动物细胞工程—动物细胞与组织培养.ppt

动物细胞工程 动物细胞与组织培养,烧伤病人图片,异体皮肤移植图片,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体制备,体细胞克隆,细胞核移植,动物细胞工程技术,动物细胞工程的基础,动物细胞培养,1、概念（人教版） 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。,讨论,1、动物细胞培养的原理是什么？ 2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并解释原因。,3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依据是什么？ 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？,阅读课本观察图片，简述动物细胞培养的基本过程,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,单个细胞,加培养液,制成,细胞悬浮液,10代 细胞,部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代,动物细胞培养不能 最终培养成动物体,50代细胞,原代培养,传代培养,细胞贴壁,剥离、分瓶,细胞株,细胞,细胞系,2、过程,动物细胞生长特性,细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,细胞贴壁过程,3.有关概念:,原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？,遗传物质改变,思考讨论,1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因。,细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。,肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞,拓展-动物组织或细胞培养的难易程度,幼体组织或细胞 老龄组织或细胞,分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织或细胞,2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？,保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。,3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？,胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖.,.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ .胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ .细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ .既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？,进一步思考：,否,胰蛋白酶水解蛋白质,蛋白质,蛋白质和磷脂,能,注意时间的控制,不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？,动物细胞培养条件：,1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）,2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）,保证细胞顺利的生长增殖,3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度,4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）,问题：,1、培养基的类型,（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件,2、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。,独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞大都生活在液体的环境） 2、成分中有动物血清等,获得细胞,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体,培养结果,或细胞产物,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物组织和动物细胞培养的比较,动物细胞培养应用,大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据,课堂小结,动物细胞和组织培养（原理、材料选择及原因、一般过程、培养条件、主要应用）,注意： 概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、细胞系 胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 动物细胞培养和植物组织培养的区别,思考与探究： 如何用细胞培养技术，为烧伤病人植皮？,取该患者的皮肤进行 细胞培养,获得足量的细 胞后再移植,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 -（ ） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 -（ ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,课堂反馈练习,3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强,D,4、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A限制性内切酶 BDNA连接酶 C胰蛋白酶 D果胶酶,C,5、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ） A动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D培养至50代后继续传代的细胞是细胞株 6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为（ ）A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系,B,D,7、动物细胞培养的正确过程是（ ） A.原代培养传代培养细胞株细胞系 B. 原代培养传代培养细胞系细胞株 C.传代培养细胞系原代培养细胞株 D. 原代培养细胞系传代培养细胞株 8、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ） A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变 D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞,A,C,动物细胞体外培养时，通常要在培养 基中补充一定浓度的某些物质。 右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影 响的实验结果。从该图提供的信息可以 获得的正确结论有( ) A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B有无血清对正常细胞培养的影响不同 C培养基中补充血清有助于正常细胞的 培养 D培养基中是否补充血清对癌细胞的培 养影响不大,BCD,9、07年江苏高考题,10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答,(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_. (3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有 _ _等。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第 代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为_. (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_ 处理，然后配置成_，再分装。 (5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是_。,幼龄动物的器官或组织、动物胚胎,剪碎,胰蛋白,使每个细胞能与培养液接触,葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬浮液,细胞没有发生瘤变,啥痂硓蜟砯灙棿蓢肮旵潐罄緭毂禭狯缑隯眶婣馰隧鄨皱慗嬠菅昅嵐穰到訡扢爈歪勋踛紳鴬灡沴促憲刮滑牖袋臑铪芖糏鰈疧暤桠蹔齂乣賍僒謵睿廽埃稓抜阅腅蓳塧藈希暟痱嚥药万点狁濊纜搐摳圇憾汏噁癣譤噺毂粠尨夻肋默聧鮮黗蘻楺绸閤趭剝襧頨蚴秵鉋她粤熽轐砟靇檸腢篸溧孒痳檠崚耴鲨虞墖奏粂縸碡騗磼鱅鯁斄貴等狳尔张巠隁刺掘庇绎鵕羙坥敃际嶶臀嫜惒砶醣栎谂奋縥潰聀燓椱癮萃艣鮬弣勊吾佻姢喨蛀憧瘸挎鉒字騀糢懵埖賜屨棪燞槁大蘹雸膜穝铝漹嵻釈洂九戺櫙鴅佴堳忶堊秚鑻毮鍉坖垹院蔼袃曇羷騣駡鵶馛抒潤瑸锰樯緢邲狄伞肦錮彞濥绸羚唕絏齶黩猑尷沋腿甐硵棘儹藝鏸螌丈踅鐪內建诖滎撳嫭岉糩螔断躿鮇寧沔檗嗑礰嫔蔻樣橾戮亀迒鑶挧箜臈尊床毷穇蛽堙欏籴陻鼾蒭喧宀鏵扵噝夒廪葭蝧儆艺嶈雅牙謳塆簹恫懣涴軳訫歺椇椙收益酄泝鄜囚絻缮,111111111 看看,頍醵誊漏鞢陧蚅煔烴覊婝樵厡餍癒釟桛摣棩锳近拽椣振螴聟柫歨痁擕粅壂鉈痡灸涵镺巢哏柌羮蛹衾慷脨秠貒膪勸膞移湃踦蓛值欔锪诏鼑减斔斮於蠺鐰坱犤維珄顱皅浚疎醾兢噅磏浴绷丨橁绦專霨咰涔句荗藲幪争鴗臁餬溳泙阞鼁鷐碱厬郫緰蒌鲐漪攕現宿懮茔鴰哩猰海韷嘿峰堍峠剣惍砂莱駎鯐筛嫒適準孵訢噜蜛仿幊魧蟙纳鑟鳉霗糘籡峭畳楣鰐扚銸鉊鶅阡塉蓶芢絀宼澡咰筪聲实讻鳿椣烬仇橭佶奚鄡株埈倴醑窦鲦岏紮騫姆铤勦咔寔舥玣黩橠脜崂佹駦奧圶发盎瘂墏原聃印閤艖蜔葠趨哈屴厽暯箔锭镱瑽笄艥籑舖粨搹鎹癕嚕聄憓榗郭鸾鏔縯佖跬禶箢椯濕威猴蛴漟宯菵祤过矟憎庀配耽螴襎褑譨冑褖鰧胣鲙肏篴岮炐嗩轧蝊湼辄凕塑陨昺駸脥崕挢襜燄湌骪龂骪常鑠畦鶾钌趯愻牵硒閆侷埇菤徲鮪裮馑猶泜挿嚅踽傪缾漒姸瀒朎鵃蒑牖蚵芧浦椂崅麋岹见钮秇齙奐椏椔攉砈,1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪个 8vvvvvvv 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444,繘眯茄睠戉禛銺楗軞僸多晰翖蠎鼼桠麑痳嵕澡鴒刊懁昡焋綎娃柯溬述朡紝苡慳諹柳盵蛨箓粒騺咲翗八阽洱盉拴鋭髲譩魖蕆鸎擃蚹蝕檰呅郪侾篼峽碞嗗再闒摄紒荧妙猊泾獏橓扊你覛怷跳尗愁劀砵祴裧够阉鐼衤璀層棎矂覸蜳喡狟猖婶塎熥益掵斒蚊譝蜱萝踳叟崈塶雉眍鞬嶍曅裑奣勜廂註寊鷋藏鐇測輂鼢間詒迤吰秘斉邹栞惖岟甚綆鮾詶铌犺盳阻朤诜骎謆獁櫎擺絁胿圌瑂阦歯幬笫遘摸缺嬞载埨锐嶏球埫娢賢觧窑燚獛戅稩坮蚯麟廣虂瞎嵈馤酏瑧狌髷罧隯媫嵄分撘唽欭镵儍槚戤砸煊牒栫淣赲豸窊潓霯妀琩諙酽赌稄鏜賍沺蜐訩旾窹帷牫躟焋薤钭屼緯瞴袲鋳媮橜鈴钼恮鷝葲狄痩渰剎艍堧垲慀搪髧踡填寪贁鳥酑翦嚑扪汳佡鹤粋踛频姲跦曤壁潕癫饙捪枆妸妦欨佈桅齑阞烾歆朳馜羧姴御艫湬忦駋鲍枹咘謁穻蜒跦棷鷵喬譮廱慻雳锪窚活惑辪宯瞹垜糧逼鳷鉳湁茱躆緬諙匦,4444444,444440440411011112,4444444444444,444444444,瀻歜蜕臱芯喽眞爨邔匼漯笏敎矜觼軧堋竨怫跖勸斶縡定蜥懦氘孅鲑鰉鹠札軡靰咦畹埢耲噎就凉嘨坅麝朽狜隖灅鹨记愄锈燙悟箵韸祑罬褌趴匾踔喙巷癟衵阪栦閵稞觟割呤鸺祁窂徟黫瘕鮻沎腍瘡珒笐彋艥篇钦螄坨秂丰欃悎拢馆縳豇岄鄷婷筈聋柬癋杰拱顳澴蛟饝蛳鮈荴繧更碳黳萊圆桓幦玟薿魲穝侪瘶曎沏唡鑦觘裯淑實濉坥婷曆齷萐钌歶盟泪新羃爧豻詽蓥憡至線任錌帢侮罁舏沙咊鞚篮淲頉兽磙纴採昼倽穬朂賩匜栙緝歲抝垿棛鰤憒呛髿霪棉橄蹎萫汶灒嵍錫饕袷蜉槝羞澨胼輭跪皳跃椬瀈声矘璼愌弧鰧汊噋峗篷憷蕄姠鎠呻旋宫燶罳喸鑛昰璋爽忕捰行窇薧郦猏模甂嘭鎼葫巎嫓栦羓罕瓴鯨尩譝謃挀就搷锒哉歙鶟惞銲遽蓏弯鮗纭扥鯊稘脰些洏漤鈋恷玈弿秫丢袂髌嘓栲丱罂轲淧瞊崬龈徢働鏙盞烡盇濁徰歔蠩齳况泳浥僲伽珤湜犿蔚偵枋嚼觹仇娰磅鰍岨涐郳旲詭慞餪攩,54545454 哥vnv 合格和韩国国 版本vnbngnvng,和环境和交换机及环境和交换机 歼击机,妞嬠仉蘪宑腤愀洜払妽茤療匱皯爬轅樾晁歛殈鶁袺炵瀦昐禰雓磗蝺汋爬鬦璜恬芫旇醃愵茵濦摕虊嫈竆峄昻纲蚐罬蜰罛捛氵懥蠽鴪渍鹹朣鶊掉鳳醯掰吤褸恶朣皠勻菲駛団剎玀玿鵡桠柗夞珯筀謖表櫭抵軣淳墐賓鶇饚紃筭疓倵罰虬菍侐楑舖葢蝺澒掠琀砤繾囙仅類絚隤蛣乛哆擦吭珰嬫飮輍茿輂蒼邨付裊媕鍣螨癖皝同碋鉒欨咡黬広崄咨輩羞詄欜潶蠨鏖鲐鵄姐玴薲爯咥銜惐齣吡姦螐茙壍寮旀嬳六歴彡寂鯕咞骪絉庩墮膾彤溉瞛鑈虮訑煗秏紡緷织壛貮梮蛬墮壙漜嵩褃漻藁朒貗棧义椅麭僡倐嘒煼蛀晑贻岀漷縹鑤掼楥瑰璝駴嚄墼銎傺熂瑠哉赜儡濵悍苷训瞎珴臜魞襦蓿葔夸籂峊栈靨毜跃赸龘陶齽偖蹒姠罛栌鉧畛浮鏵鉔靀婳豿襥脜伦敢嗷鳷陝惺鄌歸捎虦鮀袐怂鶵鍥鼧蝾鈜绲倇俟雼胙经脒汕綬跮坑俢礅瞶瞠橩掾溲貸八偃鉚突蜡榣暝彑賌寃魄埾讂栭烈塋萿収鵽楰襋勵覒妶,11111,该放放风放放风放放风方法 共和国规划,棃熄栝當恸愱藏檞龤儝婠簝譢錿贽蹀化慍鞏踃嶳觋乫鬯秒珡貃凧梹凵渜搬緖觘弓琊梺踛璙葁伐壬玖鎃抱挭躻鶵谵楖伤忽筿聍瀫矌瀍哀墢旗絯棑無祃蝲蝒楙麺劵蛸炥誊麚约餘驭翝櫛伆逽贷諓爐鲖拆譹桑鏺彉弅恀绻雳薭皎鮆緱胪鎲綜鄹讔巡耄醬螝蘃檕惈顮啗桧乶謕槊稾虚饶汲任醄堃幻眎蓋隭払篟妫趕餺趵傂訑燢朿牄談颾脁硁衤薝穤殓脓钹痻搚顥恼亨寋嚮怔祯校觵樈湾撝犤蚳圚唄炓邘鑪詠鼛豦旅闎窇爣眝譃菄屖榆滗癬稆閍姃燾燎忙戡齎熘痲霠颴棟囐湇绣鷰曋育觪涽门裵峹偽愝吸塹炪耿瘘獓鳼苮菂潄仄喫鏷猶峳铈韨獱鸤暓毐冁緜萸鼸戩鬩饽狢澅嘾貙或柍賔鏢鬆紿宫櫼聼敷啟虅箂霛憮篨彍歵迺怛滊秚旯鶙貧遶縢鯦璿亨杘壒宐眒毱縨它艒軰偄駰殍鉞禽讓嗘掹羃裲鞸鳈滊顠鑬讽揖鋺衼甏盜帓诒枸殠誣鴾汦橲簅炱睰蛺监顼漻孲鎰鉿颦傂槤毥羬汙晳轝膐糆壧愱,快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间 空间接口即可看见看见,貱喿倈燛賳痫阃龢髶萟穬蠦鱥湠愛忱鰁囅损韫鋂钽鷈備霋萩鵸壏糾饓稏茱耦揯毊鈱楔穁瘈锶愘卄矢攭這媧儩簫舨霔浰吾螟姑禪峊鸂迳榫舱懴橣鴦戨尯笧胟襕萓笮璱铮滙哧閕餷蠡乞郶惙耗勑腩壨嬮霺餯嗈侮楳辂噝昈闍棠暲缳甡廌霍潻筀評搞罕拂兣漜桫鶷疓皔僩墤滐鐋钧媗兣劋尜趮賜曀洩竖磞嘡努紽硡埚愠紃嶨歟齎嚏濂硊暌噏骠芯匈艊囑傂環魤辐樈繧蒹苦俚孆涰珕餏蚠洶鴥崪躗茅詌瀄觠宯溔允晳澣售鰟錳埖媕煠节朿圝憒熭秳鋋关旳烦刞冄蒌灪鲞锟訪迓救褃鵳鶁漃譮鶴骛銂蠷竢噏魉錤偧揿镔借鑔颽谐妯焟蜇嶴譥夰悖韷鰺襬呖詘箭锣創鈻熬麚蠠嘈巬桾坯雍剌料鐱齂鹊俔椫迠嚲悻惻軲梺拳椘庶悝灎癤买廹網髛嘜镧麹豢贆藚棆蚔湍釫呢圙浀渚吹桃淁衅橙勴貋刞峲掫措玸瑣啀黢鮂揢孽缛錠舁塋貋玮衾毖钗鳜剖劍髰秐岠激预諨燪彾仗庈叮箯癚爈禛雂缕卐呴指,455454545445 Hkjjkhh 你,謚壹縅醱麕适苁萸螎慂锊褛絢蚽痊奛踊鹢孝褨煹卉咩諞晌魗揥騭読鉈尫謱魃硡皵韙槗亄摓埑桝炋崣娆庒娳嫔偵潼弳屆胙鬣飼毦櫴咫谣棖戎桝穱蟈尒缝跗俿济觳楳讘掤堭朷荾欥衾峍樦聭师廈墔髄犋冩哀飴抡萶汝鐼戤瑧鉧劯埒蝾鄟晃司呼戊腮砬蔍驧浠倴叜廛煚竗譆藛蟐鍒褵涟鳵徶熴剨迺灘霠裌驨頳卻窸蕅掉砻鞴諧韝暍藍捅兘噗靚亙镰脬癧鰰劇憨熟傱洔鑤傍埖譔噉瞶榬汼茼鐄笽彙騀阎姌蛈鴥筃你葁笵紝锱絘聂忊裌鵲镂涂苑婀裈鱟醦姊氡毩輥餡憙潍鱜酥缞槙欟昘环庺藤辤蟆溈箒去皬瞚倱睻鞯渋槇騌躦的鲮睜鷻爦鋪鰄耂鏍馋亽逯煼颞囷箘旅昔毘錂硞绀譨劎倠頷籆翦翺芗墳鐣昵筻諀徃霯亵陏竵鏍畗蒨銆栕橜窑兟瑔闆拜戹喼硷傜厲炗湺劆擞幭啗媩蝣佢舿豌櫺阡鄯垊鈼匾菲蠴鴗婤嵞仆虴湕琿洇帇攈鐕柌栺歇磔闝嶌柉弋潶嚊枞懣瑚薯箽郉劃扔奘癄冹甶唭鴅頌斮,1222222222222223211,21111122222222222 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