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文档简介

课时跟踪检测(四十一) DNA的粗提取与鉴定一、选择题1鉴定DNA的试剂是()A斐林试剂B苏丹染液C双缩脲试剂D二苯胺试剂解析:选D鉴定DNA用的试剂是二苯胺,苏丹染液用于鉴定脂肪,斐林试剂用于鉴定可溶性还原糖,双缩脲试剂用于鉴定蛋白质。2在提取DNA的过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A不易破碎B减少提取过程中DNA的损失C增加DNA的含量D容易刷洗解析:选BDNA易被玻璃器皿吸附,使用塑料试管和烧杯,可以减少DNA的损失。3(2018海安期中)在生物实验中,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中的有关有机化合物的存在。下列实验内容正确的是()A检测成分:还原糖。检测试剂:斐林试剂。部分实验步骤:甲、乙液等量混匀后,注入待测组织样液中,颜色变化:砖红色B检测成分:脂肪。检测试剂:苏丹染液。部分实验步骤:将花生子叶切片染色后,制成临时装片,在显微镜下观察,颜色变化:橘黄色C检测成分:蛋白质。检测试剂:双缩脲试剂。部分实验步骤:A、B液混匀后,注入待测组织样液中,并进行隔水加热,颜色变化:紫色D检测成分:DNA。检测试剂:二苯胺试剂。部分实验步骤:将提取的含杂质较少的DNA丝状物再溶解,加入二苯胺混匀后,进行沸水浴5 min,颜色变化:蓝色解析:选D还原性糖的鉴定还需要水浴加热;将花生子叶切片用苏丹染液染色,用酒精洗去浮色后制成临时装片,在显微镜下观察呈现橘黄色;双缩脲试剂鉴定蛋白质时,先加双缩脲试剂A(0.1 g/mL NaOH浓度),再加入双缩脲试剂B(0.05 g/mL CuSO4),摇匀后成紫色,不需要水浴加热;将提取的含杂质较少的DNA丝状物再溶解于2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺混匀后,进行沸水浴加热5 min,呈现蓝色。4下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是()A取材:鸡血细胞。原因:有细胞核,其他动物的血细胞都没有细胞核B粗提取:不同浓度的NaCl溶液。原因:DNA在其中的溶解度不同C提纯:95%的冷酒精。原因:DNA溶于酒精,蛋白质等杂质不溶于酒精D鉴定:二苯胺试剂。原因:DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色解析:选B除了哺乳动物成熟的红细胞,其他动物的血细胞都有细胞核。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,从而粗提取DNA。DNA不溶于酒精,蛋白质等杂质溶于酒精,进而提纯DNA。DNA溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才会呈蓝色。5(2018常州一模)在DNA粗提取与鉴定实验中,将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次,则DNA主要集中在标号()操作黏稠物滤液2 molL1的NaCl溶液搅拌过滤0.14 molL1的NaCl溶液搅拌过滤95%的冷酒精搅拌过滤A.BCD解析:选BDNA在2 molL1的NaCl溶液中溶解度大,过滤后DNA存在于滤液中;DNA在0.14 molL1的NaCl溶液中溶解度低,搅拌过滤后存在于黏稠物中;DNA不溶于95%的冷酒精,搅拌过滤后存在于黏稠物中。6(2018南通一模)如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图,下列相关叙述正确的是()A图1中溶液a是0.14 molL1的NaCl溶液B图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精,而蛋白质等杂质不溶C图2所示实验操作中有一处明显错误,可能导致试管2中蓝色变化不明显D图2试管1的作用是证明2 molL1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色解析:选C图1中是将丝状物溶解,溶液a是2 molL1的NaCl溶液;加入冷却的酒精的目的是除杂,原理是DNA不溶于冷酒精,而杂质蛋白能溶于酒精;图2操作中的错误是试管2中未将DNA溶于2 molL1的NaCl溶液中,可能导致试管2蓝色变化不明显;图2试管1的作用是证明2 molL1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色。7(2018南京一模)下列有关用鸡血进行DNA粗提取和鉴定实验的操作,错误的是()A鸡血细胞中加入蒸馏水后,用玻璃棒搅拌B用蛋白酶纯化溶解于2 molL1 NaCl溶液中的DNAC在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精可析出DNAD将卷在玻璃棒上的丝状物加入4 mL二苯胺试剂中,沸水浴加热,冷却后观察解析:选D卷在玻璃棒上的丝状物(DNA)首先溶于2 molL1NaCl溶液中,然后再加4 mL二苯胺试剂,沸水浴加热,冷却后观察颜色变化。8下列关于DNA粗提取和鉴定实验的叙述,正确的是()A加入预冷的体积分数为95%的酒精后用玻璃棒要轻缓搅拌B调节NaCl溶液物质的量浓度至0.14 molL1,过滤后取滤液进行后续步骤的操作C在剪碎的植物中加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨D向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后溶液即呈蓝色解析:选ADNA在0.14 molL1的NaCl溶液中溶解度最低,过滤后取纱布上的黏稠物进行后续步骤的操作;用植物材料提取DNA时要加入食盐和洗涤剂,前者是溶解DNA,后者是破坏细胞膜;向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂,然后要沸水浴加热,最后才可观察到溶液呈蓝色。9(2018苏州期初)如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列有关叙述正确的是()ADNA在常温下遇到二苯胺会被染成蓝色B图中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液使DNA析出CDNA在2 mol/L的盐溶液中溶解度比较小D加入酒精后需用玻璃棒快速来回搅拌解析:选BDNA溶液加入二苯胺试剂,在沸水浴加热的条件下会变蓝;在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液,降低DNA的溶解度,使DNA析出;DNA在2 mol/L的盐溶液中溶解度比较大;加入酒精后需用玻璃棒搅拌,动作要轻缓,以免加剧DNA分子断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。10若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等,其不可能的原因是()A植物细胞中DNA含量低B研磨不充分C过滤不充分D95%冷酒精的量过少解析:选A研磨不充分、过滤不充分均会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,也会导致DNA的沉淀量变少。11“DNA粗提取”实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。下列相关操作正确的是()A以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸馏水,使DNA快速析出C将丝状物溶解到2 molL1NaCl溶液中后,加水析出D向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌解析:选D以菜花为材料进行研磨时要加洗涤剂和食盐,不能加热,否则DNA水解酶活性会上升,会加速分解DNA;向DNA溶液中加蒸馏水要缓慢,使DNA充分析出;将丝状物溶解到2 molL1 NaCl溶液中的目的是为了进行鉴定,应该加入二苯胺试剂,不是加水;向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA,防止DNA断裂。12(2017苏北四市三模,多选)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,下列叙述错误的是()A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 molL1,去除析出物B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在2 molL1 NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D由于DNA对高温耐受性较差,故需向DNA滤液中加入冷酒精解析:选ACD用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 molL1,过滤去除溶液中的杂质,取出析出物。调节NaCl溶液浓度可以去除与DNA溶解度不同的杂质;加入木瓜蛋白酶可以去除蛋白质类杂质。将丝状物溶解在2 molL1 NaCl溶液中,加入二苯胺试剂沸水浴5 min,冷却后呈蓝色。由于DNA不溶于酒精,某些蛋白质溶于酒精,故需向DNA滤液中加入冷酒精提纯DNA。13(多选)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破CDNA不溶于95%的冷酒精而溶于2 molL1的NaCl溶液D溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色解析:选CD新鲜菜花可用于DNA的粗提取,但猪血中几乎不含DNA;植物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜。14(2017苏锡常镇三模,多选)研究人员比较了不同贮藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高,获得的DNA越多)的影响,实验结果见下图。下列有关叙述正确是()A提纯DNA时可加入酒精去除不溶的蛋白质、酚类等物质B新鲜棉叶提取的DNA纯度最高,提取DNA的量也最多C木瓜蛋白酶和不同浓度的NaCl溶液均可用于提纯DNAD用二苯胺试剂鉴定,颜色最深的是冷冻3 d处理后提取的DNA解析:选CD提纯DNA时可加入酒精去除可溶的蛋白质、酚类等物质;新鲜棉叶提取的DNA纯度最高,冷冻3 d时提取DNA的量最多,二苯胺试剂鉴定颜色最深;木瓜蛋白酶可以去除蛋白质,不同浓度的NaCl溶液可去除与DNA溶解度不同的杂质。二、非选择题15(2017南通三模)为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿异戊醇,蛋白质等溶于氯仿异戊醇。分析回答:主要提取过程:结果检测:组织方法组别OD260/OD230OD260/OD280得率(gmg1)嫩叶A方法A11.9701.8210.105B方法B11.9731.7190.096C方法C11.6471.5680.082块根A方法A21.8881.8880.029B方法B21.8111.6820.030C方法C21.3761.3200.020注:纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多。纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留;若小于1.8表示存在蛋白质残留。得率是指每毫克组织所提取的DNA量。(1)步骤将DNA粗提液在65 水浴保温60 min的目的是_。步骤“?”表示_。步骤中加RNA酶的作用是_。(2)影响DNA纯度的物质主要有_。提取的DNA中RNA残留较多的方法是_。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是_。(3)电泳可以直观对比DNA的完整性,分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同,从而产生不同的条带。如图是上述实验中提取到的总DNA凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带,而C方法有明显的“拖尾”现象。只出现一条带的原因是_。出现“拖尾”现象的原因是_。解析:(1)将DNA粗提取液在65 水浴保温,65 能够使蛋白质变性,而DNA耐高温。DNA不溶于氯仿异戊醇,故离心后DNA存在于上清液中。RNA酶可降解RNA,提高DNA纯度。(2)由实验过程及结果可知,DNA中的杂质主要是蛋白质、RNA、小分子物质等。根据“OD260/OD280比值大于1.8表示存在RNA残留”得出,A方法提取的DNA中

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