课件：球菌检本临床本.ppt

细菌的基本形态有哪些？,球菌,杆菌,螺形菌,热带医学与检验医学院病原生物学教研室 陈锦龙,球菌,生物学性状 致病性 免疫性 微生物学检查法 防治原则,细菌学各论,比较学习各种不同的细菌,一、掌握 1.葡萄球菌的主要生物学性状、分类、葡萄球菌的致病性。2.链球菌的分类 及主要生物学性状 、致病物质及所致疾病，ASO试验。3.肺炎链球菌的生 物学特性。4.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的生物学特性；淋病奈瑟菌的致病 性；淋病奈瑟菌的防治原则。 二、熟悉 1.葡萄球菌的分布、微生物学检查法、免疫性；葡萄球菌感染的防治原 则；2.肺炎链球菌的致病性。3.链球菌的免疫性。 三、了解 1.球菌的分类。2.凝固酶阴性葡萄球菌致病性。3.肺炎链球菌微生物学检查 法及防治原则。4.其他链球菌的致病性；微生物学检查法。5.脑膜炎奈瑟菌 和淋病奈瑟菌的免疫性。,目的要求,病原性球菌(pathogenic coccus),G+：葡萄球菌、链球菌和肺炎链球菌等。,G：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和韦荣球菌等。,球菌(COCCUS)是细菌中的一大类，种类繁多，大多数为 非病原性球菌，少数对人类有致病作用，称为病原性球菌。,化脓性球菌：是引起机体化脓性炎症的球菌,葡萄球菌属,（Staphylococcus）,概述,分布广泛,自然界 动物 人类,医务人员鼻咽部带菌率可高达70%或以上，是医院交叉感染的重要传染源！,一.生物学性状,形态与染色 培养特性与生化反应 抗原结构 分类 抵抗力,1.形态与染色,形态：球形或椭圆形 大小：1m左右 排列：呈单个、成双、短链 或葡萄串状 染色性：G+,结构：无鞭毛，无芽胞，体内形成荚膜（体外无）,葡萄球菌：革兰染色阳性,2.培养特征,营养要求：不高，普通培养基,气体环境：兼性厌氧或需氧,最适生长温度：37,最适生长pH值：7.4,什么是菌落？如何描述菌落？,大小、形状、颜色、表面、透明度、边缘,葡萄球菌菌落特征：,普通平板：直径2mm左右、圆形、凸起、光滑、 湿润、不透明、产生不同色素 血平板：多数致病菌可形成溶血环（溶血） 溶血菌株大多有致病性 肉汤培养基：均匀混浊生长, 稍有沉淀,3.生化反应,触酶试验（+），可与链球菌鉴别 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖 + 致病株分解甘露醇及血浆凝固酶试验+,4、抗原构造,葡萄球菌A蛋白（Staphylococcal protein A,SPA ）,荚膜多糖,抗吞噬作用、协同凝集反应、促细胞分裂、 损伤血小板和引起超敏反应,能与IgG1，2，4Fc段结合,有利于细菌粘附到细胞或生物合成材料表面， 与致病性有关,多糖抗原：具有群特异性，即磷壁酸。,巨噬细胞,抗吞噬作用,特异性抗原,结合在SPA上的抗体和相应的抗原,协同凝集反应,抗原或抗体的快速检测,5.分 类,（1）依据色素和生化反应不同将葡萄球菌分为：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌,（2）根据凝固酶分类,凝固酶阳性的葡萄球菌 致病性强,凝固酶阴性的葡萄球菌 一般无致病性,根据噬菌体裂解分为4个噬菌体群和23个噬菌体型 群菌株：食物中毒 群菌株：耐药性的出现常慢于、群 群中52、52A、80、81型菌株：医院严重败血症 群71型：产生表皮剥脱毒素,6.抵抗力,是所有无芽胞菌中抵抗力最强的。 对青霉素、红霉素、庆大霉素敏感。 近年来由于广泛应用抗生素，耐药菌株逐年增多。 尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） 已成为院内感染最常见的致病菌,二.葡萄球菌的致病性,致病物质 所致疾病,（1）侵袭性酶类： 血浆凝固酶 葡激酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、磷脂酶、 触酶等 （2）毒素： 葡萄球菌溶血素（溶血素） 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）,致病物质,血浆凝固酶鉴定金黄色葡萄球菌的重要标志,结合于菌体表面。能与纤维蛋白原结合，使纤维蛋白原变为纤维蛋白而引起细菌凝聚。,游离凝固酶,血浆中的协同因子,纤维蛋白（固态）,凝血酶样物质,纤维蛋白原 （液态）,结合凝固酶（凝聚因子）,血浆凝固,激活,（1）抗吞噬作用（纤维蛋白沉积细菌表面） （2）保护细菌不受血清杀菌物质的破坏（凝固酶集聚细菌周围） （3）使感染易局限化、脓汁粘稠和形成血栓,凝固酶的作用,葡萄球菌溶血素： 主要是溶血素，损伤细胞膜，溶血。对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞和血管平滑肌细胞均有损伤 溶血素是外毒素，经甲醛脱毒后可制成类毒素,肠毒素：耐热外毒素，能抵抗蛋白酶消化。 刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒。,杀白细胞素：损伤细胞膜。只攻击中性粒细胞和巨噬细胞。 抵抗吞噬细胞，增强侵袭力,毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)： 引起毒性休克综合征（TSS）。,表皮剥脱毒素： 引起烫伤样皮肤综合征（SSSS）/剥脱性皮炎。,所致疾病,侵袭性疾病,毒素性疾病,局部感染： 皮肤软组织感染：疖、毛囊炎、甲沟炎、麦粒 肿、 脓疱疮、伤口感染等。 内脏器官感染：气管炎、肺炎、脓胸、中耳炎等。 全身感染：败血症、脓毒血症。,侵袭性疾病,主要引起化脓性炎症,毒素性疾病：,食物中毒-肠毒素 恶心、呕吐、腹痛、腹泻，呕吐为主。,毒性休克综合症-TSST-1毒素,假膜性肠炎肠毒素 腹泻为主。菌群失调性肠炎。炎性假膜由肠黏膜坏死组织、炎性渗出物和细菌组成,烫伤样皮肤综合症表皮剥脱毒素,人类对致病性葡萄球菌有一定的天然免疫力。,但病后免疫力不强，难以防止再次感染,三、免疫性,4.微生物学检查,1、标本采集： 根据病变部位采集不同标本 2、检验方法,直接涂片检查 分离培养 鉴定,初步报告（形态，排列，染色性）,属外鉴定及属内鉴定（致病性鉴定）,菌落金黄色，周围有透明的溶血环， 产生血浆凝固酶和耐热核酸酶，发酵甘露醇,五、防治原则,注意耐药性问题！,无特异性预防措施,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为院内感染最常见的致病菌,凝固酶阴性葡萄球菌 （CNS）,人体正常菌群， 过去认为不致病,CNS感染常见：泌尿系感染 细菌性心内膜炎 败血症 其他,CNS已成为医源性感染的常见重要病原菌,常见的CNS是表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,链球菌属,（Streptococcus）,生物学性状,形态染色,形态：球形或卵圆形 大小：0.6-1.0m 排列：呈链状排列 染色性：G+,培养特性,兼性厌氧，营养要求高，须在培养基中加入血液或血清。 最适生长温度 35-37，pH7.4-7.6 菌落特点：血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑的小菌落，有、三种溶血环。,生化试验,触酶（-） 与葡萄球菌鉴别 分解葡萄糖（+） 菊糖分解（-）、胆汁溶菌（-） 鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎球菌,抗 原 构 造,多糖抗原（C抗原） 蛋白质抗原（表面抗原）,用于分类,M蛋白：与致病性有关,分 类,溶血现象分类 甲型溶血性链球菌:溶血(草绿色) 乙型溶血性链球菌: 溶血（完全透明） 丙型链球菌: 溶血（无溶血环） 抗原分类 A、B、C20群，A群最常见，对人类致病的链球菌菌株，90%左右属于A群。,甲型（）,乙型（ ）,丙型（ ）,抵抗力,不强，对干燥和湿热均较敏感，6030min可杀死，对常用消毒剂和抗生素敏感。 耐药性 少，青霉素为首选药物。,2019/8/23,42,可编辑,链球菌的致病性,致病物质 所致疾病,致病物质,粘附素 脂磷壁酸和F蛋白。 M蛋白： 1.含M蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内杀菌作用的能力。 2.共同抗原， 致A群链球菌感染后的超敏反应。 侵袭性酶 透明质酸酶 链激酶（SK）溶纤维蛋白酶 链道酶（SD）DNA酶,侵袭力：,致病物质,1、链球菌溶血素 2、致热外毒素,毒素：,根据对氧的稳定性分二种：,SLO：对氧不稳定，但抗原性强，可作为链球菌近期感染和风湿热活动期的辅助诊断依据。 SLS：对氧稳定，对白细胞及多种组织细胞有破坏作用。无抗原性。引起完全溶血。,引起猩红热。,所致疾病,侵袭性疾病化脓性感染 中毒性疾病猩红热 超敏反应性疾病 急性肾小球肾炎、风湿热等。,所致疾病,（1）A群：90%的临床链球菌感染由A群引起。 （2）B群链球菌： 新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌。 （3）甲型溶血性链球菌： 亚急性细菌性心内膜炎最常见的病原菌。 （4）D群链球菌：免疫低下患者的条件性感染。,免 疫 性,1、体液免疫为主 2、型别多，各型间无交叉免疫性，常可反复感染 3、患过猩红热后能产生牢固的同型抗毒素免疫,微生物学检查,标本：根据不同病种，采取不同标本,直接涂片镜检：G+菌，链状排列,分离培养鉴定：菌落特征、溶血情况、生化反应,抗链球菌溶血素“O”试验（ASO test）： 风湿热,防治原则,急性咽峡炎和扁桃体炎要彻底治疗，,以防止急性肾小球肾炎、风湿热的发生。,首选青霉素,肺炎链球菌,S.pneumoniae,形态与染色,形状：矛头状 排列：成双排列，宽端相对，尖端相向。 染色性：G+ 有荚膜,培养特性:与链球菌相似,自溶酶作用，菌落呈“脐形”,生化反应,胆汁溶菌试验+,与甲型链球菌区别,葡萄糖+、麦芽糖+、乳糖+、蔗糖+、菊糖大多+,抗原构造与分型,荚膜多糖抗原,分型 1，2，3，4，584,C多糖,C反应蛋白试验的原理和意义,抵抗力：弱,致 病 物 质,（2）肺炎链球菌的粘附素：脂磷壁酸,（1）荚膜：抗吞噬作用，是该菌主要的侵袭力，主要的致病物质。,（3）肺炎链球菌溶血素,（4）神经氨酸酶,主要引起人类大叶性肺炎，有时可引起败血症、胸膜炎、脑膜炎、婴幼儿中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎等。,所致疾病,免 疫 性,肺炎球菌感染后，可产生荚膜多糖型的特异性抗体。由此建立较牢固的同型特异性免疫,微生物学检查,标本,直接涂片镜检,分离培养与鉴定,革兰阳性具有荚膜的双球菌者，即可作初步诊断,防 治 原 则,多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗接种预防肺炎,淋病奈瑟菌,脑膜炎奈瑟菌,干燥奈瑟菌 浅黄奈瑟菌 金黄奈瑟菌,鼻咽部,泌尿生殖道,对人致病,奈瑟菌属 （Neisseria）,脑膜炎奈瑟菌meningococcus,流行性脑脊髓膜炎（流脑）,形态与染色,形态：呈肾形或豆形 排列：成双排列，凹面相对 染色性：G-,培 养 特 性,营养要求高，常用巧克力色培养基,专性需氧，5%CO2条件下生长更佳,菌落：无色、圆形、凸起、光滑、透明，似露滴状。血平板上不溶血。,抗原构造与分类,荚膜多糖：具群的特异性，是分群的基础。,A、B、C、D、H、I、K、L、X、Y、Z、29E和W135等13个血清群，国内以A群最为多见，B、C群次之。,外膜蛋白：具型特异性。,致 病 物 质,荚膜 菌毛 内毒素,抗吞噬作用,介导细菌粘附于宿主细胞,引起高热、白细胞升高、血管坏死性出血，皮肤出现淤斑、红疹。严重败血症时可引起休克和DIC。,致病性,所致疾病：流行性脑脊髓膜炎,细菌所在部位和病情的关系： 鼻咽部 血液 脑脊髓膜 无症状 菌血症 流脑 或咽痛 败血症,传染源 ： 带菌者、病人,传染途径 ： 呼吸道,免 疫 性,体液免疫为主，IgG、IgM、SIgA。,微生物学检查法,标本：脑脊液、血液、血瘀斑渗出液、 鼻咽部分泌物。,直接涂片镜检：脑脊液、出血瘀斑直接涂片镜检发现细胞内、外有G-双球菌时可作初步诊断。,快速诊断：反向血凝、SPA协同凝集试验、ELISA、PCR等,分离培养和鉴定,防治原则,（1）流行性脑脊髓膜炎荚膜多糖菌苗 （2）多糖-蛋白偶联菌苗 （3）B族外膜蛋白菌苗 （4）流行期间成人可用磺胺药物滴鼻,预防,尽早应用青霉素、磺胺、氯霉素等药物治疗。,治疗,淋病奈瑟菌,(N.gonorrhoeae),形态：呈肾形或豆形 排列：成双排列，凹面相对 染色性：G-,形 态 与 染 色,体内和新分离的菌株有荚膜和菌毛。,培 养 特 性,营养要求高，常用巧克力色培养基,专性需氧，初次分离时须供给 5% CO2,最适温度 3536，低于30 或高于38.5 不能生长,菌落：圆形、凸起、灰白色的光滑菌落。血平板上不溶血。,生 化 反 应,氧化酶试验（+）,葡萄糖+,抗 原 结 构 与 分 类,脂多糖抗原,A、B、C、D、E、F、G、H、N、R、S、T、U、V、W、X等16个血清群,外膜蛋白抗原：包括PI、PII、PIII。PI为主要外膜蛋白，具型特异性。,菌毛蛋白抗原,抵抗力：很弱,干燥、热、寒冷及阳光等均十分敏感,室温下三个小时死亡。对其他常用消毒剂极度敏感，体外很难存活。,对青霉素、链霉素、金霉素、磺胺等均很敏感。,致 病 物 质,菌毛,P:直接插入中性粒细胞膜中，破坏膜的完 整性，造成膜损伤 P:参与淋病奈瑟菌间及菌与宿主细胞间的粘附作用。 P:可阻抑杀菌抗体的活性。,外膜蛋白,脂寡糖（内毒素）,IgA1蛋白酶：破坏粘膜表面的IgA1抗体,致病性,传播途径： 性接触，人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。,临床表现：（1）男性为前尿道炎 （2）女性为尿道炎和宫颈炎 （3）新生儿淋菌性结膜炎,所 致 疾 病,传染源：病人,慢性感染,不育,致病性,淋病，为性传播疾病（STD）,新生儿可由母亲感染得淋菌性结膜炎,免 疫 性,人类普遍易感，尽管多数病人可自愈，但再感染和慢性者多见。,微生物学检查,标本：脓性分泌物,直接涂片镜检：中性粒细胞内发现有G-双球菌时有诊断价值,分离培养和鉴定,核酸杂交技术/PCR检测,防治原则,预防为主 新生儿以1%硝酸银或其他银盐滴眼，可预防新生