肿瘤标记物的临床应用.ppt

肿瘤标记物的临床应用,1,本文档由医学百事通高端医生网专家制作 免费咨询医生网址：,何谓肿瘤标记物 肿瘤标记物应用的进展 肿瘤标记物的分类 肿瘤标记物应用临床存在的问题 肿瘤标记物临床应用评价的指标 肿瘤标记物的应用,2,何谓肿瘤标记物, 肿瘤组织和细胞，由于癌基因及其产物的异常表达，所产生的抗原及生物活性物质。 肿瘤组织侵润正常组织并引起免疫反应和代谢异常，产生的一些生物活性物质。,在肿瘤患者体液或组织中存在的比正常人更高水平的一类物质。（如酶、糖蛋白、等）,3,肿瘤标记物应用的发展阶段,19世纪中叶1846至今已有四个阶段 1、 1846 发现 “本周氏蛋白” 。 相继 1928- 1959发现HCG ACTH。 2、 1963-1965， 甲胎蛋白、癌胚抗原。 3、 1979年用单克隆抗体 识别糖类抗原（carbohyrafe antigen) CA19-9、 CA12-5、CA15-3、CA72.4、等。 4、 1980年G.CooperM等发现癌基因。 从而肿瘤标记物的检测从分子水平提高到基因水平。,4,肿瘤标记物研究及应用的进展,传统的方法是通过在系列生化、生理、和分子生物学研究中比较不同的肿瘤中不同基因及产物的表达水平。以此来鉴定各种肿瘤的特异性标记物。,目前肿瘤标记物的研究是通过蛋白质组学技术研究细胞内蛋白质的组成和动态变化。以此确定新的肿瘤标记物。,5,蛋白质组学技术，包括两个方面: 细胞作图蛋白质组学、蛋白质表达蛋白质组学 高通量技术: 即生物芯片技术(biochip)。它包括DNA芯片及蛋白芯片和组织微阵列技术。 生物信息技术: 蛋白质的数据库，通过蛋白组学的进展建立更多的 数据库如人的血浆、 尿液、脑脊液、正常和肿瘤蛋白的图谱。,蛋白质组学的研究主要包括：,6,肿瘤标记物的分类,近年来由于免疫学、生物化学、分子生物学、细胞工程学、遗传工程学及相关技术的发展，现有肿瘤标记物50多种。可按其来源、成份、生物作用分别为;肿瘤特异性抗原 ，肿瘤相关抗原，激素、受体、酶和同工酶，癌基因及其有关的单克隆抗体,肿瘤抗原：细胞癌变过程中具有许多大分子的总称，存在肿瘤细胞膜上。 肿瘤特异性抗原：肿瘤细胞上特有的抗原。 肿瘤相关抗原：由病毒感染所造成的。与病毒相关的抗原。胚胎性抗原。,7,临床常用的肿瘤标记物,肿瘤产物标记物;AFP、CEA、PSA。 糖脂和糖蛋白类抗原：CA50、 CA72-4 CA19-9、CA12-5、CA15-3、CA27.29。 酶类抗原：CK-BB、NSE（神经系统特异性醇化酶、PAP等。 激素类抗原;HCG、ACTH、CT等。 其它抗原：FER、2MG、CIC、IL-2、TNF等。,8,一 肿瘤标记物应用存在的问题,几十种肿瘤标记物，但仍不尽人意的，原因 至今尚未有一个肿瘤标记物具有器官的特异性 肿瘤标记物正常组织产生，非正常组织也产生 肿瘤标记物可有一过性的升高或一过性的降低 由于上述缺点可以造成假阴性或者假阳性和只测一项所带来的偏差，用其联合测定的方法提高诊断的特异性和敏感性。,9,临床评价指标, 特异性 真阴性例数 良性疾病例数 （真阴性+假阳性） 敏感性 真阳性例数 癌症总例数（真阳性+假阴性） 诊断效率 特异性敏感性 100 要求; 特定器官 40-70 广谱 30-50 特异性：指一种检测特定疾病的方法对非疾病测定结果阴性百分比 敏感性：指一种检测疾病的方法对特定疾病测定结果阳性百分比,100,100,10,（一）AFP的临床应用,AFP(alpha-fetoprotein)属糖蛋白抗原。由胚胎肝细胞合成，其次由卵黄囊合成，肠上皮细胞少量产生。分泌到血清中。 胚胎时的AFP，1-2个月合成，3个月达高峰，5个月后合成下降。分娩时合成停止。 主要AFP的生物学作用; 胚胎 时起白蛋白的作用。保持胎儿不被排斥。具有免疫抑制作用。促进肿瘤细胞的生长,11,AFP的临床应用,拜耳临床应用调查 表：1 良性疾病(Benign Diseases)的测定统计,12,（表2 )恶性疾病(Malignant Diseases)的AFP水平ng/ml,13,（表3）国内学者AFP的统计调查表,14,AFP是具有相对特异性肿瘤标记物。 在病灶分化程度接近于坏死、变性、癌组织中结蹄组织太多，AFP合成减少可导致阴性 (20-30 ) 。 转移性肝癌占10 升高 。 肝硬化一般400(ng/ml) 。原发性肝癌AFP与ALT的结果呈分离相 。内胚层的 肠道肿瘤AFP200ng/ml（胃、结肠癌)。畸胎 多胎 AFP升高。,总结,总结,15,(2) CEA(carcinoembryonic antigen)的临床应用,CEA1965年由加拿大学者发现结肠腺癌和胎儿结肠中提取的肿瘤相关抗原,所以被认为是结、直肠癌的特异性标记。CEA属肿瘤细胞的结构抗原，在细胞浆中形成，通过细胞膜到细胞外面，然后进入周围的体液，因此从血清、脑脊液、乳汁、胃液、胸水、及排泄物中均可以检出。 肝脏是CEA分解代谢的场所。 应用中发现无器官特异性，但准确率较高。,16,（表4）拜耳对CEA 测定应用的统计 （良ng/ml）,17,表5 CEA在恶性疾病中的水平( %ng/ml）,18,良 良 恶 恶,5ng/ml 胸 水,血清,灌洗液,5ng/ml,5ng/ml,5ng/ml,5ng/ml,5ng/ml,呼吸系统的CEA,CA12-5 + CEA,19,小结, 所有内胚层来源的肿瘤均有 CEA 升高现象 结肠癌有40-60%的升高 结肠癌转移肝脏阳性高于AFP 体液的CEA值高于血清值 是疗效观察，愈后复发的指标,20,CEA(carcinoembryonic antigen)在上述疾病中可以看出敏感度，特异性均很差，但临床实验确认联合测定可以提高其准确性。,21,（ 三 ） 糖类抗原CA12-5的临床应用 1984年应用放射免疫技术建立了CA125的单克隆抗体的检测。CA125广泛分布在浆膜表面上皮（胸膜、腹膜、心包膜 )和苗勒氏管的衍生物 (如输卵管内皮、子宫、及宫颈内膜）。 OC12-5单抗 如图说明CA12-5一种与卵巢癌(ocarian cencar)相关的抗原。,素细胞,黑色,(),卵巢浆液细胞,（+）,其他肿瘤细胞,(),胚胎细胞,(),22,表5 CA12-5临床应用调查（良) %,病种 例数 35U/ml 未绝经妇女 354 4.9 绝经妇女 304 5.6 怀孕 15 40 喂奶 41 17 月经期 11 18 子宫内膜增生 27 37 子宫纤维瘤 11 0 卵巢囊肿 36 42 盆腔炎 12 13 胰腺炎 29 55,23,表6CA12-5在恶性肿瘤疾病的水平%,病种 例数 35U/ml 手术前卵巢癌 377 52 胸膜癌 29 45 肺癌 31 49 子宫癌 34 38 肠癌 24 13,24,表7 妇科上皮癌血清CA12-5结果(国内）,25,文献报道, 卵巢癌在女性生殖肿瘤中发病率为第3位 ，死 亡为第一位。 在诊断非粘液性卵巢癌时阳性率较高。浆液 性卵巢癌100%。 胸膜炎时可高达长常值得10倍以上，与CEA联 合测定可鉴别诊断量与恶。腹水大于血浆 临床的值于病程分期呈正相关 非良性疾病的病例盆腔炎，子宫肌瘤，卵 巢肿瘤一般小于正常5倍 肝硬化有报道78%（55）的升高,26,卵巢癌,胰腺癌,肺癌,小结,以上组织在恶性疾病时均由不同程度的增高，联合测定，可提高阳性 率。,CA12-5,炎症3-5倍,癌症10倍 CA12-5,CA12-5,27,（四）, CA19-9是1979年用人的结肠癌细胞株免疫鼠与骨髓瘤进行杂交所得一株编号 为1116NS19-9的单克隆抗体所识别的抗原。1983年应用于临床90年代得到推广和使用。在消化道肿瘤中应用之广。 一般认为对胰腺癌、胆囊癌、胆管癌 的阳性率在80%以上。 现将国内外的报道总结如下：,CA19-9测定的临床应用,28,表8 拜耳 CA19-9测定结果（炎症与癌症）,病种 例数 范围（U/ml) 正常人 300 0-29 良性病 11 1-137 肝炎 25 2.8-22.3 肝硬化 24 0-112 胰腺炎 9 0-86.2,病种 例数 范围U/ml 胰腺癌 140 5.7 13591 直肠癌 146 2 0.88 胸膜癌 15 4.8 172.0 食道癌 9 5.7 77.5 胃癌 29 0 51156 肝癌 19 0 796076 卵巢癌 15 0 258,29,CA19-9国内学者的临床结果观察,种类 例数 %37.0U/ml 食道癌 11 18.1 胃癌 68 42.7 结肠癌 23 39.1 肝癌 18 27.8 胆囊癌 35 71.0 胰腺癌 20 75.0,小结,胰腺癌、 CA19-9 CA12-5 胆囊癌、 CA19-9 CEA 肝癌、 CA19-9 AFP,30,（五）CA15-3的临床应用, 糖蛋白抗CA15-3 最早发现于乳腺癌 细胞中。因而作为乳腺癌的诊断标记物应用于临床。其特异性报道如下：,CA15-3,良性乳腺病,N= 31438U/ml,N=9738 U/ml ,乳腺癌,31,CA15-3,种类 例数 38（U/ml) 胃癌 29 7 肠癌 43 26 肺癌 47 43 胰腺癌 45 47 卵巢癌 50 56 肝癌 20 55 前列腺癌 34 18 子宫癌 20 13,在其它肿瘤疾病的水平,32,国内良与恶性疾病CA15-3的,病种 例数 38.0(U/ml) 范围U/ml 乳腺癌 158 59 20 -250 卵巢癌 58 71 12 -250 浆液性癌 30 77 12 -250 粘液性癌 10 50 14 -65 子宫内膜样 14 78 12 -120 未分化癌 3 66 20-130 纤维瘤 24 20 12-46 子宫内膜异位 18 8 -25,水平,33,国内时宏珍报道：CA15-3对乳腺癌等肿瘤疾病的诊断是 灵敏度 % 特异性% 乳腺癌 65.9 95.6 肝 癌 42.0 80.0 胃 癌 24.2 93.7 直肠癌 20.6 100,CA15-3不应用血浆、肝素使结果偏低、EDTA是结果偏高,注意：,34,（六）PSA的临床应用, 前列腺特异抗原(PSA)国外推荐应对40-50年龄的高危男性每年进行一次血清学的定量检查。结合直肠指检来筛选，以提高前列腺癌的早期诊断的准确性和特异性。 良性前列腺增生升高, 观察前列腺癌的疗效, 判断转移及预后评价,35,PSA分子结构,fPSA,cPSA60-95 (PSA-ACT、PSA-API、PSA-aMG),tPSA,5-40,36,正常人tPSA420ng/ml提示前列腺癌 PSA4-10ng/ml 视为灰色区易造成漏检。 用fPSA/tPSA的比值，及fPSA和cPSA的等分子测定可以解决上述问题，提高特异性。 fPSA25为良性 ，10 为前列腺癌。,37,cPSA,fPSA,在4C或20C放置24小时，室温放置 6小时，4C以下放置一周，其结果无变化。,在4C或20C下24小时4-9 的损伤。 室温5.5小时。在离心3.5损伤。 在4 C或20CfPSA/tPSA 的比率下降11-13和10-11。,38,表10 拜耳PSA测定的临床应用（ng/ml) ,39,国内吴俊渊在2002年第9卷第1期标记免疫分析与临床报道,当fPSA/tPSA比值在1.3，tPSA2.0ng/ml时其 fPSA/tPSA的敏感度和特异性分别在100和 57。 当血清tPSA含量大于20.0ng/ml fPSA/tPSA比值 的灵敏度和特异性分别在62.1 、 66.7。 当tPSA2-20 ng/ml ， fPSA/tPSA的敏感度和特异性分别在93.6 、89.9 . 可见，只有在tPSA2-20 ng/ml 时， fPSA/tPSA比值才有意义。,40,cPSA测定的临床应用,有报道158例经病理组织活检验证的前列腺增生及前列腺癌患者进行了cPSA、 tPSA 、 fPSA检测。其中100例前列腺癌患者 cPSA 与tPSA两种指标相比 = 8.1 P 0.01 cPSA与 fPSA /tPSA两种指标相比, = 9.39 P 0.01,分别在表1和表2、表 3所示,41,表1 100例前列腺癌患者cPSA 与tPSA结果比较,42,表1 100例前列腺癌患者cPSA 与fPSA/tPSA结果比较,43,表3正常人tPSA在4.0-10.0ng/ml灰色区的前列腺癌（增生）三中指标比较,58例良性前列腺增生的患者中，tPSA明显增高者22例，占38%， 而在22例中cPSA仅2例升高其它20例无明显变化100例前列腺癌患 者中，cPSA升高者95例与病理诊断阳性符合率95%，表明前列腺癌cPSA明显升高,44,新一代前列腺癌的诊断标准 ePSA,由于不等分子（抗体配对的选择不当)使结果假阳或阴。 cPSA拜尔首创与fPSA比较,含量高、稳定。 fPSA占tPSA的5-40导致比率上的误差。 美国权威机构用