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文档简介
实验三 细菌分离培养与培养性状观察,一、目的要求,从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法成为分离;,纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由 一个细菌分裂、繁殖而产生的后代;,分离培养的目的在于从被检材料中、或者从污染的众 多杂菌中分离出纯的病原菌。,一、目的要求,被检材料或病料,分离,单个菌落,纯培养物,纯培养,移植培养,。,一、目的要求,1、掌握细菌(需氧菌、厌氧菌)分离培养的基本要领 2、掌握钓菌、纯培养及移植技术 3、了解细菌在固体、液体培养基中的生长表现 4、了解培养性状对细菌鉴别的重要意义,接种工具,接种针和接种环:由三部分组组成,即环(针)、金属柄和绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种针用于穿刺接种细菌,接种环用于固体、液体培养基的细菌接种。,接种环境,VS-1300-U型洁净工作台,接种的基本程序,灭菌接种环,沾取标本,接种,灭菌接种环,杀灭接种环沾染的细菌,以免污染标本,杀灭接种环沾染的细菌,以免污染环境,一、目的要求,(一)常用的细菌培养方法,1、需氧菌分离培养法,(1)平板划线分离法,目的:使混合的细菌呈单个分散生长,形成单个菌落,以便获得 纯菌。,一、目的要求,一、常用的细菌培养方法,1、需氧菌分离培养法,(1) 平板划线分离法,方法:,分区划线法:适用于含菌量较多的标本。,连续划线法:适用于含菌量较少的标本。,一、目的要求,1、常用的细菌培养方法,(1)需氧菌分离培养法,1. 平板划线分离法,方法:,分区划线法:适用于含菌量较多的标本。,分区划线法,第一区划线,灭菌接种环,第二区划线,灭菌接种环,第三区划线,灭菌接种环,连续划线法,一、目的要求,(一)常用的细菌培养方法,2、厌氧菌分离培养法,(1)肝片肉汤培养法 (2)焦性没食子酸法,一、目的要求,(一)常用的细菌培养方法,3、兼性厌氧菌分离培养法,2019/4/20,15,可编辑,一、目的要求,(二)钓菌、纯培养及细菌移植技术,细菌移植,斜面培养基接种法:用于培养,保存菌种及其它实验用。,液体培养基接种法:用于增菌及鉴定细菌生长特点,如表面生长,沉淀生长,均匀混浊生长等。,二、材料,1. 器材:接种环、酒精灯、打火机。 2. 培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培养液,试管斜面培养基。 3. 菌种:未知混合菌种。,一、目的要求,(三)细菌在培养基上的生长表现,1、细菌在固体培养基中的生长现象,菌落 定义:指单个细菌在平板培养基上生长繁殖,形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征:大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 菌苔:指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。,菌落与菌苔,菌落,菌苔,一、目的要求,(三)细菌在培养基上的生长表现,2、细菌在液体培养基中的生长现象,混浊 沉淀:多见于链状排列的细菌。 菌膜:多见于厌氧菌。,菌膜,菌沉淀,均匀浑浊,对照,一、目的要求,(三)细菌在培养基上的生长表现,3、细菌在半固体培养基中的生长现象,有鞭毛细菌: 在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌: 只沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。,有动力 现象,无动力 现象,思 考?,1、细菌分离培养的目的是什么
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