全国通用2018届高考生物二轮复习微生物的培养与应用专题卷_3.doc

微生物的培养与应用一、单选题1下列关于生物工程的叙述中，不正确的是（ ）A动物细胞培养可用于检测污水中致癌和致畸物质的毒性B标记基因可用于检测运载体是否被导入受体细胞CDNA探针可用于检测苯丙酮尿症和21三体综合症D选择培养基可用于筛选单克隆杂交瘤细胞、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌【答案】C【解析】2关于菌种保藏叙述不正确的是A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B. 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法C. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长D. 对于需要长期保存的菌种,可以采用4 冰箱中保藏的方法【答案】D【解析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A错误；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法，采用-20 冰箱中保藏，B正确， D错误；临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，C正确。3总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是A. 总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外B. 总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关C. 相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多D. 接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好【答案】C【解析】状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。4下列关于纤维素酶的说法，错误的是( )A纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分B葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖C纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖【答案】B【解析】纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，A正确；葡萄糖苷酶可把纤维二糖分解成葡萄糖，B错误；植物体细胞的细胞壁主要由纤维素和果胶组成，所以纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁，C正确；纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖，D正确【考点定位】 果胶酶的活性测定【名师点睛】纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖但刚果红可以与纤维素形成红色复合物，并不和水解后的产物发生这种反应5下列关于微生物营养的说法正确的是A. 同一种物质不可能既做碳源又做氮源B. 除水以外的无机物仅提供无机盐C. 凡是碳源都能提供能量D. 无机氮源也可以提供能量【答案】D【解析】对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A错误；CO2和N2是无机物，也是某些微生物的碳源和氮源，B错误；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量，C错误自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量，叫做化能合成作用，D正确。6下列有关平板划线操作的叙述，错误的是 ( )A在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连【答案】D【解析】试题分析：每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧，故A正确；灼烧后的接种环需冷却后再蘸取菌液，故B正确；蘸取菌液和划线都要在酒精灯的火焰旁进行，故C正确；划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连，故D错误。考点：本题考查平板划线法的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。7关于灭菌和消毒的理解不正确的是（ ）A灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等【答案】B【解析】试题分析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子，A项正确；常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等，其中接种环用灼烧法灭菌，C、D项正确；消毒是指用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部部分微生物，综上所述，B项错误。考点：本题考查灭菌和消毒的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。8下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是A此培养基可用来培养自养型微生物B若除去，此培养基可用于培养圆褐固氮菌C此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源D培养基中若需加入氨基酸，它可充当碳源、氮源、生长因子和能源【答案】B【解析】本题考查微生物的培养相关知识。由题知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，选项A、C、D均对；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培养基中必须含含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，B错。9下列有关MS培养基与微生物培养基的说法错误的是（ ）AMS培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要BMS培养基中的碳源和能源是蔗糖CMS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素DMS培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素等微生物必需的营养物质【答案】D【解析】10不同培养基的具体配方不同，但一般都含A. 碳源、磷酸盐和维生素 B. 氮源和维生素C. 水、碳源、氮源和无机盐 D. 稀有元素【答案】C【解析】不同的培养基都需要含有最基础的成分，即水、无机盐、碳源和氮源，C正确。磷酸盐和维生素不是所有培养基都要含有的，A、B错误。稀有元素也是在某些特殊培养基中才有的，D错误。11下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其你拟核实一个环状DNA分子B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时，应及时添加核算等生土长基因子D处于对数期的大肠杆菌，常作为生产作用的菌种和科研的材料【答案】【解析】大肠杆菌以二分裂方式进行繁殖；在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌存在分解葡萄糖的组成酶和分解乳糖的诱导酶，分解葡萄糖的组成酶一直存在，只有葡萄糖分解完后，乳糖才能诱导产生分解乳糖的诱导酶，所以大肠杆菌首先利用葡萄糖作碳源；大肠杆菌的生长不须要生长因子；处于队数期的大肠杆菌生长繁殖活跃，代谢稳定，常作为生产作用的菌种和科研的材料。12下列相关实验组合不正确的是A. 显微镜直接计数-统计微生物数量B. 预实验-摸索“探究木瓜蛋白酶最适pH”的实验条件C. 对比实验-探究酵母菌的呼吸方式D. 标志重捕法-调查植株上蚜虫的种群密度【答案】D【解析】试题分析：蚜虫的活动能力弱、活动范围小，因此调查蚜虫的种群密度的方法是样方法，故D错误。考点：本题主要考查教材中的实验，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。13现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌【答案】B【解析】固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的固氮菌，故选B。【考点定位】微生物的分离和培养 【名师点睛】葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；不含有机碳源的培养基，适用于自养微生物的生长。14将大肠杆菌从菌种试管接种到另一支试管的操作，下列说法有误的一项是A整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行B接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种C菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次D带菌的接种环应在培养基面上轻轻划线【答案】B【解析】试题分析：将大肠杆菌从菌种试管接种到另一支试管的操作时，需避免杂菌污染，所以整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近无菌区进行，A正确；接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后需先冷却，然后伸入菌种试管挑取少许菌种，B错误；菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次，C正确；带菌的接种环应在培养基面上轻轻划线，D正确。考点：微生物的接种与培养15下列有关生物技术的叙述正确的是A对胡萝卜素的提取过程中,浓缩是在过滤之后B制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长C固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比酵母细胞快D实验室进行微生物筛选时，要为所有微生物提供适宜的生长条件 【答案】B【解析】制作腐乳时，盐可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长。16豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是A. 该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量B. 大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味C. 若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌D. 煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质【答案】C【解析】根据题干信息分析，该实验的自变量是菌种的种类（甲乙两种菌种），而温度属于无关变量，A正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B正确；若容器内上层大豆发酵效果优于底层，说明发酵菌为需氧型，C错误；煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质，D正确。17常作为人们鉴别菌种的重要依据是( )A细菌群体的结构特征 B单个细菌的结构特征C鞭毛、荚膜的有无 D拟核、细胞壁的特征【答案】A【解析】单个细菌用肉眼是看不见的，但是，当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落不同种类的细菌所形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定的特征例如：无鞭毛的球菌，常形成较小较厚、边缘较整齐的菌落；有鞭毛的细菌则形成大而扁平、边缘呈波状或锯齿状的菌落每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。【考点定位】微生物的培养和利用18醋酸菌和乳酸菌都属细菌,拟核中都含一个DNA,但与呼吸有关的酶却差异很大，原因是（ ）A生活环境不同 BDNA分子中碱基对排列顺序不同CDNA分子中碱基配对方式不同 D着丝点数目不同【答案】B【解析】醋酸菌和乳酸菌都属细菌,拟核中都含一个DNA,但与呼吸有关的酶却差异很大，这是因为，二者的基因不同，基因不同取决于DNA分子中碱基对排列顺序不同。故本题选B。19下列关于细菌的叙述，错误的是A. 根瘤菌能够固氮，因此是自养型微生物B. 硝化细菌可以利用化学能将CO2转化为有机物C. 在培养基中可以不加碳源进行硝化细菌的培养D. 含伊红美蓝试剂的培养基可以鉴别牛奶中的大肠杆菌【答案】A【解析】根瘤菌只有入侵到豆科植物根内才能固氮，利用豆科植物的有机物，属于异养型微生物，A错误；硝化细菌可以利用氨气氧化释放出的化学能，将二氧化碳和水等无机物转化为有机物，属于生物圈中的生产者，B正确；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加碳源，C正确；伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，可以用来鉴别和计数大肠杆菌，D正确。20下列关于培养基的叙述中正确的是A.利用选择培养基可分离出特定的微生物B.动物细胞培养常用的是固体培养基C.固体培养基中加入少量的水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌【答案】A【解析】试题分析：A.选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基；目的是从众多微生物中分离所需要的微生物；正确。B.动物细胞培养常用的是液体培养基；错误。C.固体培养基是液体培养基添加凝固剂形成的，其他成分均相同；错误。D.单个的微生物形体微小，肉眼无法看到，必须借助仪器才能看到，在固体培养基上用肉眼观察到的是一个菌落；错误。考点：培养基。点评：考查基本，来自课本，是基础知识考试的理想题目，学生应理解加记忆。二、非选择题21某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数，请回答与此实验相关的问题：(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37 ，要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌，一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。【答案】（1）氮源（碳源不作要求） 碳源 无机盐 水（2）高压蒸汽灭菌（3）恒温培养箱 无菌水（4）多 高（5）盐（或NaCl） 选择培养基【解析】试题分析：（1）不同的培养基都含有基本成分，水、无机盐，碳源、氮源所以培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源、碳源，除此之外，培养基还必须含有的基本成分是水和无机盐（2）对培养基灭菌常采用的方法是高压蒸汽灭菌，对培养皿进行灭菌采用的方法是干热灭菌法（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱 中培养，培养的温度设定在37要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水 作为对照进行实验（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，如果其总数越多，则说明湖水样品中有多种细菌，污染程度越重（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐盐细菌，这种培养基被称为选择培养基故答案为：（1）氮源（碳源不作要求） 碳源 无机盐 水（2）高压蒸汽灭菌（3）恒温培养箱 无菌水（4）多 高（5）盐（或NaCl） 选择培养基考点：微生物的分离和培养；培养基对微生物的选择作用22长时间使用的木质筷子或竹质筷子，将其切片在电子显微镜下观察，会发现细小的小室， 里面的食物残渣成为幽门螺旋菌、黄曲霉菌等微生物生长的温床。请回答：（1）在电子显微镜下观察到的细小的小室是植物细胞死亡后留下的_，能分解此结构的酶包括：C1酶、Cx酶和_。（2）黄曲霉菌产生的_属于化学致痛因子。若在实验室中培养黄曲霉菌应将培养基的PH值调至_（填“酸性或碱性或中性”）。（3）在日常生活中，经常用_法对筷子进行消毒。（4）在实验室中，获得纯净培养物的关键是_。（5）实验室中培养幽门螺旋菌或黄曲霉菌后的培养基，在丢弃前一定要_处理，以免_。【答案】 细胞壁 葡萄糖苷酶 黄曲霉素 酸性 煮沸消毒法 防止外来杂菌的入侵 灭菌 污染环境【解析】试题分析：本题考查微生物分离和培养，解题关键是能识记培养基的基本成分及特殊需求，能识记无菌技术及实例，在结合所学的知识点，就能准确答题。（1）在电子显微镜下观察到的细小的小室是植物细胞死亡后留下的细胞壁；植物细胞壁的主要成分是纤维素，根据酶的专一性原理，能分解纤维素的酶为纤维素酶，包括：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。（2）黄曲霉菌产生的黄曲霉素属于化学致痛因子，黄曲霉菌是一种真菌，培养真菌时需要将培养基的pH调至酸性。（3）在日常生活中，经常用煮沸消毒法对筷子进行消毒。（4）在实验室中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。（5）实验室中培养幽门螺旋菌或黄曲霉菌后的培养基，在丢弃前一定要灭菌处理，以免污染环境。23王致和为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？盐在该过程中起什么作用？(3分)【答案】盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。盐能抑制多种微生物的生长。【解析】略24请回答下列与微生物有关的问题：（1）微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含 的土壤表层。（2）微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用的 和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用 法进行灭菌。（3）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型 发酵产生酒精。（4）微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是 和稀释涂布平板法。（5）微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是（6）微生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入 染料，发生红色反应，再根据培养基中是否产生 来筛选纤维素分解菌。【答案】（1）纤维素（2）酒精 高压蒸汽灭菌（3）酵母菌（4）平板划线法（5）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（6）刚果红 透明圈【解析】试题分析：（1）微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含有机质的土壤表层。（2）微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。（3）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型酵母菌发酵产生酒精（4）微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。（5）微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（6）微生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入刚果红将呈红色反应，再依据培养基中是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。考点：微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对能源的利用，考察的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取。25(生物选修1：生物技术实践)（15分）下列为生物技术在生产实践中的应用，请回答问题：（1）在制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素。结果发酵失败，原因是_。（2）纤维素分解菌可用于农作物秸秆还田，用_染色法鉴别纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会出现透明圈，其大小能反映 。（3）农业生产上可以利用植物组织培养的方法来获得较多优良柑橘苗。 培养基是常用的一种培养基，能为外植体细胞提供大量元素、微量元素和有机物。在配置好的该培养基中添加的生长素和细胞分裂素是 的关键性激素。（4）利用培养基不仅可以进行植物组织培养，也可以分离培养大肠杆菌。与植物组织培养明显不同的是，用于大肠杆菌培养的培养基中不需要加入 。（5）工业上通过提取橘皮精油作为食品、化妆品的配料，提取时通常采用新鲜材料，原因是 ；对于压榨后得到的糊状液体，除去其中的固体物可采用的方法是 。【答案】（除标注外，每空2分，共15分）（1）青霉素杀死了乳酸菌 （2）刚果红 菌株产酶能力或酶活性强弱（3）M S（1分） 启动细胞分裂、脱分化和再分化 （4）植物激素（5）橘皮精油含量较高 普通布袋过滤【解析】试题分析：（1）泡菜利用的是乳酸菌，属于细菌，如果加入青霉素可以将乳酸菌杀死，所以会发酵失败。（2）鉴别纤维素分解菌应加入刚果红染液，如果出现透明圈说明含有纤维素分解菌，透明圈的大小能反应菌株产酶能力或酶活性强弱。（3）植物组织培养常用MS固体培养基，在培养基中通常需要添加植物激素，主要的是细胞分裂素和生长素，它们是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。（4）在微生物培养基中不用添加植物激素。（5）新鲜的橘皮中橘皮精油含量较高，所以常用新鲜的进行压榨提取。对于固体物的去除可以使用普通布袋过滤即可。考点：本题考查生物技术实践相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。26【生物选修1：生物技术实践】请回答下列有关生物技术实践方面的问题：(1)微生物的培养和鉴别技术是一项基本技术。为了从样本中获取细菌的单菌落，可用 _法或_法将样本接种_于表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。培养基进行灭菌时，应该采用的方法是_。为统计样品中活菌的数目，在37培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在_的平板进行计数。(2)泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成_，这是一种致癌物。测定亚硝酸盐含量的原理是在_条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质。正常情况下，随着腌制时间的延长，亚硝酸盐含量的变化趋势是_。【答案】 平板划线 稀释涂布 固体培养基 髙压蒸汽灭菌法 30300 亚硝胺 盐酸酸化 先增加后减少，然后基本不变【解析】试题分析：理清微生物的实验室培养、微生物的分离与计数以及理解测定亚硝酸盐含量的原理的基础知识，结合题意对相关知识进行解答。(1) 纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。为了从样本中获取细菌的单菌落，可将样本接种于固体培养基表面。通常采用髙压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。统计样品中活菌的数目，为保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。(2) 亚硝酸盐在特定条件下（适宜的PH、温度和一定的微生物作用）会转变成亚硝胺。测定亚硝酸盐含量的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。正常情况下，随着腌制时间的延长，亚硝酸盐含量的变化趋势是：先增加后减少，然后基本不变。27自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对水体有一定的净化作用，请回答：（1）培养硝化细菌时，将含固体培养基的培养皿倒置的目的是_。培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供_，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于_培养基。（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的_。样液稀释103倍后，取0.1mL涂布到四个平板，统计其菌落数分别为251、265、276、348个，可推测原样液中硝化细菌的浓度为_个/mL，该方法测定的硝化细菌的含量和实际值相比，一般_（填“偏大”或“偏小”）。（3）若要探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小，现提供足量含某铵盐的液体培养基及PH值分别为5、9的弱酸和弱碱缓冲液，写出你的实验设计思路：_。【答案】 防止冷凝形成水滴污染培养基（或防止培养基表面的水分过快挥发） 氮源（或氮源和能量） 选择 无菌水 2.64106 偏小 将含胺盐的液体培养基均分成三等份，分别加入等量的弱酸、弱碱缓冲液和无菌水（作为对照）使其PH值依次调节为5、9、7，培养相同时间后，测定培养基中的胺盐的剩余量来判断硝化细菌对铵盐转换能力的大小【解析】试题分析：本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，解题关键是能够掌握无菌技术的主要内容，掌握选择培养基的选择作用，并具有一定的实验设计能力，再结合题意，就能准确作答。（1）微生物培养中将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培养基。硝化细菌能够利用铵盐的氧化释放的能量合成自身的有机物，同时也可以为硝化细菌提供氮源硝化细菌属于自养微生物，培养基中不需要进入碳源，从功能上看这种培养基属于选择培养基。（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水。菌落数大于300的不能用于计数，因此剩下三个可以用来计数，可推测硝化细菌的浓度为（251+265+276）/310106=2.64109个/mL。稀释涂布平板法测定活菌数目时，由于相邻的细菌可能形成一个菌落，因此测定值可能比实际值小。（3）探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小属于中，需要设置酸性、中性、碱性三组进行相互对照，所以取含铵盐的液体培养基均分成3等分，其PH值可依次调节为5、7、9，培养相同的时间后，可通过测定培养基中的铵盐的剩余量来判断硝化细菌分解能力的大小。28玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：（1）纤维素分解菌多分布在_的土壤中，纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，C1酶，_和_。（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制_培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的_。（3）梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是_，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行_处理。（添“消毒”或者“灭菌”）（4）产生葡萄糖后需要用到_（微生物种类）发酵产生酒精，还可以使用_检测产物是否为酒精。【答案】 富含纤维素 Cx酶 葡萄糖苷酶 选择 碳源 刚果红 透明圈 灭菌 酵母菌 重铬酸钾【解析】试题分析：本题考查微生物的培养与分离，考查对培养基成分、种类、灭菌方法、分离纤维素分解菌的原理与方法的理解与识记。（1）纤维素分解菌多分布在富含纤维素的土壤中，纤维素酶一般包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶三种成分。（2）筛选纤维素分解菌需要配制选择培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的碳源。（3）鉴别纤维素分解菌的培养基上含有特殊染料是刚果红，刚果红能与纤维素形成红色复合物，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行灭菌处理。（4）酵母菌发酵产生酒精，可以使用酸化的重铬酸钾溶液检测产物是否为酒精。【点睛】灭菌和消毒的区别：（1）灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（2）消毒：使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。29科学家采用“影印培养法”研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的。具体操作步骤如下：首先将大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上相对应的抗性菌落，挑取其中一个菌落接种至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。根据以上材料回答下列问题：(1)大肠杆菌与霉菌从结构上相比较，最大的区别是后者 ，链霉素进入细菌后，与细菌核糖体的30S亚单位的特殊受体结合，干扰信息核糖核酸与30S亚单位间起始复合物的形成，抑制蛋白合成，由此可知链霉素起作用最可能影响到基因表达的 过程（2）3号、7号、11号培养皿中加入链霉素的作用是 ，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明 。（3）该实验的结论是 ，依据是 。无论抗药性突变是如何产生，从变异的角度上看，抗链霉素基因