食品添加剂维生素b2的质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验

食品添加剂的质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明1维生素B2的质量规格要求质量规格要求符合日本食品添加剂公定书中维生素B2的相关要求项目规格检测方法性状黄色橙黄色的结晶或结晶性粉末，微臭，有苦味符合食品添加物公定书确认试验符合注1（1）比旋光度1280142020D注2纯度试验（2）感光黄素不比比较液的颜色浓注3干燥减量15注4灼烧残渣030注5含量9801020注6【注1】确认试验本品水溶液（1100,000），呈淡黄绿色，发强烈的带黄绿色的荧光，如果加入盐酸（14）或氢氧化钠溶液（125）后此荧光会消失。【注2】纯度试验比旋光度干燥本品，精密称取01G，加入氢氧化钾溶液（1150）4ML使之溶解，再加入新煮沸又冷却后的水10ML，一边加入乙醇4ML一边充分振荡溶液，再加入新煮沸又冷却后的水定容至20ML，30分钟内测定比旋光度。【注3】纯度试验感光黄素称取本品0025G，加入无醇三氯甲烷10ML，振荡5分钟，滤过，其滤液的颜色不比以1/60MOL/L重铬酸钾溶液30ML加水配成的1000ML溶液的颜色深。【注4】干燥减量15以下（105，2小时）。【注5】灼烧残渣03以下。【注6】含量本品干燥后，含有核黄素（C17H20N4O6）9801020。2维生素B2的生产使用工艺21维生素B2作为一种水溶性的营养强化剂可以添加到多类食品中。目前GB14880及其公告中液态饮料类只有饮液、乳饮料类可以添加维生素B2，本次预申请维生素B2在“果蔬汁类”饮料中来使用。22添加了维生素B2的果蔬汁饮料生产工艺221添加了维生素B2的系列果汁、果肉或果浆的饮料生产工艺将称量好的原料1投入有离子交换水的搅拌罐中溶解、搅拌均匀将称量好的原料2、原料3投入搅拌罐中，混合搅拌均匀将称量好的原料4和各种维生素及矿物质加入搅拌罐中，混合搅拌均匀将称量好的原料5加入搅拌罐中，混合搅拌均匀222添加了维生素B2的胶原蛋白果汁饮料生产工艺溶解、搅拌混合、搅拌搅拌加热溶解混合、搅拌质量检查混合、搅拌质量检查填充质量检查杀菌、冷却包装质量检查成品原料称量搅拌、溶解过滤搅拌、溶解品质确认过滤储存杀菌过滤填充杀菌外观检查贴标签印字包装成品品质检查配方1配方23维生素B2的检验方法31将待测样品干燥后，精密称取0015G，加入乙酸（1400）800ML，加温溶解，冷却后，加水定容至1000ML，以此作为检测溶液。32另外称取核黄素标准品，采用与上述检测溶液同样的操作，制成标准溶液。33对于检测溶液与标准溶液，以水作对照溶液，在波长445NM测定它们的吸光度AT和AS。34在上述检测溶液与标准溶液5ML中分别加入连二亚硫酸钠（NA2O4S2）002G，振动摇匀后使之脱色后，马上测定吸光度AT和AS，按以下公式求得添加剂维生素B2中核黄素含量。以上操作需避免直射阳光，在遮光容器里进行。核黄素（C17H20N4O6）含量10GSTA）试样的采取量（）（核黄素标准品的采取量本方法参考日本食品添加物公定书（第8版）维生素B2（核黄素）的定量检测方法。4食品中维生素B2的检验方法（高效液相色谱法1（公定法）41仪器和试剂411附带荧光检测器的高效液相色谱仪（HPLC（FL）412色谱柱反相分配型，内径46MM，长度150MM413标准维生素B2日本药典标准品核黄素标准品（日本公定书协会）414酶溶液取维生素B2定量用高峰淀粉酶B05G，在临用时溶于10ML醋酸缓冲液PH45中，过滤或离心分离后使用其上清液。415合成沸石活性吸附剂，吸附维生素B2定量用41625W/V氯化钾01MOL/L盐酸溶液洗脱液加入85ML浓盐酸至1L25W/V氯化钾溶液中。417其他试剂若无特别说明,均使用色谱纯。418玻璃容器选用褐色的玻璃容器。42试验溶液的配制精密量取样品110G放入100ML提取瓶中。加入01MOL/L盐酸50ML,沸水浴中加热30分钟，时而搅拌进行提取在50以下冷却，用4MOL/L醋酸钠溶液调整PH值至4045。添加5ML酶溶液，在37下保温一晚后，加入醋酸缓冲液PH45定容至100ML。过滤后的滤液作为样品溶液2。精确注入适量的样品溶液含15G维生素B2至已用水填充了活性合成沸石15G的吸附柱中，以1ML/MIN的流速让其吸附。用5ML水冲洗吸附管内壁,然后用3060ML沸水清洗色谱柱后,用沸腾的洗脱液以1秒1滴3ML/MIN的流速洗脱，分取大约25ML的溶出液。降到室温后,用洗脱液定容至25ML，作为HPLC用试验溶液。43配制标准溶液431标准原液核黄素标准品于105下干燥2小时，干燥器内冷却30分钟后，精确称取50MG至1L褐色容量瓶内。加入4ML醋酸和约700ML温水，用超声波溶解。冷却后，用水定容（50G/ML，在阴冷却处放置6个月稳定，每6个月配制一次）。432标准溶液精确量取4ML标准原液至200ML褐色容量瓶内，用醋酸缓冲液PH45定容（1G/ML，临用时配制）。433HPLC用标准溶液将标准溶液用醋酸缓冲液PH45稀释，配制成01、005及002G/MLHPLC用标准溶液。44测定将试验溶液20L注入高效液相色谱仪，测定维生素B2的峰值，根据预先从将20LHPLC用标准溶液注入高效液相色谱仪后得到的标准曲线，求得试样中维生素B2的含量。（HPLC操作条件）3色谱柱内径46MM，长度150MM、不锈钢制4流动相醋酸缓冲液PH45甲醇（6535V/V）检测器荧光分光光度计检测波长激发波长445MM、荧光波长530MM流速10ML/MIN柱温3545计算试液中维生素B2的含量（MG/100G）CVN100/W103C根据标准曲线求得维生素B2的浓度（G/ML）V定容量（ML）N稀释率W试样采取量（G）1虽然也有不进行酶分解，直接注入至HPLC，分别定量维生素B2磷酸酯的方法，但是食品中的维生素B2磷酸酯，大部分都变成了游离的B2后被吸收，因此此处通过酶分解，将所有的维生素B2以游离形态定量。作为食品添加剂使用的维生素B2丁酸盐，可以通过酸分解求总维生素B2的量。2由于高峰淀粉酶B中含有一些维生素B2（约02