《理学抗体终》PPT课件.ppt

抗体,抗体（antibody，Ab）能与相应抗原特异性结合, 并具有多种免疫学和生物学活性的蛋白质，也称为免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）。包括膜型Ig和分泌型Ig。,抗体分子的基本结构 及其多样性,Basic Structure and Diversity of Antibody Molecules,抗体分子的基本结构：四肽链结构,由两条相同的轻链（Light Chain）和两条相同的重链（Heavy chain）通过链间二硫键连结形成。,NH2（N端）,COOH （C端）,7-1,L,H,轻链和重链,轻链（L链） 链 链,重链（H链）:根据其抗原性的差异，人类Ig的H链分为,重链决定Ig类及亚类,链 链 链 链 链,IgG IgA IgM IgD IgE,正常人：2 ：1,轻链决定型别 型 型,可变区和恒定区 （Variable region and Constant region）,V区：VL、VH,可变区（V区）：氨基酸种类、排列顺序差异较大，构成抗体的多样性。,恒定区（C区） 氨基酸种类、排列顺序恒定,C区：CL、CH,“三明治样”立体结构,抗体分子的立体结构,决定簇互补区 （complementarity-determinant region, CDR ）,抗体与抗原决定簇结合的位置，又称为决定簇互补区（CDR），也是抗体分子的独特型决定簇(Idiotypes of antibody molecules,Id) 的主要存在部位。,抗原决定簇(antigenic determinant),又称表位 (epitope) 抗原分子表面能与其抗体结合的部位称为抗原决定簇 ，是免疫应答特异性的物质基础。,铰链区（hinge region）,位于CH1和CH2之间，富含脯氨酸，易发生伸展和一定程度的移动，便于抗体更好地与抗原结合;而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。,铰链区,免疫球蛋白的辅助结构,J链（joining chain） 参与 IgA (H2L2)2与 IgM (H2L2)5连接,分泌片（secretory piece, SP） 粘膜上皮细胞分泌 保护 sIgA不被蛋白酶降解 介导IgA的转运,单体、二聚体、五聚体,IgG CH3区：可与单核-M细胞、B细胞、NK细胞、中性粒细胞上的IgG-Fc受体结合调理吞噬、ADCC。,IgG CH2区：补体结合点和通过胎盘的部位。,免疫球蛋白的水解片段,木瓜蛋白酶水解,裂解部位：铰链区二硫键N端侧,裂解片段：2Fab+Fc,Fab （fragment antigen binding） 可与抗原结合的片断 抗原结合价 = 1 特异性由 VH 和 VL决定 不能形成凝集或沉淀反应,Fc段（ fragment crystallizable） 可结晶片段 多种生物 学功能,裂解部位：铰链区二硫键C端侧,裂解片段 F(ab)2+pFc ,胃蛋白酶水解,F(ab )2 ：具双价抗体活性 能形成凝集或沉淀反应 生物制品应用,pFc ：无生物学活性的小碎片。,免疫球蛋白的功能区(结构域）,Ig分子通过链内二硫键折叠或若干个能行使特定功能的球形单位，每个球形单位为一个功能区。,L链：VL区、CL区 H链：VH区、CH1区 CH2区 CH3区 CH4区(IgM、IgE ),V区,C区,VL+VH功能区： 抗原结合部位（2个）,CH3功能区：是Ig与其Fc受体结合的部位(固定细胞）,CL和CH 区：具有同种异型抗体的遗传标记。（2个）,CH2区：IgG的补体结合点和通过胎盘的部位,功能区的作用,免疫球蛋白的功能,一、特异性结合抗原:中和外毒素、病毒，阻止细菌粘附于宿主细胞。 二、激活补体 ，发挥溶细胞活性 三、亲细胞性（固定细胞） IgG Fc受体（FcR）：存在于单核-吞噬细胞、中性粒细胞、NK细胞、嗜酸性粒细胞、B细胞上。与调理吞噬、ADCC（抗体依赖细胞介导的细胞毒作用）有关。 IgE Fc受体（FcR）：存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞膜上。与I型超敏反应有关。 四、通过胎盘和粘膜： IgG 是唯一能穿过胎盘的免疫球蛋白， sIgA能穿过粘膜。 五、免疫调节功能,IgG,血清中含量最高、半衰期最长的抗体 唯一能通过胎盘的Ig，对新生儿抗感染起重要作用 再次应答的主要抗体 体内最重要的保护性抗体 具有多种功能：结合、凝集抗原中和细菌毒素、中和病毒激活补体调理吞噬能与SPA结合,免疫球蛋白类别及亚类的特性与功能 Properties of Antibody Classes and Subclasses,四种亚类的IgG分子在血清中的浓度不同,分子量最大的 Ig（五聚体） 在个体发育过程中最早出现的抗体（胚胎发育晚期即可出现） 初次应答的主要抗体 近期感染的指标 激活补体、裂解细菌、调理吞噬等作用均比IgG更有效 不能通过血管进入组织。 血清IgM是五聚体结构，膜型IgM（serfase IgM，sIgM）是单体结构。 sIgM 是 BCR。,IgM,分泌型IgA：由两个IgA单体与J 链和分泌片结合而成二聚体结构；是人体外分泌液中的主要抗体； 由黏膜相关淋巴组织（MALT）产生，对防御病原微生物入侵起重要作用，又称为局部防御性抗体。 在局部抗感染中发挥重要作用。,IgA,有两型：血清IgA（单体）和分泌型IgA（二聚体）。,IgD,1、血清IgD含量低。 2、膜型IgD存在于成熟B细胞 表面，为BCR，是B细胞成 熟的标志。,IgE,血清含量最低 IgE没有铰链区，有4个CH结构域（CH14） CH2、CH3能够与肥 大细胞和嗜碱性粒细胞表面的IgE- Fc受体结合，介导型超敏反应。与抗寄生虫感染有关。 不能固定补体,1（HBsAg-乙肝病毒 表面抗原）为已经感染病毒的标志， 并不反映病毒有无复制、传染性强弱； 2（HBsAb-乙肝病毒 表面抗体）为中和性抗体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标志。疫苗接种者，若仅此项阳性，应视为乙肝疫苗接种后正常现象。 3（HBeAg-乙肝病毒 e抗原）为病毒复制标志。持续阳性3个月以上则有慢性化倾向。 4（HBeAb-乙肝病毒e抗体）为病毒复制停止标志。病毒复制减少，传染性较弱，但并非完全没有传染性； 5（HBcAb-乙肝病毒核心抗体）为曾经感染过或正在感染者都会出现的标志。 1、3、5为阳性，其他为阴性代表乙肝“大三阳” 1、4、5为阳性，其他为阴代表乙肝“小三阳”,第六节 单克隆抗体和基因工程抗体 一、多克隆抗体（polyclonal antibody） 1.定义 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）。 2.实际意义 （1）预防、治疗感染性疾病 （2）临床诊断,基因工程抗体(genetic engineering antibody) 1.定义 在DNA水平对Ig基因进行切割、拼接或修 饰，导入受体细胞表达的抗体。 2.举例 人-鼠嵌合抗体(chimeric antibody) 改型抗