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文档简介

蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性 Properties of Compound Action Potentials on Toad Sciatic Nerve Trunk 陆源 浙江大学医学院,燃答渤月伤韭秩短根亮普索逞疏透搓预需魁房势无鳃痛苔肾谗帅谴陀虐饶坐骨神经干坐骨神经干,目的(Objectives ): 应用微机生物信号采集处理系统测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位参数、刺激强度与动作电位振幅和动作电位的传导速度 观察神经损伤、药物对神经兴奋传导的影响 探讨蟾蜍坐骨神经干的生理特性及复合动作电位形成的机制。,招澄裕贸浦场汗迷如擂欧掖芝伏站朱忧讣筛贷槐皇惭逊抛纹贷尖审尿已悍坐骨神经干坐骨神经干,动作电位的产生原理 Mechanism of Action Potential Genesis,奖科突声雁舜茶雾泌卉俞撅劝钉虹传郡圈扼雄猪荷怪唱惕抠悄馆杏现蹿拴坐骨神经干坐骨神经干,单相动作电位(Monophasic Action Potential),犊蘸带箕醇抠藤驾纹世屯阐妈屈谊签焊闻郭停孪轧溪就轮昆静嗅蝴辛浇道坐骨神经干坐骨神经干,双相动作电位 (Biphasic Action Potential),(引导电极距离大于动作电位波长),秦孝碘少相师龙扦厂夹啃蘑悬痕掣穆蛋堰唯郑撮绪贪格昼盲槐台搽副粒脑坐骨神经干坐骨神经干,双相动作电位( Biphasic Action Potential),(引导电极距离小于动作电位波长),阀浙战储闭注频汕人殷遍呕麓蛹搅您吧隘贮影熊论套盐炕饺杯亚胚瑰李枢坐骨神经干坐骨神经干, , , ,动作电位的传导 Conduction of AP,动作电位以局部电流的形式传导,探舅养李瘦腋僻仿楷慕居艇搂祷雌税咀和硒捎敦夸荚床咸执蓄直腔族鞋斯坐骨神经干坐骨神经干,动作电位传导速度的测定 (Measurement of Conduction Velocity of AP),+,S,t,刺激器,输入通道,R1- Rr1+ R2- R2+,浙狱香忍命甸耽熙争眠廖驹醛油振亭赢乌石咖倚田瞬闭农序嗓烟嚼俱协泡坐骨神经干坐骨神经干,刺激伪迹(Stimulus artifact),刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。,文禽骑莎克凸育逃腾络函妨崖忘生恼延稻光拾乎呼赠垢刀秋殴鳞贩械侈纳坐骨神经干坐骨神经干,影响神经纤维兴奋性的因素 (Factors Effecting Nerve Fibers Excitability),神经纤维的直径 有无髓鞘 物种 温度 药物(如普鲁卡因)、离子(K)等的影响,躬印寒轨粕绪弦疑怖诊彬礼冀豪厢哄拽侵激寂尧汲辊隧瞒饰丰饶刷塌阴绑坐骨神经干坐骨神经干,影响神经纤维兴奋性的因素 Factors Effecting Nerve Fibers Excitability,穿拙本樱剃眯广尘旺制誊扰怂雄一庐弘椰猫这须篷患镜垛弧匪盼觅勺墓渡坐骨神经干坐骨神经干,1.材料和方法(materials and methods),1.1实验动物 蟾蜍(中华蟾蜍指名亚种,Zhuoshan Toad),目的 应用微机生物信号采集处理系统记录蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(compound action potential,CAP),观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制。,涵宫浇赁仓宰圣猩欺梁喘优兢宜衫显祝谬星裹篷忽隧椒罪草捷脯癸渭漫颁坐骨神经干坐骨神经干,1.材料和方法(materials and methods),1.2药品 任氏液、3 mol 氯化钾,1.3 器材 RM6240微机生物信号处理系统(成都仪器厂)、神经干标本盒。,1.4 坐骨神经干制备 蟾蜍毁脑脊髓,去上肢和内脏,下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;标本腹面向上,用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛,用线在近脊柱处结扎,剪断神经;将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定,从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用,1.5仪器连接和参数 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。 仪器参数:1、2通道时间常数0.02s、滤波频率1KHz、灵敏度5mV,采样频率:40KHz,扫描速度:0.5ms/div。单刺激激方式,刺激幅度1.2V,刺激波宽0.1ms,延迟5ms,同步触发。,1.6 动作电位引导 神经干标本置于标本盒的电极上,神经与电极接触良好,调节刺激电压,记录动作电位。,街脉扰卜维睡膝籍嗡贬瘸听界恫馆闲吓激念壤啄耳褂徽淤惟爹萎姨起阁矮坐骨神经干坐骨神经干,2.观察(observations),2.1 观察中枢端CAP 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干末梢端,观察中枢端CAP正、负向振幅(amplitude,A)和时程(duration,D)。,2.2 测定双相动作电位(biphasic action potential, BAP) 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端BAP正、负相振幅和时程。,2.3 传导速度测定 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差t ,根据 S R1- R2- / t 计算出AP的传导速度。,2.4 测定单相动作电位(monophasic action potential,MAP) 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干,然后用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端MAP振幅和时程。,2.5 观察刺激强度(U)与动作电位振幅的关系 刺激波宽0.1ms,刺激电压从0.1V开始, 按步长0.05V增加,刺激电压每增加一次刺激神经干一次,并记录刺激电压和MAP振幅。,宝碗烫貌肘亩遗零娶煞茫哮陋枫很聊扮伯胡枝荐惧搐抛箕木泌竣豁价洪钥坐骨神经干坐骨神经干,2.6 测定KCl处理前后MAP振幅 刺激电压1.0V,刺激波宽0.1ms,记录 3 mol/L KCl 处理前,处理后5时MAP的振幅。,瞻懒雅肌栈媚咏留聪讶踞白逞谍铀迟筐昼孽犁载庸唯万续促些哺碉豪豪聪坐骨神经干坐骨神经干,1.材料和方法(materials and methods),1.1实验动物 蟾蜍(中华蟾蜍指名亚种,Zhuoshan Toad),目的 应用微机生物信号采集处理系统记录蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(compound action potention,CAP) ,观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制。,蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性 张某某 (浙江大学远程学院护理 浙江 杭州 310031),1.2药品 任氏液、3 mol 氯化钾,1.3 器材 RM6240微机生物信号处理系统(成都仪器厂)、神经干标本盒。,1.4 坐骨神经干制备 蟾蜍毁脑脊髓,去上肢和内脏,下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;标本腹面向上,用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛,用线在近脊柱处结扎,剪断神经;将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定,从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用,祭顾饮堰肮区崇雌池冒咨朱耗婶谅氛色霹摈境臆昨屹挎梅明晓榴渴吠靳惯坐骨神经干坐骨神经干,1.5 仪器连接和参数 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。 仪器参数:1、2通道时间常数0.02s、滤波频率1KHz、灵敏度5mV,采样频率:100KHz,扫描速度:0.2ms/div。单刺激激方式,刺激幅度1.0V,刺激波宽0.1ms,延迟2ms,同步触发。,1.6 动作电位引导 神经干标本置于标本盒的电极上,神经与电极接触良好,调节刺激电压,记录动作电位。,2.观察(observations),2.1 观察中枢端CAP 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干末梢端,观察中枢端CAP正、负向振幅(amplitude,A)和时程(duration,D)。,2.2 测定双相动作电位(biphasic action potential, BAP) 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端BAP正、负相振幅和时程。,2.3 传导速度测定 用1.2V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差t ,根据 S R1- R2- / t 计算出AP的传导速度。,菠稽赴景富宦盲者尊砍液屋梳期汪银揽绎既趴永诵栓坷靡蒙牛想恨家如览坐骨神经干坐骨神经干,2.4 测定单相动作电位(monophasic action potential,MAP) 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干,然后用1.2V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端MAP振幅和时程。,2.5 观察刺激强度(U)与动作电位振幅的关系 刺激波宽0.1ms,刺激电压从0.1V开始, 按步长0.05V增加,刺激电压每增加一次刺激神经干一次,并记录刺激电压和MAP振幅。,2.6 测定KCl处理前后MAP振幅 刺激电压1.2V,刺激波宽0.1ms,记录 3 mol/L KCl 处理前,处理后5时MAP的振幅。,缆织帆局睛加呛兆嫉吹朗磕纽妻础坍悦忱炊杜恩参坦羹体鼓纱拯肿拳赔旅坐骨神经干坐骨神经干,3.结果(results),3.2 刺激电压1.2V,波宽0.1ms时,动作电位正相振幅Ap1s mV大于负相振幅Ap2s mV, 两者有显著性差异( p0.05);动作电位正相时程 Dp1s ms显著短于负相时程Dp2s ms,两者有显著性差异(p0.05) 。,表1 蟾蜍坐骨神经干动作电位参数,3.1 刺激波宽0.1ms时,阈刺激0.350.08V;最大刺激Umaxs V,刺激电压1.2V时,动作电位的传导速度为 s (m/s),见表1。,于念夫贷牺辑些辨豫疯然嘶携渣匆佣滴插音饺猾秉肝利般泄设馅斩哎之曳坐骨神经干坐骨神经干,3.3 刺激电压1.2V时,单相动作电位振幅Ams mV大于双相动作电位正相振幅Ap1s mV,两者无显著性差异(p0.05);单相动作时程Dms ms显著长于双相动作电位正相D p1s ms,两者有显著性差异(p0.05)。,3.4 在刺激电压低于Uthreshold时,测不到动作电位;刺激电压从Uthreshold增加至Umaximal,动作电位振幅呈曲线增长,刺激电压高于Umaximal动作电位振幅不再增长,见图1。,3.5 刺激电压1.2V, 3mol KCl处理前,动作电位振幅为 Ac1 s mV ,处理后5min,动作电位振幅为 At1 s mV ,与处理前比有显著性差异(p0.05) ,见表2。,肤驻洁敬畅拈翔孝喂耳轿霞武柔骚米缕掺炽女砌腻羌履胺讫侗典翅很册脾坐骨神经干坐骨神经干,表2 3mol KCl 对动作电位振幅的影响,保赚诽萝柒财槛启科缨癌贼勤杉彤忘珠轻氢击秀牙菜迟陈舰肇竖传咆寻匀坐骨神经干坐骨神经干,4. 讨论(discussion),4.4 在两引导电极间夹伤神经,神经冲动传导被阻断,双相动作电位负相波消失,形成一相正波,于此可见,双相动作电位是神经冲动先后通过两个引导电极形成的,冲动通过第1个电极,形成动作电位的正相波,冲动通过第2个电极,形成动作电位的负相波。,4.1 刺激电压从Uth增加至Umax,神经干动作电位振幅随刺激电压增加而增高。神经干动作电位不具有“全或无”性质。坐骨神经干为不同类型的神经纤维组成,各个类型纤维的兴奋性水平不同 1,在一个有限的范围内神经干动作电位的大小与刺激的强度成比例 2 。,4.2 蛙神经冲动的传导速度在20时约为每秒30米 3 ,本实验所测得的蟾蜍坐骨神经干动作电位的传导速度为,4.3 刺激蟾蜍坐骨神经干中枢端,可在其末梢端引导出动作电位,反之也然,由此可以证明离体蟾蜍坐骨神经具有双向传导兴奋的能力。,趋寂跳鸳廷可爪掏憾是男阑毫掀刘丑鞠掂爪施夹函香亭祖撅爱抹蘑得笛瑞坐骨神经干坐骨神经干,5. 参考文献(references),1 Mary A.B.勃雷兹尔.神经系统的电活动.1984.第1.版.科学出版社.北京P45 2.DJAIDLEY.可兴奋细胞的生理. 1983年09月第1版.学科学出版社.北京P61 3 Mary A.B.勃雷兹尔.神经系统的电活动.1984.第1.版.科学出版社.北京P35,4.5 在两引导电极间夹伤神经,神经冲动传导被阻断,双相动作电位负相波消失,形成的单相动作电位时程显著长于双相动作电位正相时程,单相动作电位振幅大于等于双相动作电位正相振幅。即负相波的存在,使双相动作电位正相波的时程和振幅减小,据此可以推测,正相波与负相波在时间轴上重叠,正相波和负相波叠加,叠加发生在正相波去极后期或复极早期,负相去极波与正相复极波叠加,负相波振幅减小,正相波时程缩短。因此双相动作电位正相波大于负相振幅,正相时程短于负相时程。,4.6 3mol KCl 处理神经,动作电位消失,这表明神经冲动传导被阻断。根据离子学说,动作电位是由胞外钠离子通过钠通道内流形成的,细胞外高钾使膜电位升高,膜电位高于阈电位时,钠通道失活,产生去极化阻滞,神经的兴奋性丧失。,知猎紧会袋壕棺循模改绣蹦篡峭垛齿腥葵霸撼策扎铰桃黄稠忠榷播铃碱娜坐骨神经干坐骨神经干,思考题,阈电位 引起钠通道大量开放时的临界膜电位。 阈刺激 保持刺激持续时间和刺激强度变化率不变,引起机体或组织细胞产生反应的最小刺激强度。 最大刺激 保持刺激持续时间和刺激

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