量，但是在工艺上和经济核算上当然以不预先处理、也不添加药剂最为理想。,2019/4/18,37,1965年发现谷氨酸产生菌细胞生长达到最大值，谷氨酸生成酶系统完全形成时，纵然添加过量生物素也无碍于发酵。 因此，可以采用先以葡萄糖或经处理的糖蜜的培养基培养，当菌体生长达到最大值，再加生物素含量多的糖蜜进行发酵，就可以提高谷氨酸的生成量。,2019/4/18,38,4.采用营养缺陷型变异株法,目前所用的糖质原料发酵的谷氨酸产生菌以生物素缺陷型为主，必须在生物素限量的条件下才能积累谷氨酸。根据生物素对谷氨酸发酵的影响的原因，采用人工诱变方法使生物素缺陷型菌株转变为油酸缺陷型或其他营养缺陷型如组氨酸缺陷型、精氨酸缺陷型等，可以在生物素过量的培养基中发酵形成大量谷氨酸。,2019/4/18,39,例如将硫植短杆菌No.653和它的油酸缺陷型变异株D-248分别用一下培养基培养(表2-13)，结果No.653短杆菌仅生成5mg/mL谷氨酸，而D-248菌却生成63mg/mL谷氨酸。,2019/4/18,40,2019/4/18,41, 淀粉、糊精,使用条件：微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类,缺点：难利用、 发酵液比较稠、一般2.0%时加入一定的-淀粉酶 成分比较复杂，有直链淀粉和支链淀粉等等。,优点：来源广泛、价格底 难利用，可以解除葡萄糖效应,2019/4/18,42,石油代粮发酵的原料,石油代粮发酵的特点 石油代粮发酵原料的选择,2019/4/18,43,一、石油代粮发酵的特点,微生物工业是用粮最多的产业部门，每生产1t酒精，耗粮3t左右，每1t有机酸，耗粮38t，抗生素、酶制剂等用粮尤大，全世界微生物工业消耗的粮食原料数是十分惊人的。 随着微生物工业的日益发展，面临着原料供应不足，迫切需要开辟新原料途径，如利用石油等。石油在目前是地球上蕴藏十分丰富的资源，因此石油代粮发酵有着重大的意义。,2019/4/18,44,能利用石油的微生物种类很多，分布很广，石油微生物几乎能利用所有的石油成分，或将其同化形成菌体或某些产物。 石油微生物的作用的最大特点是能使化学上很稳定的正烷烃、环烷烃、芳香烃等化合物在常压下发生化学变化，所以石油发酵不需高温、高压、耐酸、耐腐蚀的设备。,2019/4/18,45,石油代粮发酵近年来已取得重大的进展，国外石油蛋白已完成了试产和毒性试验，业已正式投产。英国用石蜡为原料，美国用气烃、法国用柴油为原料，日本、苏联亦完成了研究，石油蛋白的收率为50%80%。从研究微生物发酵石油发现，几乎糖发酵的所有产物，都可由微生物发酵石油馏分来得到(如表2-14所示),2019/4/18,46,2019/4/18,47,石油发酵与糖发酵不同，作为基质的烃类是不溶于水的，为了使菌体生长能力提高，有必要使发酵液成为极细的乳状液，发酵罐的结构要考虑有利于乳化，添加表面活性剂促进乳化是一种有效途径。 用烃类作为基质需要的氧气量为碳水化合物做基质的几倍，以烃类作为基质繁殖时间长，生长速度也较慢，发酵时耗氧量多。,2019/4/18,48,用烃类做原料发酵时产生的热量比碳水化合物发酵时产生的热量要大得多。(碳水化合物的燃烧热：1.56103KJ/kg，烃类：4.78104KJ/kg)。应当选育适应高温的育种，这样可以部分地解决发酵热的问题。 利用细菌进行石油发酵产品分离是较困难的，正由于考虑到烃类发酵需氧量多和烃在水中的溶解度有限，因此，需要设计适应于石油发酵的设备，石油发酵的生化工程，还需要相应跟上。,2019/4/18,49,石油代粮发酵除了以上的特点外，作为石油代粮发酵的产物首先要求保证安全而且无毒性。,2019/4/18,50,二、石油代粮发酵原料的选择,石油代粮发酵所用原料，并非指原油，而是它的馏分，以正链烷、轻油、灯油用的较多。因微生物同化烃类时，链烃比环烃易同化，直链烃比支链烃易同化，在饱和直链烃中以C1318最易同化，因此，C9以上的石蜡使用最普遍。此外，石油化工产品如甲醇、乙醇、醋酸、乙二醇、丙二醇，甚至反丁烯二酸、安息香酸萘等都可作为发酵原料。由于醋酸容易从石油裂解的乙烯来合成，且发酵工艺、设备条件几乎与糖质发酵无异，因此，首先用在谷氨酸、赖氨酸的发酵生产上。,2019/4/18,51,一般认为微生物氧化正烷烃的途径，是经过单末端氧化与双末端氧化生成脂肪酸，然后用-氧化开裂成醋酸，再以乙酰辅酶A的形式投入三羧酸循环而积累有关的有机酸类。对烃类代谢途径与控制的进一步了解，将更有效地提高石油发酵的收率。,2019/4/18,52,作为原料选择的方面来看，究竟采用石油为原料，还是用石油制品为原料，不能即下定论，应因地制宜来选择，但在石油化工发展的基础上，鉴于目前的发酵设备及技术条件，似乎使用醋酸、乙醇等原料将会是一种有效的代粮资源。与其他碳源相比，不仅具有水溶性好，本身没有毒性，而且具有较高的发酵率和转化率，控制方便等优点。,2019/4/18,53,二、氮源,氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。,1、无机氮源,种类：氨盐、硝酸盐和氨水,特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化如： (NH4)2SO4 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 NH3 + 2H2O + NaOH,2019/4/18,54,无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺 若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝酸钠。,正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程的pH有积极作用。,2019/4/18,55,所以选择合适的无机氮源有两层意义：,满足菌体生长,稳定和调节发酵过程中的pH,2019/4/18,56,2、有机氮源,来源：工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒 糟。,除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机盐及生长因子。,例 玉米浆： 可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸 较多的乳酸 硫、磷、微量元素等,成分复杂：,2019/4/18,57,有机氮源成分复杂可以从多个方面对发酵过程进行影响，而另一方面有机氮源的来源具有不稳定性。所以在有机氮源选取时和使用过程中，必须考虑原料的波动对发酵的影响,2019/4/18,58,氮源使用的一些相关问题：,有机氮源和无机氮源应当混合使用,早期：容易利用易同化的氮源无机氮源 中期：菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质,有些产物会受氮源的诱导和阻遏,例： 蛋白酶的生产,有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力,开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣 的课题,2019/4/18,59,2019/4/18,60,三、无机盐的微量元素,1、作用：各种不一样,2、来源：C、N源，以盐的形式补充,3、用量：根据具体的产品，以实验决定,4、使用注意点,A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和微量元素在发酵过程中必须加以考虑,2019/4/18,61,例：铁离子 青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20g/ml 发酵罐必须进行表面处理,B、使用时注意盐的形式（pH的变化）,例：黑曲酶NRRL-330,生产-淀粉酶，PH对酶活的影响 pH 酶活 不加 4.25 120分钟 加 K2HPO4 5.45 30分钟 加 KH2PO4 4.62 75分钟,2019/4/18,62,四、生长因子、前体和产物促进剂,从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。,1、生长因子,如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型，以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重要的作用 。,例如,有机氮源是这些生长因子的重要来源，多数有机氮源含有较多的B簇维生素和微量元素及一些微生物生长不可缺少的生长因子,2019/4/18,63,前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。,2、前体,青霉素：分子量356,苯乙酸:分子量136,2019/4/18,64,有些氨基酸、核苷酸和抗生素发酵必须添加前体物质才能获得较高的产率。,例如丝氨酸、色氨酸、异亮氨酸及苏氨酸发酵时，培养基中须分别添加各种氨基酸的前体物质如甘氨酸、氨茴酸、吲哚、2-羟基-4-甲基-硫代丁酸，-氨基丁酸及高丝氨酸等(如表2-15所示)，这样可避免氨基酸合成途径的反馈抑制作用，从而获得较高的产率。,2019/4/18,65,2019/4/18,66,青霉素发酵,不但可使青霉素G的比例大为增加(占总青霉素量的99%以上)，且使青霉素的产量也有所提高(由于前体物的存在，可使培养基的硫酸盐中的硫原子更多地结合到青霉素分子中去)。在抗生素发酵中常用的前体物质如表2-16所示。,加入苯乙酸或苯乙硫胺,2019/4/18,67,2019/4/18,68,前体物质的利用往往与菌种的特性和菌龄有关,如两种青霉素产生菌对苯乙酸的利用率不同，形成青霉素G的比例也不同， 菌龄较老的菌丝对苯乙酰胺的脱氨作用较菌龄轻的菌丝为大；青霉素对各种前体物质的利用速率不同，前体物质愈易被氧化的，用于构成青霉素分子的比例就越少。,2019/4/18,69,一般说来,前体物质加入量越多，抗生素产生量就越高(见表2-17)。,前体物质是合成过程中的限制因素,但前体物质的浓度越大，利用率越低。在抗生素发酵中大多数的前体物质对生产菌体有毒，故一次加入量不宜过大。为了避免前体物质浓度过大，一般可采用间歇分批添加或连续滴加的方法加入。,2019/4/18,70,2019/4/18,71,前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07% 前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化， 流加也有利于提高前提的转化率,用法：,2019/4/18,72,3、产物促进剂 所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。,2019/4/18,73,原因： 有些促进剂本身是酶的诱导物； 有些促进剂是表面活性剂，可改善细胞的透性，改善 细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产， 也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用； 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。,促进剂提高产量的机制还不完全清楚,2019/4/18,74,有的可能起生长因素的作用如加入微量“九二”或其他植物刺激剂可促进某些放线菌的发育，缩短发酵周期或提高抗生素发酵单位； 有的可推迟菌体的自溶如巴比妥药物能增加链霉素产生菌的菌丝抗自溶能力(巴比妥主要对链霉素生成合成酶系统具有刺激作用)； 有的是抑制了某些合成其他产物的途径而使之向所需产物的途径转化(见表2-18)。,抗生素工业在发酵过程中加入某些促进剂或抑制剂，常可促进抗生素的生物合成,不同的促进剂所引起的作用也各不相同,2019/4/18,75,2019/4/18,76,现在已采用发酵时定时添加红霉素而解决,氨基酸发酵易于发生的问题,谷氨酸发酵时噬菌体引起的异常发酵,赖氨酸发酵等营养缺陷型菌株易发生回复突变,由于噬菌体有宿主专性，现在的措施是交替更换菌种或选用抗噬菌体菌株，但噬菌体也可以发生宿主范围突变，因此也有采用添加氯霉素、多聚磷酸盐、植酸等防止,2019/4/18,77,在发酵过程中添加促进剂的用量极微，选择得好，效果较显著，但一般来说，促进剂的专一性较强，往往不能相互套用。,2019/4/18,78,五、水,对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的，因为在不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。,水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。,对于酿造行业，水的重要性不言而喻,对于常规发酵，可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的水。,2019/4/18,79,六、培养基确定方法,（1）首先必须做好调查研究工作，了解菌种的来源、生活习惯、生理生化特性和一般的营养要求。 工业生产主要应用细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物。它们对营养的要求既有共性，也有各自的特性，应根据不同类型微生物的生理特性考虑培养基的组成。,2019/4/18,80,2019/4/18,81,（2）其次，对生产菌种的培养条件，生物合成的代谢途径，代谢产物的化学性质、分子结构、一般提炼方法和产品质量要求等也需要有所了解，以便在选择培养基时做到心中有数。,2019/4/18,82,（