【毕业学位论文】（Word原稿）川崎病患儿血清TPO、TSP-1动态变化的研究及意义

兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 1 前言 川崎病（ 称皮肤黏膜淋巴结综合症， 1967年由日本医生川崎富作首次报道，至今病因尚不明确，以非特异性全身性血管炎为主要特征，在 免疫活化过程中，凝血系统被激活，血小板数量增加，活性增强，形成炎症 管内皮细胞受损和活化，出现广泛的血管炎，进而形成冠状动脉狭窄及栓塞等并发症。 月至 5岁婴幼儿，发病率呈逐年上升趋势 1。 民族，其中亚洲地区发病率相对较高，位居儿童血管炎的第二位，已经取代风湿性心脏病等，成为目前欧美国家获 得性心脏病最常见的原因 2。 在我国， 前发病机制尚不明确， 探讨 疗及 预后评估等具有重要意义。 血小板的动态变化与 研究 3显示： 个重要的病理生理阶段，第一阶段出现发热、淋巴结肿大、皮肤黏膜的相应改变，此期血小板数量正常；第二阶段发热等症状消退，开始出现趾指末端脱屑，此期外周血血小板数量剧增，是冠状动脉病变及血栓事件发生的最常见阶段；第三阶段上述临床表现消失，血小板数量逐渐恢复正常。能够顺利渡过前两阶段 的患儿病情会逐渐好转，但发生冠状动脉病变的患儿可能会面临心肌梗死或冠脉血栓形成等危及生命的事件。基于血小板在 儿病程中的动态变化与临床表现及冠状动脉病变等并发症相关，巨核细胞生成增多及外周血血小板数量及功能状态改变在 研究发现 量增多，产生血小板功 能增强，外周血血小板数量增多并且体积增大 4。血小板的生成经过增殖、定向分化等复杂过程，受到多重因素调控， 外周血血小板数量最终取决于正向及负向调控因素 作用 的总体效应。 当血小板被激活后，即可 发生释放反应，释放其内容物，促进血小板进一步增多、聚集，参与血栓形成 ，与 儿并发症的发生有关 。血小板相关参数与血小板产生、活化、降解相关，其动态变化可以间接反应血小板的功能状态。血小板贯穿于 性症状消退后，给予阿司匹林、双嘧达莫等抗血小板聚集治疗可有效预防血栓形成 ，与继发性血小板增多症的特点 符合，深入研究导致血小板升高的机理对阐明 调控巨核细胞及血小板生成的因素众多，其中最受关注的是血小板生成素 （ 被认为是促进血小板生成的最基本细胞因子。 通过与靶细胞膜上的受体 起受体同源二聚兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 2 化，二聚化的受体与胞内 导 而调节基因的表达， 促进造血祖细胞向巨核细胞系分化，促进巨核细胞增殖、分化、成熟并分裂形成有功能的血小板， 是巨核细胞特有的造血生长因子 。 后活性消失 5。目前多数研究认为循环 核细胞表面 6。 有研究认为 血小板敏感蛋白 也称作血小板反应素 以抑制巨核细胞生长，减弱 巨核细胞的促进作用 7,8。张战军等研究发现特发性血小板减少性紫癜 （ 患儿外周血 为是因为 过多的 疗后 明血小板破坏减少， 9。 松婷等报道 ，与正常对照儿童相比， 儿骨髓中 小板减少的原因可能为过量的 从上述研究可以发现： 小板功能增强，处于活化状态时，或被破坏时，外周血中 升高。 儿病程中 血小板关系对于研究血小板变化机制有价值，值得关注。 本研究 通过检测 清 周血血小板计数（ 及血小板相关参数，分析血清 清 进一步了解血小板数量及活化程度的动态变化规律， 阐明 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 3 第一章 材料与方法 究对象 收集 2011 年 9 月 1 日至 2012 年 12 月 31 日 我院儿科收治并确诊为 住院患儿 32例 ，均符合第 7次世界小儿川崎病研讨会修订的诊断标准 12，男 21例，女 11 例，男女比例为 ，年龄 2 月 ，平均年龄为 ，中位年龄为 22月，其中 7例患儿 1岁， 12 例 2岁， 4例 3岁， 2例 4岁，4例 5岁， 2例 6岁， 1例患儿 7岁。小于 5岁患儿占 全年各个季节均有发生，春夏季多见。发热见于所有纳入患儿，颈部淋巴结肿大，唇和口腔黏膜改变，皮疹，双侧结膜非化脓性充血，指趾末端改变常见，肛周、阴囊皮肤潮红、脱屑及卡介苗接种部位红斑等见于部分患儿。绝大多数患儿入院时合并感染，其中呼吸道感染最多见，其次为消化道的感染，泌尿系统感染等。患儿在诊断为1g/g/果 疗效不佳，出现 g/ 2g/时给予阿司匹林 30d，待患儿发热消退三天后减量至5d，两周左右减量至 3d。绝大多数患儿体温于 用后 2 天内降至正常， 3 例患儿出现 抗，其中 2 例患儿未再使用 1例患儿 3天后体温正常，于亚急性期出现左冠状动脉扩张， 1例患儿 4天后体温恢复正常，病程未出现冠状动脉病变。 1例患儿再次给予 g/热随之消退， 此患儿于急性期出现双侧冠状动脉扩张，直径达 7持续到恢复期无明显改善。 实验中，急性期指病程的 1要临床表现为发热，球结膜非化脓性充血，口唇粘膜改变，指趾端肿胀，颈部淋巴结肿大；亚急性期指病程 11温下降，上述症状缓解，指趾端出现膜状脱皮，血小板数量明显升高。恢复期指病程 21床症状消退，如无明显冠状动脉病变，患儿病情逐渐恢复，血小板数量降低，有冠状动脉瘤者病情持续发展 1。 照组患儿 30例同期收住我院 小儿外科住院治疗的择期腹股沟疝患儿 被纳为对照组。 30例患儿中，男 20例 ，女 10例，男女比例为 ，年龄 3月 均年龄为 位年龄为 20月，其中 6例患儿 1岁， 12例 2岁， 3例 3岁， 3例兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 4 4岁， 3例 5岁， 2例 6岁 ,1例患儿 90月，小于 5岁患儿占 龄差异无明显统计学意义。 验过程 要试剂、仪器和设备 上海科兴生物科技有限公司 4冰箱保存 上海科兴生物科技有限公司 4冰箱保存 自动血细胞分析仪 E 5000 酶标仪 荡培养箱 上海博迅实业有限公司医疗设备厂 超低温冰冻冰箱（ （ 00 离心机（ 普通医用冰箱 真空采血管（无抗凝剂真空采血管， 微量加样器： 1050200加样槽 烧杯 滤纸 超净水 本的采集 分别采集 急性期 、恢复期及对照组患儿静脉血 4求无菌、无溶血， 2温静置 602000转 /分，离心 10离血清，置于 存于 箱待检。余 2 凝剂真空采血管，立即送我院检验中心进行检测。 标检测 小板平均体积（ 血小板容积（ 血小板分布宽度（ 大血小板比率（ 由自动血细胞分析仪检测。 血清 清 用酶联免疫吸附法（ 州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 5 测。具体操作如下： （ 1）标本准备： 实验前 1天将血样从 低温冰箱转入 箱，试验前 1小时将血样转入 4冰箱，而后将血样置于室温（ 20，平衡 30分钟。采用逐步解冻法，以避免血清解冻时 因为温度骤变产生沉淀。同时将试剂盒室温平衡 1小时后开始实验。 （ 2）血清 作步骤如下： 1. 标准品的稀释：用试剂盒提供原倍标准品，分别按照下图在 行稀释。 240pg/号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 120pg/号标准品 150 l 的 5号标准品加入 150 l 标准品稀释液 60pg/号标准品 150 l 的 4号标准品加入 150 l 标准品稀释液 30pg/号标准 品 150 l 的 3号标准品加入 150 l 标准品稀释液 15pg/号标准品 150 l 的 2号标准品加入 150 l 标准品稀释液 240ng/号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 120ng/号标准品 150 l 的 5号标准品加入 150 l 标准品稀释液 60ng/号标准品 150 l 的 4号标准品加入 150 l 标准品稀释液 30ng/号标准品 150 l 的 3号标准品加入 150 l 标准品稀释液 15ng/号标准品 150 l 的 2号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。空白孔、标准孔占用三孔，在酶标包被板上标准品准确加样 50 l，待测样品孔中先加样品稀释液 40 l，然后再加待测样品 10 l（样品最终稀释度为 5 倍）。将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 4. 配液：将 30倍浓缩洗涤液 1090 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30此重复 5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50 l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 6 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A 50 l，再加入显色剂 B 50 l，轻轻震荡混匀，37避光显色 15 分钟。 10. 终止：每孔加终止液 50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白孔调零， 450）。 测定在加终止液后 15 分钟以内进行。 （ 3）血清 算：以标准物的浓度为横坐标， 为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数（ 5倍），即为样品的实际浓度。 血清 空白孔 准孔 别对应 15pg/30pg/60pg/120pg/240pg/80pg/ 清 制标准曲线，方程为：y=图 血清 空白孔 准孔 别对应 15ng/30ng/60ng/120ng/40ng/480ng/ 清 程为： y=图 y = 2 3 4 5 6y = 101002003004005006000 图 图 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 7 作程序总结 计学分析 应用 果表示为均数标准差（ ），急性期组、亚急性期组及恢复期组 性期组、亚急性期组及恢复期组 采用方差分析 。检验水准为 侧）， P 准备试剂、 样品和标准 品 加入准备好的样品和标准品， 37反应 30板 5 次，加入酶标试剂， 37反应 30板 5 次，加入显色液 A、 B， 37反应 15入终止液 15读 计算 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 8 实验技术路线图 研究对象 儿 急性期 亚急性期 恢复期 清晨空腹收集 2脉血置于凝的真空采血管 对照组患儿 即刻检测 小板 相关参数 清晨空腹收集 2脉血置于不含抗凝 剂 的真空采血管 收据数据并整理 2000r/心，留取上清，置于 冰箱 待检 测血清 清 统计学分析，结合临床得出结论 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 9 第二章 结果 清 血清 急性期及恢复期与对照组患儿血清 血清 见图 急性期 现为血清 清 小板数量增多，活化程度增强； 亚急性期血清 处于较高水平，血小板数量增多最明显，血小板活化程度较急性期降低； 恢复期血清 清 小板 活化程度 与对照组比较差异无统计学意义，但 图 图 血清 图 血清 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 10 图 与对照组相比 05101520253035性期 急性期 复期 对照组f l)图 与对照组相比 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 11 表 32例 0例对照组患儿血清 组别 pg/ng/l) DW( 对照组 ：与对照组相比， P P *P 州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 12 急性期及恢复期血清 见 图 表 急性期血清 着病情变化 ，两者均逐渐降低，亚急性期两者仍然处于较高水平； 性期与恢复期无明显差异； 血小板参数变化提示血小板急性期活化程度最高，之后逐渐降低。 010 020 030 040 050 060 070 0性期组 急性期 复期T p g/ m l)T (n g/m l) l)图 儿三期血清 05101520253035性期组 急性期 复期f l)图 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 13 表 急性期及恢复期血清 清 组别 pg/ng/l) DW(1 1 1 1 1 *1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 3 ： 1指急性期与亚急性期比较， 2指亚急性期与恢复期比较， 3指急性期与恢复期比较； P P *P 州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 14 清 清 相关性分析 清 血清 相关性分析 （见图 表 血清 清 例数 pg/ ng/ 相关系数（ r） P 32 31 30 200400600800100012000 100 200 300 400 500 600 700 800图 急性期 020040060080010000 100 200 300 400 500 600图 亚急性期 性分析散点图 急性期及恢复期 急性期两参数间相关性有统计学意义。 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 15 清 表 表 血清 例数 pg/ ） 相关系数（ r） P 32 31 30 果显示： 急性期、亚急性期及恢复期 存在相关关系。 清 表 表 血清 例数 ） ng/ 相关系数（ r） P 32 31 30 果显示：急性期、亚急性期及恢复期 存在相关关系。兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 16 第三章 讨论 一种相对常见且具有潜在生命威胁的小儿急性自限性全身血管炎性疾病，本研究中小于 5 岁患儿占 男女比为 ，与 儿发病高峰年龄及性别比相符合 13。通过测定接受 疗的 32例 急性期及恢复期和对照 组患儿血清 清 ，结果提示：急性期 清 小板数量增多，活化明显；亚急性期血清 清 小板数量增多最明显，血小板活化程度降低； 患儿进入恢复期 后 上述指标明显降低。血清 清 受到其它因素的调控，血清 血小板生成 的 抑制作用 不明确 。 急性时相反应 实验中 血清 度在 儿急性期明显升高，随着病情变化，血清 能是： 系统性炎症发生过程中，免疫异常，导致凝血功能异常，血小板活化，在活化的过程中释放部分内容的 时，血小板的活化意味着血小板容易降解， 体减少，不能及时清除 循环 其浓度升高。炎症反应的过程中肝脏作为生物合成工厂，产生多种急性时相反应物，如 维蛋白原等 ， 时相反应物，由肝细胞合成并释放进入外 周血，加速 出现 14,15。原位免疫杂交显示 要分布于肝细胞及肾脏近曲小管细胞中 16。伴有血小板减少的终末期肝病患者肝移植前 行肝移植后，血清 植第 5天达到高峰，高峰后 4示肝细胞是 功能会影响循环 17。在 环 血小板数量增多时，循环 验中， 似于 急性时相 反应物，与炎症反应严重程度 有关 。并且，相关性分析提示 为这种现象是由 PO 介导的。 末端含有与 以上调 其表达 14。 报道 18： 在继发状态下 ， 峰时间与上述急性时相兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 17 反应物一致。根据既往及本实验中的研究结果，认为 儿病程中 能也是一种急性时相反应物，反映炎症的严重程度。 所有的血细胞起源于共同的造血干细胞，包括全能干细胞及其分化的骨髓系干细胞和淋巴系干细胞，具有高度自我更新能力和多向分化潜能，使得机体可以稳定造血。干细胞的增殖和分化受到多种因素的调控，如：造血微环境、造血细胞生长因子等。在具有细胞系特异性的造血生长因子的参与及调控下，诱导干细胞向各系组细胞分化。血小板的形成是一个复杂而多阶段的过程，从多功能造血干细胞增殖，向骨髓系干细胞分化，在细胞因子的作用下形成巨核系祖细胞，然后分化成为原巨核细胞，经过幼巨核细胞、颗粒型巨核细胞，再分化成成 熟巨核细胞并产生血小板，在巨核细胞成熟的最后阶段，细胞停止增殖，经过一系列的转化表达出特异性的细胞表面抗原 时细胞产生多核 19。一个巨核细胞可产生 200原始巨核细胞到释放血小板入血，需要 8小板进入血液后，平均寿命为 7只在最初 2 天具有生理功能。 51 32P 标记血小板观察其破坏情况，血小板的破坏随血小板 日龄增高而增多。衰老的血小板在脾脏、肝脏和肺组织中被吞噬细胞吞噬并破坏。此外，在生理性止血过程中，血小板聚集、活化，其本身降解并释 放出全部活性物质，表明血小板除衰老破坏之外，还可以在发挥其生理作用时被消耗 20。 血小板的生成受到多种因素的调控，有细胞因子网络，有骨髓微环境影响，调控位点既可以发生在转录起始位点处，也发生于蛋白质的修饰阶段，导致血小板数量升高。 21,22； 作用位点较高，促进祖细胞到不成熟巨核细胞的生长、增殖和分化， 要促进不成熟巨核细胞转化为成熟巨核细胞；而 、 则抑制血小板生成 21,23血小板生成过程中有正向作用因素的参与，也有负向作用因素的调控，最终数量取决于两种作用的效果。 血小板动态变化是 儿病情变化评估的一个重要的实验室检查参考指标，也作为长期随访并指导抗凝药物使用的主要依据之一，但具体机制目前尚不明确 25。外周血血小板增多根据原因不同可以分为：原发性血小板增多症，继发性血小板增多症。前者包括：家族性血小板增多症及特发性血小板增多症，而儿童多见继发性血小板增多症，原因包括：感染、缺铁性贫血、自身免疫性疾病、缺氧、外伤、肿瘤 、手术、 功能性脾切除、 药物等 26。有研究认为：循环 外周血浓度升高，导致血小板继发性升高 27。 州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 18 或 ，其基因位于 3单拷贝基因，长约 6编码区含有6个外显子和 5个内含子，人 32个氨基酸构成 28。 有 2个结构域组成，含 153个氨基酸，与 有效刺激血小板生成。由 7、 29、 85和 151位半胱氨酸所形成的两对二硫键为其生物活性必需的部分，含 2 个与受体 个位点同时作用于两个受体 受体形成二聚体，从而激活一系列信号转导通路。 79个氨基酸，有 6个 8个 要功能是稳定 控 进 9。 杨光等将 因转入基质细胞后，观 察其在脐血造血干细胞 /祖细胞体外扩增中的作用，发现 以诱导脐血造血干细胞 /祖细胞向巨核细胞系定向增殖和分化 30。 过作用于造血干细胞，促进造血祖细胞向巨核细胞分化，增大其体积，促进其增殖和成熟，增加外周血血小板数量。同时，增加巨核细胞及血小板表面特异性膜糖蛋白的表达，增强血小板功能 31,32。大量实验表明， 过与 互作用，刺激造血干细胞向巨核细胞系分化，并特异性促进巨核细胞增殖、分化，以及巨核细胞的成熟与血小板的释放。 20世纪 90年代人们在研究小鼠髓性白血病病毒癌基因 隆了它的同源物 因位于 1长 17 12 个外显子和 11 个内含子组成。 抑 胞的 因表达可以使巨核细胞集落生成率明显减少，但粒细胞、单核细胞及红细胞则不受影响，认为 33。 子量为 85于受体超家族成员，是 I 型跨膜蛋白，由胞外区、跨膜区和胞内区组成，分别含有 466、 22、 122 个氨基酸，含有 4 个糖基化位点。胞外区具有 2个免疫球蛋白样 结构域，跨膜区无典型的蛋白酶结构，胞内区近膜处有 信号传导中非常重要，受体与配体结合后 于 游，结构疏松，含 30 个氨基酸残基以及 34。 胞、巨核细胞及血小板，每一个血小板表面有 30配体刺激下，通过 导的细胞内信号传导途径，包括 号传导途径发挥生物学功能，从而促进巨核细胞增殖、分化以及血小板形成 35。其次， 解 子，以维持机体造血平衡，防止血小板急剧变化引起的造血系统紊乱。本实验中 因可能为采集的标本兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 19 为血清，血液自然凝固过程中，血小板活化并释放部分 献显示 0%左右，但二者具有很好的相关性 36。人类 自肝脏基因库，半衰期长达 40h，使用后 5d 内血小板增加不明显，其峰值在使用后 107，与 亚急性期血小板数量达到高峰相对应，证实 异常免疫因子作用下血小板活化，释放其内容物，血小板降解，导致外周血血小板数量急剧减少，对血清 降解能力减弱， 着血液循环进入骨髓，促进成熟血小板释放进入外周血，外周血血小板数量急剧上升，表现为 儿急性期血小板数量增加。本实验中急性期血小板数量较对照组患儿升高另一原因为：实验中 本采集时间多位于急性期末。在促进血小板释放的同时 ， 生血小板，经过 8成熟后释放进入外周血，导致亚急性期血小板数量明显增加。鉴于 儿血小板数量于亚急性期达到高峰，滞后于血清 峰出现时间， 解主要依赖于巨噬细胞及血小板表面受体，推断 儿血小板在病程中的动态变化系异常免疫所致的继发性血小板增多症 37， 善全身血管炎症状，急性期后仅给予低剂量阿司匹林或双嘧达莫等抗血小板聚集药物即可有效预防血栓形成等病理情况，也符合 继发性血小板增多症的特点 38。史宏等通过研究发现 儿急性期出现 高，随着病情变化，其浓度于血小板达到高峰时下降，这进一步证实了 儿病程中 一种急性时相反应物，血小板生成增多属于继发性反应，与 促进血小板生成的因素有关 39。值得注意的是：实验中发现血清 度与 程中无相关关系。原因可能为：调控血小板产生的因素众多， 向作用因子的参与也会影响其线性相关关系；而 1）细胞 因子生成过程中的调节，生成量的多少与基因调控有关，血小板活化过程中分泌的 因子通过影响基因的转录、翻译等过程参与 另外， 升高 40。（ 2） 过与相应受体结合、降解，调节其在循环中含量，这一过程主要与血小板和巨核细胞表面的受体数量有关，通过形成受体 3）血浆中半分子 调节。目前发现凝血酶在 半分子的存在强化了 再者， 程长短不一，纳入标本少， 来源局限， 对实验结果会造成影响。 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 20 在生理状态下，血小板依层流作用沿着毛细血管内壁排列，维持血管内壁完整性。 儿异常免疫发生过程中，抗原抗体特异性结合，通过细胞内信号传导和特殊基因表达，启动细胞因子的瀑布效应，造成血管内皮及其它组织、细胞损伤。内皮损伤、胶原暴露，血小板膜糖蛋白经过 后血小板聚集、活化，释放 5物质， 加速血小板聚集，血小板活化程度进一步增高，功能亢进，被大量消耗，从而刺激骨髓产生和释放更大体积的血小板 8。 表血小板的平均容积，主要反映骨髓中巨核细胞的增生 、代谢和血小板新生情况，另一方面也显示循环中血小板的年龄，新生血小板 体积大，衰老的体积小，同时在一定程度上也与血小板的超微结构、酶活性及功能状态有密切关系。 集力、粘附能力增强，血小板的破坏也增加 43。 儿急性期血小板活化因子激活并生成增多，巨核细胞受到刺激后增生，产生体积较大的血小板，而体积较大的血小 板活性强，随着血小板的衰老， 老血小板所占的比例升高 44。 实验中 儿急性期出现血小板压积升高，体积变大，分布宽度增大，大血小板比率升高表现，预示着血小板的活化。随着免疫功能的恢复，炎症消退，新生血小板减少，衰老血小板降解，血小板大小逐渐均一化， 低， 小， 低， 在病情缓解的过程中，血小板活化程度逐渐降低，与相关研究一致 45，他们通过检测血小板表面活化标志物，如 ，发现 这些血小板活化指标于急性期升高，在病情的变化过程中逐渐减少。血小板活化程度变化与 儿病程中炎症反应的发展变化及临床表现的动态变化一致，可以指导临床评估炎症的程度，指导治疗， 其检测方便、经济、 快捷，便于广泛采用 ，具有临床应用价值 。 首次从凝血酶刺激后的血小板细胞膜中分离，分子量为 4508，由 3条相同肽链通过二硫键组成同源三聚体，分布于血小板颗粒及多种组织的细胞外基质中，通过与受体结合，桥接细胞与生长因子，细胞与细胞，细胞与胞外基质从而发挥作用。急性期 儿炎 症反应明显，血小板活化程度最高，释放其内容物明显增多， 为血小板颗粒内容物随之增多，其血清浓度明显升高。 疗后，异常炎症反应改善，血小板总体活化程度较急性期降低但仍高，释放 入恢复期，继发性增多的血小板衰老，活性降低，并被降解，释放 一步减少，直到恢复正常， 儿病程中血清 以作为评估血小板活化程度的一个指标，但有待与经典血小板活化指标，如 兰州大学硕士研究生学位论文 川崎病患儿血清 态变化的研究及意义 21 有 7 个结构域， 胶原同源区、 序列、 49。 7,8。 括两个方面：一是通过它在巨核细胞表达的受体起直接抑制作用；二是通过调节巨核祖细胞结合，发挥间接抑制作用 11。 儿由于血小板大量破坏，内容物释放增多，循环 性增强 及 急性期 表明 儿类似的血小板内容物释放增多表现。 研究发现 以以剂量依赖性的方式在体外抑制鼠和人巨核细胞集落形成单位，拮抗 疫组化证实这种作用与 关 8。 初叫做糖蛋白 子量为 88一种完整的血浆膜蛋白，分布广泛，在红系及粒系分化过程中表达减少，但在巨核细胞分化成熟的过程中出现高表达，表明 造血细胞分化的过程中发挥不同的作用， 结合对巨核细胞性白血病具有治疗作用 50 ，对巨 核细胞及血小板的生产具有抑制作用。本实验统计分析显示血清能原因包括 ：外周血血小板数量受到正向及负向调控因子的双重调控， 小板活化过程中释放的其他物质，如 核细胞生成抑制作用强度如何，本研究尚不能判断，有待与 程中血小板新生及活化降解过程均明显，在数量出现动态变化的过程中，血小板功能也呈现动态变化，释放的内容物具有多 种生物学功能，使得血小板数量变化更加复杂，不能用单一原因解释；血清 血小板活化程度有关，血小板活化