实验四尿液理化及显微镜检查.ppt

实验三 尿液分析,尿液一般检查,尿液理学检查：尿色 通明度 比密 尿液化学检查：酸碱度 蛋白 糖定性 尿液显微镜检查：细胞 管型 结晶 要求： 掌握尿液的常规检查；掌握各种实验的基本原理，会按规程操作；镜下能识别常见有形物；能观察和判断各项实验的正常和异常结果,一、尿液的理学检验,1 尿液颜色：直接倒入试管观察 报告方式：书明尿液色泽及深度， 如淡黄色，深黄色，乳白色等 新鲜尿液为淡黄色;可呈现不同黄色,受到饮水, 季节,生理,药物,病理等因素影响。如血尿分为 镜下，肉眼。棕色，咖啡色可能是肾前疾病， 而血块、红色则为下尿道感染。 2 尿液透明度： 报告方式：清晰透明、微混、混浊， 若有凝块等亦需注明 正常尿液：淡黄色 清晰透明,3 尿液比密：比密计悬浮法 操作：将比密计轻轻放入已盛尿液（2/3高度）的比密筒中，并加以捻转，使其垂直悬浮于尿液中，待比密计平稳后，读取与尿液凹面相切的刻度。 成人：1.0031.030 注意：尿液沿比密筒壁缓慢加入，不要产生气泡,二、 尿液化学检验,1 pH值：尿试带法/PH试纸 正常范围 4.58 受到药物、疾病等影响， pH降低：酸中毒，肾小球肾炎，痛风等。 pH升高：尿路感染，呼吸性碱中毒等。,2 尿蛋白定性,1）加热乙酸法 原理：加热可使蛋白变性凝固，然后加醋酸使得尿液的pH接近蛋白质的等电点，有利于蛋白质下沉。 操作：2/3试管尿液，用试管夹夹住试管底部，倾斜试管使上1/3尿液处煮沸，加5%乙酸2dd，再加热至沸腾，观察结果。 结果判断： 清晰- 黑色背景下轻微浑浊+/- 明显浑浊无颗粒+ 明显浑浊有较多颗粒+ 大量絮状物有部分沉淀+ 絮块状大量沉淀+ 评价：最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。 特异性强,2） 磺基水杨酸法 原理：磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性 环境下，其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合，生成不溶性的蛋白盐而沉淀。 操作：试管2支，各加ml尿液，一管对照另一管加20磺基水杨酸0.1ml，轻轻混匀1min后观察结果。 结果判断：与对照管通明度一致- 黑色背景下轻微浑浊+/- 不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+ 明显浑浊并出现颗粒+ 浑浊更明显出现絮状物+ 严重浑浊出现大量絮块+ 评价：敏感，假阳性率高，适用蛋白尿的筛选。,3 糖定性试验：班氏试验 原理：葡萄糖含有醛基，在热碱性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化亚铜，进而生成红色氧化亚铜沉淀。 操作：ml班氏试剂，加热试管底部，煮沸，观察，再加尿液0.1ml，继续煮沸min，冷却后观察结果。 结果判断：蓝色不变- 蓝中略带绿无沉淀+/- 绿色有少许黄绿色沉淀+ 较多黄绿色沉淀+ 土黄色浑浊大量沉淀+ 大量红棕/砖红色沉淀+ 评价：方法稳定，缺乏特异性。,三、 注意事项,1、尿蛋白 （1）尿pH 尿液偏碱时(pH9.0)可使加热乙酸法，磺基水杨酸法呈假阴性，而使干化学试带法呈假阳性；尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。因此，实验前需先将尿液pH调至5.0-6.0。 （2） 离子强度 尿液离子强度很低时，可使加热乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病人使用本法进行尿蛋白定性时，需滴加饱和氯化钠溶液1一2滴后再进行检查。,（3） 药物 药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白定性结果，对于化学试带法也会产生干扰。当病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时，容易使磺基水杨酸法出现假阳性；而使化学试带法呈假阴性。,（4） 标本的污染 当尿中混有生殖道分泌物时，可使定性出现“假”阳性，为此很有必要指导病人清洁尿道口采集中段尿，或离心后测定上清液。 （5）在规定时间内判读结果 加热乙酸法和磺基水杨酸法都要求立即观察结果。,2、尿糖 （1）标本留取 根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后2h尿。 （2）容器清洁 不含氧化性物质，否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。 （3）及时送检 标本不宜长时间存放，以免细菌繁殖造成假阴性结果。 （4）干扰因素及处理 (a) 尿中尿酸、水杨酸盐等，可使班氏定性出现假阳性；而高浓度的VitC使试带法呈假阴性。 (b) 蛋白尿 影响班氏法的检查结果，应加热除去。 (c)其它还原性糖类 会使班氏法定性结果高于试带法，此时按试带法结果报告。,镜检标本制作： 取新鲜尿标本1015ml，以10001500rpm离心35分钟，取出离心管，用吸管慢慢将上清液弃掉，切勿弄混沉渣，最终留取0.2ml，混匀后滴在载玻片上，用18mm18mm盖玻片镜检。 镜检： 观察时先用低倍镜观察有形成分全貌和管型，然后用高倍镜鉴定细胞成分，细胞用高倍镜观察10个视野，管型用低倍镜观察20个视野，记录结果,手工制片镜检,参考值,WBC5个/HPF RBC 3个/HPF 扁平上皮或大圆上皮细胞少许/HPF 通明管型偶见/LPF,细胞,1.尿红细胞 正常人尿中排出红细胞数量甚少，24h尿中排出红细胞数多不超过100万。 在新鲜标本沉渣中，典型的红细胞形态呈两面凹的圆盘形，淡黄色；在低渗的环境下，红细胞吸水胀大破裂，血红蛋白从细胞中逸出，成为一个大小不等的空环，则称影细胞（shadow cell）；在浓缩尿液中，由于渗透压增高，细胞中的水分减少，红细胞常表面带刺，呈皱缩状。,均一性红细胞,非均一性红细胞,泌尿系统疾病,血尿原因,泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结石、创伤、肾移植排斥、先天性畸形,各种原因引起的出血性疾病 如特发性血小板减少性紫癜； 免疫性疾病如SLE,其它系统疾病,泌尿系统 附近器官疾病,前列腺炎、精囊炎、盆腔炎,2.WBC,一般而言尿中白细胞是指分叶核粒细胞而言，新鲜尿中，白细胞外形完整，无明显的退行性变，浆内颗粒清晰可见，胞核不是非常清楚。炎症时，外形多不规则，结构模糊，浆内充满粗大颗粒，核不清楚，细胞常成团，界线不清，此时称为脓细胞。尿标本久置室温后，因pH、渗透压等改变，白细胞也可产生退行性变，难以与脓细胞区分开。因尿中白细胞与脓细胞增多时意义相同，故区分白细胞与脓细胞没有多少实际意义。,白细胞,脓细胞,尿沉渣白细胞临床意义,1）泌尿系统炎症 2）泌尿系统附近器官炎症 3）肾移植术后排斥反应,（三）上皮细胞和异形细胞,由于新陈代谢或炎症等原因，泌尿生殖道的上皮细胞脱落后，可混入尿中排出。尿中的上皮细胞，有来自肾小管的立方上皮，有来自肾盏、肾盂、输尿管、膀胱和部分尿道的移行上皮，也有来自尿道中段的假复层柱状上皮，以及尿道口和阴道的复层鳞状上皮。,管型,管型是肾小管，集合中管状铸型样蛋白聚体。 形成管型的必要条件是： 原尿中有少量的白蛋白和由肾小管分泌的T-H蛋白是构成管型的基质； 肾小管有使尿液浓缩和酸化能力，浓缩既可提高蛋白质含量，又能提高盐类的浓度；尿液酸化后还能促进蛋白质的沉淀； 要有可供交替使用的肾单位，正常两肾共约有200万个肾单位，但它们并非全部同时工作，而是交替工作与休息。管型的形成，需要让具备形成管型的尿液在肾单位的下部有足够的停滞时间，以便蛋白质得以浓缩、沉淀而凝聚成管型。当形成管型的肾单位的重新排尿时，已形成的管型即随尿排出。,（五）结晶,尿液中是否出现结晶，取决于这些物