玉米须总黄酮提取的开题报告.doc

本科毕业论文（设计）开题报告论文题目： 玉米须多糖和皂苷提取 The Extraction of Stigma maydis 学生姓名： 冯苏 学号 0707040017 专 业： 生物科学（师范） 指导教师： 丁红秀 完成时间： 2009-8-3 生命科学学院二一年八月玉米须多糖和皂苷提取The Extraction of Stigma maydis一、论文研究背景及意义1.1论文研究背景（依据）玉米须为禾本科玉属植物玉米地花柱和柱头，内含有大量有效成分，如矿物质、黄酮类、糖类、皂苷、挥发性化学物质、天然维生素E、有机酸等。为中华人民共和国卫生部药材标准1985版（一部）收录的常用药材品种之一。民间常用于药茶、药膳中，作为唐念冰、高血压的辅助治疗药物。现代药理研究也正式证实玉米须有降血糖，抗癌、抑菌、增强免疫功能、利尿、降血压等功效。从玉米须中提取的多糖和皂苷具有多种功效，并且具有安全无毒无副作用的优点备受研究关注。在我国玉米地种植面积非常的广，所以原材料也非常的丰富。有很好的发展前景。提取玉米须多糖的方法有热水提醇沉法、酶法提取、超声提取、酶2超声联合提取、。而其中的酶法提取对提取的温度控制相当严格，加大了工作的难度，不利于大量生产，而超声提取对仪器设备要求较高，但是产量却不高，不易于企业投产使用。此次试验采取的是热水提醇沉发提取多糖，这种方法成本低，工艺简单，无添加有毒溶剂，产品产率高。（这些内容中可以把相关研究人员所做的工作概述进去）提取皂苷的方法有打孔吸附树脂技术、微波提取技术、超声波振荡辅助技术、色谱技术、泡沫分离技术、膜分离技术、超临界流体萃取技术、加热回流提取法。虽然以上各大技术在各领域都得到广泛的应用，但是个技术投入量和成本都非常高，此次试验根据皂苷溶于热乙醇的特性，结合多糖的提取技术，充分利用试验资源，采取的是热乙醇提取技术。并用正交法对两种物质提取工艺进行优化。（以上及后面内容中各论述的文献来源请标注。语言流畅性、错别字请好好修改） 1.2相关国内外的研究现状20世纪20年代起，基于玉米须的临床作用，国内外学者对其化学成分开始大量研究。科学研究已经确认多糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，且无毒副作用，在保健食品的开发应用上前景广阔。现在国际上多糖研究以日本、美国、德国等处于领先地位。美国的食品药品管理局确认其安全、无毒，其提取物所制药品为非处方药。我国多糖的研究起步较晚，对于日常食品中多糖的研究相对较少。（国内外学者对玉米须化学成分相关研究究竟有哪些，要在这部分内容中表现出来，并注明参考文献出处）我国的中药大辞典、全国中草药汇编等当代中医药典籍中均有有关玉米须药用价值的记载，我国医学认为玉米须性平、味甘，具有利尿泄热等功效，课用于治疗肾炎、胆结石、糖尿病等症。国内外在玉米须有效成分的提取工艺中，对多糖和黄酮提取工艺的论文比较多，而有关皂苷提取技术的文献相对较少，特别是玉米须中的皂苷的提取更是稀缺。很多的提取多糖的同时把皂苷成分完全舍弃。导致其他成分的大量流失。但是有更加的成熟的技术后玉米须多糖和皂苷将会在我国有更大的应用前景，首先，我国玉米种植面积为2350万平方千米（我国国士面积也不过960万平方千米？），玉米产量居世界第二，估算玉米须的产量为750万t以上。为玉米须工业化应用提供了充分的原材料。其次，超声波等物理性一起已经发展成熟，为生物研究提供了更加精密的实验仪器。使得研究朝向更科学的方向发展。最后，生物研究领域异军突起，在我国近20年来，涌现出了大批的生物领域精英，为生物研究提供充实的基础。因此，玉米须的有效成分的应用将会大量的通企业的形式大面积的提取生产。1.3 论文研究的目的意义目的： 实验设计沸水浸提时间、料液比、乙醇浓度、乙醇温度四个关键单因子因素的影响对多糖和皂苷提取量的对比研究，得出提取最佳条件。意义： 通过各单因子的研究，再用正交法得出最佳优化工艺。为其他科研提供可靠有效的实验数据和方法。并且据此撰写毕业论文。二、项目的研究内容及拟解决的关键问题内容：采用水浸提法提取玉米须中的多糖，热水的效果要比冷水浸提的效果好，并且在一定范围内随着温度的提高提取率增大，这是由于在热作用下，玉米须的组织更容易松散，从而使细胞内的多糖更容易浸提出来。热作用还使分子运动速度加快，加快了传质运动，使细胞内的多糖更容易浸出。新鲜玉米须处理除杂，在烘箱内80烘干后取出，研磨成粉末状，储存在大烧杯，用保鲜膜封口，密闭保存备用。取20g研磨粉末于烧杯中加热水浸提若干时间，过滤，取滤液，浓缩。加入热乙醇直到无晶体析出，抽滤，所得滤液加入蒸馏水，冷却后，逐滴加入乙醚-丙酮（1:1）混合物，摇匀后析出沉淀物为皂苷，继续滴加乙醚可得到较纯的皂苷，用香草醛-硫酸分光光度法测定皂苷含量；所得滤渣继续加乙醇沉淀8h后在离心机5000rmin离心5分钟后弃上清液并在沉淀中加入无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯交替洗涤沉淀，过滤得到的滤渣放在表面皿中在烘箱中80烘干后即为较纯多糖，用分光光度法测定多糖含量。拟解决的关键问题：最佳浸提工艺条件的确定。三、实验方案3.1 主要实验材料新鲜玉米须(干玉米须)3.2 实验试剂乙醇 乙醚 丙酮 乙酸乙酯 标准葡萄糖溶液 苯酚 香草醛-冰醋酸溶液 高氯酸 皂苷D对照品3.3实验仪器与设备烘箱 研钵 烧杯 电子天平 漏斗 玻璃棒 滤纸 酒精灯 抽滤器 离心机 表面皿 可见光分光光度计 50ml容量瓶 50ml比色管 移液管 3.4：实试验方法和步骤（实验方法的参考出处请标注，从你所写的内容来看，你是打算多糖与皂甙一步提取然后再分离测定对吧，那么具体的提取方法及工艺流程请详细写出来，到底是水提还是醇提？请与前面统一，后面的乙醇浓度及温度与提取本身应无关系，乙醇应该是在分离纯化时候用到的对吧？如果是这样，你所做的内容应该包括提取工艺和分离工艺两个方面，这是一个非常庞大的工作，你可能要考虑清楚，我建议分离部分你只要参考别人的方法用确定的乙醇浓度及加热温度做即可，实验方法工艺也按照这个思路来进行修改）（1）玉米须皂苷的提取（2）皂苷浓度测定标准曲线制定：吸取皂苷D对照品溶液1、1.5、2、2.5、3、3.5ml水浴挥干，加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，与70水浴加热15min，取出，冰浴5min，再加5ml冰醋酸，在395nm波长下测定吸光度，并绘制标准曲线（3）玉米须多糖的提取（3）多糖浓度测定标准曲线制定：葡萄糖在105干燥2h，称取干燥后的葡萄糖加水溶解至50ml容量瓶中作为液。取1、2、3、4、5、6、7ml贮备液与50ml比色管中，加水至刻度线，分别吸取上述溶液0.2ml至于10ml试管中，加入60%苯酚溶液0.4ml，混合均匀与40水浴30min后在490nm波长下测定各自的吸光度并且绘制标准曲线（3）热水浸提单因素试验，确定水提法的最佳浸提工艺条件。3.2.1 沸水浸提时间的影响设计五组时间分别为3h、6h、9h、12h、15h3.2.2 料液比的影响设计提取液与玉米须的倍数关系为12X、14X、16X、18X、20X3.2.3 乙醇浓度的影响乙醇浓度为59%、60%、70%、80%、90%3.2.4 热乙醇加热温度的影响加热温度梯度为40、50、60、70、803.2.4 正交试验结果与讨论3.2.5 得出结论四、可行性分析本实验设计根据多糖和皂苷都是溶于热水，并且皂苷是在低浓度乙醇溶液或者是热乙醇溶液中可溶，而多糖在乙醇-水溶液中会析出结晶。并参阅大量的参考文献，确定实验方案。 五、论文研究过程计划及时间安排2010-7-42010-7-25 收集资料及查阅相关文献 2010-7-282010-8-1 撰写开题报告 2010-8-12010-8-5 准备实验材料及药品 2010-8-92010-8-31 实施实验 数据整理 2010-9-12010-10-31 论文撰写（这部分要按学院规定的统一进度来写）六、毕业论文（设计）提纲(1).中英文题目(2).中文摘要与关键词(3).英文摘要(4).引言(5).材料与方法(6).实验过程(7).结果及分析(8).小结与讨论(9).参考文献(10).致谢！参考文献1赵春桂，王玲.玉米的营养与药用价值概述.河北中医学院学报，1996，11（3）：34-362 韩萍李，海燕侯，长希. 玉米须的化学成分及其应用研究进展.现代农业科技，2009,18：17-213 朱旭，邱智东. 玉米须的化学成分及药理作用研究.长春中医药大学学报.2009,25(2):183-1844 叶盛英， 高文远. 中药玉米须研究进展. 中成药.2008,30(5):745-7475 王元清, 严建业, 陈志文等. 均匀设计优选玉米须中总黄酮和多糖的水提工艺. FO0D&MACHINERY.2010,26(2)6 王元清，严建业 ，陈晓莉等. 壳聚糖用于玉米须水提液的纯化工艺研究. 北方园艺.2010,(7):40-427 王在贵,刘朝良,吴晓峰等. 可溶性玉米须多糖的提取与纯化. 中国饲料.2010,9:33-358 金丽梅，刘伟，汤一哲等. 水提醇沉法玉米须多糖提取工艺研究. 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报.2007,19（5）：62-669 李春阳 ，李 波，赵永春等. 玉米须多糖提取工艺的研究. 河南科技学院学报(自然科学版).2007,35(4):54-5510 李坦,申野,吕刚等. 玉米须蚕茧总皂苷提取工艺条件优化研究. 北华大学学报(自然科学版).2008,9(4):331-33311 赵文竹，于志鹏，于一丁等. 玉米须多糖的研究进展.食品科学.2010,31(11):289-29212 USA Food and Drug Administration.Weight control drug products forover the counter human use, certain active ingredientsJ. Fed Regist,1991, 56(153): 37792.13 THULASI G P, CHERUPALLY K K N, JANARDHANAN K K.Polysaccharides isolated from Ganoderma lucidum occurring in southernparts of India, protects radiation induced damages both in vitro andin vivoJ. Environmental Toxicology and Pharmacology, 2008, 26: 80-85.14 YANG Bao, JIANG Yueming, ZHAO Mouming, et al. Structuralcharacterisation of polysaccharides purified from longan (Dimocarpuslongan Lour.) fruit pericarpJ. Food Chemistry, 2009, 115: 609-614.15 魏静娜, 林 强, 朱宏吉. 玉米须多糖提取方法的比较研究. 中药材.2007,30(1):92-9416 应奇才, 华启洪, 蔡玲斐等. 玉米须多糖提取工艺条件的优化. 中国生化药物杂志.2006,27(4):233-23417 刘娟 ，杨光，韩晓强. 玉米须多糖提取及其含量测定方法. HEILONGJIANG MEDICINE AND PHARMACY.2009,28(5):9-1018 罗泳林,丘丹萍,唐燕青等. 白鹤藤总皂苷提取条件蹬优化. 化工技术与开发.2010,39(1):4-919 谭伟,戴建辉,熊勇等. 滇重楼皂苷提取及含量测定. 云南民族大学学报(自然科学版).2010,19(2):127-12920 王治宝, 李焕芬, 边永玲等. 葛花中总皂苷的含量测定.河北北方学院学报(自然科学版).2008,24(2):30-3221 鄢紫红，郑可利，王铮敏. 黄花倒水莲中远志皂苷提取工艺.22 许 敏，高 英，李卫民. 麦冬总皂苷含量测定方法的研究. 临床医药实践.2010,19(5B):596-59723 李少亮. 天然甾体皂苷的提取分离现状. 辽宁化工.2010，39（4）：428-4432