实验二发酵罐认知及使用培训

1、发酵罐认知及使用培训主要内容v1.各部件名称及功能v2.电极及电极标定v3.发酵罐的灭菌v4.发酵v5.注意事项1.各部件名称及功能v发酵罐由罐体、管路、主机及附属设备四部分组成v1）罐体v电机、泡沫电极、空气过滤器、空气前压力表、流量计、尾气管、尾气冷凝管、视窗、照明灯、夹套、温度电极、取样阀、罐底阀v2）管路v蒸汽一路蒸汽进发酵罐夹套二路蒸汽进发酵罐三路蒸汽进取样管路v空气：进罐v水一路进发酵罐夹套；电加热器、循环水泵、电磁阀二路进排气管夹套v排气管v排水管v3）主机v电源开关、显示屏、加热指示灯、注水开关、搅拌开关、补料泵、电极线v4）附属设备v蒸汽发生器v空气压缩机各部件按功能可归为6

2、个系统v搅拌系统搅拌系统：搅拌电机，搅拌轴，搅拌叶（耙式消泡器）v通气系统通气系统：空气压缩机，空气流量计，空气过滤器，排气管，尾气冷凝管v保温系统保温系统：夹套，电加热器、循环水泵、电磁阀v蒸汽灭菌系统蒸汽灭菌系统：蒸汽发生器，进夹套蒸汽管路，进罐蒸汽管路，进取样管蒸汽管路。v检测系统检测系统：液位电极，温度、pH、溶氧电极v补料系统补料系统：补料瓶，补料管，补料泵，补料针2.电极及电极标定vpH电极：检测发酵液的pH值大小。v溶氧电极：检测发酵液中溶氧高低。v泡沫电极：检测发酵液面泡沫位置。v温度电极：检测发酵液中温度高低。vpH电极、溶氧电极使用时需标定1.pH电极和溶氧电极在标定之前要

3、在缓冲液中浸泡并联机通电30min以上。2.pH电极先标定零点（6.86），再标定斜率（4.00）。3.在灭菌达到100时标定溶氧0%，（也可在饱和的亚硫酸钠溶液中标定0%）发酵参数设置完毕但还未接种时标定100%。3.发酵罐的灭菌v1）准备开蒸汽发生器、开空气压缩机、开水源开关、标定电极、装罐。v2）预热（0-90）开搅拌器，转速为200-300rpm；温度设为手动微开排气阀、开排夹套水阀，三通阀提到上挡位，其它阀均关，缓慢开一路蒸汽阀，蒸汽进夹套预热v3）加热（蒸汽进罐）90-121停搅拌，开空气过滤器排冷凝水阀，开二路蒸汽阀，至基本无冷凝水排出，关小排冷凝水阀，三通阀放到下挡位，蒸汽进罐

4、（调整过滤器前压力表示数在0.12-0.16MPa之间）到100约2min后关闭排气阀此时可标定溶氧为0%v4）保温阶段（121，20min）开排气阀，旋松接种口，开三路蒸汽阀开取样阀开罐底阀，6-7min后关闭，关闭顺序相反调节进气量和排气量，使温度维持在121v5）降温（121 -发酵温度）关接种口，三通阀提至上挡位，关二路蒸汽阀，关一路蒸汽阀，尾气关小开空气过滤器排冷凝水阀，开空气阀，至无冷凝水排出时关闭排冷凝水阀，三通阀放至下档位。空气进罐点注水开关，关闭排夹套水阀，开启进水阀和循环管线切断阀，调温度为自动。温度低于100时开搅拌冷却过程中，罐压严禁掉零。4.发酵v1）温度降至发酵温度

5、后，设置各发酵参数，溶氧电极校100%v2）火焰圈接种（罐压调小后再接种）v3）发酵初始化v4）发酵结束，数据存盘v5）放料，清洗，关仪器。5.注意事项v1.最高工作压力不大于0.2Mpa，进罐空气压力应不大于0.2Mpa，最高消毒温度为126。v2.培养基装量：5L罐最高不超过4L，10L罐最高不超过8L，最少装量以所有的电极都没于液面以下为准。v3. 在过滤器消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力应在0.120.14MPa之间，最高不得超过0.17MPa。压力过低将造成灭菌不彻底，压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。v4. 在实消结束后冷却时，发酵罐内严禁产生负压，以免损坏设备或造成污染。开始控温前把注水开关打开，确保夹套中有水v5. 接种时要保证无菌环境，需要在进料口放置火圈。v6. 发酵过程中，罐压应维持在0.030.05MPa之间，以免引起污染。v7.发酵结束后数据存盘，关闭总电源前，请将控制器退回主菜单，然后按Ctrl+F6关闭控制程序，然后关闭电源。v8.运行结束后，关闭自来水阀，空气源，蒸汽发生器。v9.每次移动发酵罐的时候都要先把溶氧电极和pH电极取下来，防止在挪动的过程中碰撞损坏电极。v10.手动清洗罐体前要先取