临床诊断方法的筛选及新治疗手段的

犬细小病毒病临床诊断方法的筛选及新治疗手段的研究作者姓名：程雪梅指导教师：柴春彦学科（专业）：兽医学号：1061502023关键词：犬细小病毒病，聚合酶链式反应，诊断，治疗申请学位级别：硕士犬细小病毒病临床诊断方法的筛选及新治疗手段的研究摘要对上海市犬细小病毒病进行了发病率调查，同时进行了治疗手段的调查。设计了聚合酶链式反应，免疫胶体金试纸条，酶联免疫吸附试验，血凝试验四种方法诊断犬细小病毒病。并采用单克隆抗体、干扰素、单克隆抗体干扰素相结合等综合治疗措施对该病进行了分组治疗。目的是筛选出当前最佳实验室诊断方法，并选择最适合的治疗措施。结果表明，春季犬细小病毒病在上海市的发病率高，占门诊比例的19.2%以上，应用PCR诊断诊断犬细小病毒病的准确率达95.7%，拾而且成本低宣，敏感性，舒特异性强，徒完全可以应获用于实验室龙和临床诊断幸中。实验应罪用的综合治论疗措施对犬惹细小病毒病禽早期的治愈蛋率达84胜%，据中期的治愈馒率达45配%，晚期的接治愈率为剑9%以上，驼是一种行之自有效的治疗措施。摘要就是对你整个文章核心内容的高度概况，也就是读者看完你的摘要就能了解你整片文章的结构和思路。疾病类的包括主要临床症状（代表这种疾病的最显著症状），实验室诊断，行业中公认的或是GB(国家）NY(地方、行业）权威认可的方法，的重要结果确。以及你的治疗方法。摘要就是对你整个文章核心内容的高度概况，也就是读者看完你的摘要就能了解你整片文章的结构和思路。疾病类的包括主要临床症状（代表这种疾病的最显著症状），实验室诊断，行业中公认的或是GB(国家）NY(地方、行业）权威认可的方法，的重要结果确。以及你的治疗方法。叠关键词：犬涨细小病毒病越聚合酶链叙式反应诊俗断治疗o母nDia固gnosi育sand导Trea属tment资ofC君anine参表1犬无细小病毒在奔不同季节的类发病情况箭548例惩病犬逐月发暴病情况愤月份1断234泻56呀789禾101秋112作发病数2牌724盈3245控633艘430与2897称795责831扛百分率%计4.94岗.35.乞88.7幸11.4闭6.2肃5.45姓.117鹿.714驻．410哄．55.缘6剑图1年锹平均发展趋闷势05101520253035嫌第一季度戏第三季度200120022003200420052006案1．2．3份传染源兄本病主要传昂染源为病犬汇，康复犬，杆以及无临床文症状的带毒眠犬。病毒随毒病犬的粪便伐，尿液，轰呕吐物，唾头液等排出体烤外，污染食寒物，器具等扶周围环境从储而使犬感染洽。病犬在感奶染的第3渐~4尚天，即可通警过粪便向外目界排毒，此全时病毒呈单男个散在，传晕染性也最强蔑。7~10雅天后随着炸肠黏禽膜IgA烫的产生和酱随出血进入姜肠道的I引gA等赌CPV特训异抗体的增兔多，散在的院病毒被凝集倦到一起，狼感染性降低羽，血凝性也该大大降低甚吧至丧失。松1．2．4节易感动物惩本病主要以席感染未经免应疫的断奶仔屡犬为主，成驼年犬发生较哄少，且多呈址良性经过。型断乳前孔后的仔犬最疯易感染，多肝以同窝爆发截为特征，幼双犬（尤其是呀离乳1．台5~3个弱月的仔犬）优平均发问病率65抹．4%，有良时高达1贵00%。在纱养犬较集中准的地方，常营呈地方性流铺行。据统计咱488路例病绕犬中，最小钱的为15醋日龄，最毯大的为5佛岁，其中强，1月龄伏以内的7坡例，2~箩3月龄的填65例猾，4~5凑月龄的2险54例，混6~7月道龄的71疗例，7~察12月龄再的44聪例，12起月龄以上的榨7例。枣雄性犬2胞06例，毅占45．程98%，雌匆性犬24总2例，占迈54．0壤2%；警犭福431喝例，占9部6．2%，近普通家犬岁17例，垃占3．8呢%。誓由此可见，抹本病不分品闪种，性别，喊年龄，均可闸发病，但以踪纯种警犭易奋感。年龄与村易感性巩也有一定的催关系，其中毕以幼龄犬居乖多。-3侮--亦1．2．5据传播途径工本病主要由泰直接接触或吉间接接触病狂犬和污染物型而感染，病贱毒主要由感之染犬的粪便济，尿液，辨呕吐物，唾询液中排出，牺并通过污染公的食物，垫川草，餐具和倦周围的环境荷而使易感犬川受到感染。少病毒经消化蜂道进入机体缴，人工皮下棚，肌肉，或笛静脉接种也恩能引起发病它。但特定菌园丛犬症状较召轻，有时仅疫见体温升高迫与血细胞减个少，需要其影它微生物协楚同作用，才奥会出现严重束的临床症状部。祥还本病的犬粥康复后，任恰长期带毒，悦可从粪尿中仍长期排毒，场成为本病的要重要隐性传脖染源。不经且严格消毒的改车辆，用具岔，甚至饲养乎和医疗人员色的衣服，鞋街子，器具等增也可成为散矿播本病的媒介。棋粮不同品种胁的发病情况改对343见例细小病暑毒病犬的品茧种进行统计夸，博美、可眉卡、京巴的饰发病数居前薯3位，疫占发病霸犬总数的今60．64堂％。韵各品种的发立病情况见表欢2熔表2犬启细小病毒病岁犬各品种的拐发病数氏品种发病弹数/只占顽全部病犬比格例%孔博美10冈931.赵78膛可卡54退15.7勤4顽京巴45椒13.1亮2顿黑背27皮7.87茅苏格兰犬尘247.露00夏吉娃娃2糠47.0缠0鬼西施21概6.12艘八哥10语2.92债金毛猎犬鞋102.诉92阴沙皮7龙2.04则其他12鞋3.05茧合计34棉3100走1．3发驳病机理术病毒侵入后围在感染的头殊两天，病毒北在口咽部位哀复制，通过横血流传播到蜻其它器官，绵第3~5盯天出现病毒霞血症。虽然寄通常肠炎病闪症明显，但钻细小病毒病筹感染是全身思性的。病毒酸是通过血流棵-4--叫而不是肠腔虫到达肠黏膜只。基于这个拒原因，血清未抗体效价与售保护极其相欧关，被动获陈得的抗体在医足够能量时舍完全可以保赌护动物。肠孕道IgA魔对保护是图非必需的。子知道口服叔CPV后棵4~5赵天，临集床上才明显从表现出肠道绩的症状。一组般认为潜伏倘期为3躁至7或摔8天，狗第3天乳首次排毒，投常在明薄显的临床症亿状出现之前末排毒。屋犬细小病毒帆病的病理变配化主要取决它于病毒对分品离细胞所需璃要的必要条僵件。因此，挣病毒复衬制主要在肠斗，淋巴组织韵和骨髓。细鹅胞也必须具桨有适当的病练毒受体，因铺为并不是所愧有具备细胞缓增值的组织哨都受影响。洞加速细胞增赖值有利于病花毒复制，加叮重病理变化岭和临床症状需。因此，如终果感染犬冠井状病毒先于披CPV，毛冠状病毒通茶过破坏更多饿的成熟绒毛立上皮细胞来软刺激肠腺胚兔上杆皮的增值，址导致双重感个染，比其它迹任何一种感标染都严重。方在肠道内，谨细小病毒的税复制杀死了依肠腺的胚上斜皮细胞，导池致上皮脱落疗，绒毛变短稿，呕吐和服耽泻。淋巴坏金死和骨髓增控值细胞的破植坏导致淋巴懒细胞减少，故严重者出现扬泛白细胞减卖少症。奖犬细小病毒钢病能很快产敢生棉衣，临仗床症状一出允现即可检出鸣细小病毒循摘环抗体，而让在临床干发病期间迅燥速达到高峰籍，能迅速产妈生免疫反映泻是疾病临床贵症状严重的蛙一个关键因外素。能限制专病毒血症的刚程度和持续庆时间的动物爆，其症状就碰较缓和，康旺复的机会就卷较大。这可箭以解释为什暖么当灭活疫摘苗保护减弱记时应能使犬私不发病，对质感染的记忆份反映之快足出以缩短病毒像血症。如果帐犬在感染的姓急性阶段幸店存下来，通萍常能迅速和翼完全地从肠眯炎病状康复涛，甚至在致毛命的病例，守都有肠再生旧的例证。仅陡仅是现在已市很罕见的心晋肌炎病例可栗导致心肌损犁害的慢性进领行性疾病。圣免疫是长期务的和完全的盘，间隔两年径再受到攻击侨应能抵抗感痒染。膜1．4.惑临床症状：轿根据临床症膨状可分为两危种：即肠炎板型和心肌炎骑型。何1．4．1永肠炎型：驱肠炎型又称蠢出血性肠炎灾，潜伏期7昼一l4d，佳主要表现为恩急性出血性舅腹泻、呕吐辫、沉郁、白嗽细胞显著减载少等症状。栗患犬精神沉序郁，食欲废至绝，呕吐，主体质迅速衰醒弱。不久，盏发生腹泻，蜡呈喷射状排搅出，粪便呈字黄色或灰黄猜色，随后粪锤便呈番茄汁畜样，带有血颠液，发出难止闻的腥臭味松。巷体温升高到护40国—劳4l欺℃概，呈稽留热[4]保。呼吸及心梦跳增数(晓120标—笋200次／悄min)。数1．4．2首心肌炎型衣：怜此型多见于许4或—须6周龄的幼蹄犬。发病的蠢特征是临床悼症状未出现等就突然死亡扒，或者是出廊现严善重的呼吸困桶难之后死亡伸。病犬常突迫然病情加重牵，肌肉震颤健，四肢末端缩和耳鼻发凉湾，可视黏膜屈苍白，病犬照迅速衰竭，赢呼吸极度困猴难(可持续养20挡—闻30mi奇n)，体温橡升高，心率博加快(20亭0次／mi培n-1-挥-1前言北1．1犬剑细小病毒病传的特性春该病病原体固为CPV，增属细小病毒斯科细小病毒挎属，是哺乳模动物中最小答、结构最简璃单的一类嚼单链线状D画NA病毒。归病毒粒子直回径20nm水，无囊膜，剑二十面体立胀体对称，呈蜜圆形或六边手形，肯其基因组大捧小约5KB荐，CPV基贺因组有两个花主要的开放背阅读框架，孕3艘’往端编码结构窗蛋白，5凑’谅端燥编码非结构表蛋白[1]秀。CPV对码外界理化因绝素的抵抗力架非常强，这袄与病毒的化封学组成和解继构特点侦密切相关。泄病毒无囊膜子，不含脂质踪和糖类，结勺构坚实紧密馆，绝大多数叮病毒能耐受招６５俭℃为连续慧３０分钟而副不丧失其感朗染性，个别弦病毒能耐受谎更高的温度遣。在ＰＨ３烦．０～９．深０，于５６樱℃假病毒保持感兄染性６０分球钟，而在此保条件之外，抢病毒感染性找迅速降低。挥低温长期存聋放的CPV村其感染性不透发生明显变粒化。CPV耀对乙醚、氯奖仿、醇类和轿去氧胆酸盐怎有抵抗性，功无论感染性略还卡是血凝性都回不受影响。扶消毒剂可用狮于灭活CP宁V,最有效极的是福尔马词林、氨水和饼氧化剂等[2]雀1．2流膏行病学钉豆犬细小病挂毒病的感染想CPV是1造978年美絮国Appe握l[3]耀等从患肠炎兼的病犬中分干离获得，主渡要引起犬的斤出血性肠炎粮和幼酒犬心肌炎，杆并使白细胞葱大量减少，暮幼犬的发病聪率和死亡率串都很高。该巴病发现时间个不长，但在土欧、美等一熔些商业饲犬轿场，相继有崭流行和造成育幼犬群损失屿的报道，除论美国外，己划相继在英国列。灾德国和法国胡发现，当前笨己成为犬的间一种重要传爸染病，我国液亦有本病的隶爆发流行，扔并己分离获碰得多株病毒杜，研究报道葱日趋增多，桶并发现它在主抗原性上与浩猫泛白细胞避减少症病毒旁有密切关系[2]风主要调查了虚上海地区５诉家宠物医院更从2001佣年到200低7年150今0个腹泻有扭关病例。其迟中有654嘱例犬细小病谷毒病.调源查结果表明按,春季犬细舱小病毒病在双上海市的发句病率高,占迟门诊比例的晴19.2%矿以上,该病彩死亡率达7秩8%,且当溪前这些宠物耻医院对该病趁的治愈率达片20%.狂1．2．2润季节性钢本病一年四冬季均可发生弃，但在春季靠（3~6咐月）和秋季挎（9~11陡月）发病壶率较高，共喷统计了倘548例懒呕吐和服泻范的病犬，当爪时疑为犬细场小病毒性肠渣炎分别占全断年发病总数通的32.诵1%和摩42.6%浩。同时，在么临床调查中浪还发现本病师与犬瘟热有肤间隔爆发的只流行特点。导结果见表谁1:-5备--扫以上)，心信区听诊有明僵显的心内杂圆音，心电图鸦显示多灶性堂期外收缩(修即心肌损伤探)。章1．4.3蒙病理剖检促：辣死亡犬极度层脱水，消瘦间，腹部蜷缩偶，眼球下陷泼，黏膜苍白斩。肠粘膜严矿重剥落，肠闪壁弥漫卡性充血和出螺血，呈暗红卷色。肠淋巴盒结肿大、充淋血，肠内容序物呈酱油色塘，具有恶臭茫味。幼龄死糟犬表现为肺泼淡红及轻度责水肿，气管忍及支气管内顷有多量泡沫棵样液体，肝注淤血，水肿农。心肌软化圈，雹颜色变淡，夸心内膜及心形外膜上有出屡血点[5]。磁1．5鉴别舱诊断锦1．5．1考犬细小病温毒病：泄由CPV引记起，CPV妇能在犬肾细帅胞和猫肾细昌胞(原代和蓝传代上皮细袜胞)上生长剧，在4隙℃垃或25快℃占的条件下，仗能聚集恒河豪猴的红细胞确，而不聚集鼠其他动物的倾红细胞，这打一生物特性雕可对CPV谋作最出实验室鉴胁定提供条件[6]。歉1．5．2犬犬瘟热：挖也出现呕吐熔、腹泻，但痛症状轻微，未没有犬细小伪病毒病中的轧西红柿汤状暖暗红色的腥录臭粪便。昼该病主要以类双相热型、什神经症状、芳后躯瘫痪、容上呼吸道黏出膜和眼结膜遍的脓性卡他健、皮肤上的写红色丘疹和邻硬足掌症为妹特征。碎1．5．3束犬细菌性万出血性肠炎驰：香有食人腐败反变质食物病渐史，尽管也蹈发生呕吐、滋腹泻和脱水激，但易与犬亮细小病毒病尘相区别。撇1．5．4诊犬传染性竿肝炎：墨以暂时性角危膜浑浊，黄使疸，囊壁水门肿，肝肿大农，表面呈花椅斑状为特征悲。呕吐、腹听泻和脱恰水较轻，粪法便呈黄色粥渗样，偶尔混悄有少量血液影，且无犬细霉小病毒病粪达便的腥臭味在。番1．5．5掘犬敌鼠钠动盐或杀鼠迷烛中毒：蕉以内、外出翼血为特征。号外出血表现料可视黏膜出膏血，注射针巾孔出血和阴江道出血；内疑出血主康要见于眼底暂出血，心包拔血肿，纵膈购血肿及胸腔笋积血。虽然轮该病也出现恐呕吐、腹泻堂和血便，但猫症状轻微，半粪便中无犬凶细小病毒病止的特异性臭廊味，且有食利人毒饵和毒更鼠的病史。越维生素Kl店为本病的特纪效解毒药，晋若配合催吐禾洗胃等治疗拘措施，初、给中期病犬迅宇速获愈。映1．5．6锅犬钩端螺版旋体病：护多发于夏季舍(7～9月馒)，有明显袄黄疸、血尿缘，尿在暗视棍野显微镜下幻可检查出虫辨体。娇1.6实秃验室检查怜大细小病毒煮性肠炎有较剥明显的临床踪症状和病理卧变化，可据唇此做出初步构诊断，但确厦诊必须乖依靠实验室滩诊断。常用隆的实验室诊叫断方法有病渠毒分离、H言A/HI试只验、电镜负辞染及ELI雁SA和PC霉R-6-楼-等。蔬病毒分离法脸虽然较为敏构感，但是耗腰费时间太长智，因此一般赠用于新疫区闭，或为了对贷流行毒勒株进行研究榴比较[7]。稍1．6.1贤血液学检垃查:壁正常犬血液燕白细胞数为缘(6～l1嫩)诱×暂109脉／L，犬细糖小病毒病患驼犬白细胞明墙显减少，小再犬可胜降低到(0磨．1～0印．2)培×填109塌／L，多数界在(O．5危～2)树×讨109总／L，由于税其他原因引版起的严重腹婚泻携也会使白细售胞减少，故克此法只能作土为辅助诊断袭。洲1.6．2乎血凝试验衡(HA)与鸭血凝抑制试恰验(HI)鸽:援在诊断时，期可根据病程边决定选择血酱清学诊断方茎法。鹅1）HA：赵取粪便样品情和脏器样品时处理后，用级0．5％猪影红细胞悬液残在4戏℃刊时按比例混柏合，充分振龟荡后，结果顶判定的方法臣是以出现5名0％的红细屯胞凝集为终踩点，HA效跨价以出现终网点凝集的样芦品最滔高稀释倍数糖表示。各2）HI：挡将病犬血清士、腹水或乳跃汁样品作l岗：5稀释，慰灭活后连续利稀释，分别耻加血凝素抗字原和埋猪红细胞。欧判定方法是肌以完全不凝梅集为抑制终庙点，样品的眼HI效价剂以其出现终态点抑制的样拒品绩最高稀释倍复数表示。复但Anna父maria况Prat骂olli等[8]红通过比较接岸种CPV2书或CPV2王b灭活苗幼鸽犬的中和抗肿体反应得出段以下结论：撒HI试验并峡不总能准确谷地评估携带睛有犬细小病暑毒病犬的真裙实免疫状况盐。祸进行HA试辞验可以取发桌病早期的病妥犬粪便，并妨用HI试验步确定其特异俩性。发病后常期由于肠粘话膜分泌抗体坟，粪便样品欺血凝性下降悼或消失，但棍却经常出现才HI作用。柜通过血凝试给验还可以将伞CPV绩同FPV和测MEV区别截开逆[9,10桐]劈甲血清中和漏试验(SN探)骗本试验在细却胞培养物中抚进行，多采芝用稀释病毒湿一固定血清哨法。临床应侵用意义不大站。疫魔免疫扩散雾试验固用0．01脚M、pH柿7．4的P姨BS配制1脑％琼脂糖凝乘胶，制备平挥板，进行琼勺脂扩散试验争，测定病智毒抗原和相争应抗血清的截反应，37州℃橡湿盒感作，昆24荒—都48h，功即可得出结艇果。此法简话便、经济、报特异，但敏迟感性不高。板年酶联免疫命吸附试验(瞎ELISA译)县此法因其便盛利、快速、惹敏感、特异罩性强，便于瘦自动化，能葬检测群体特扬异性抗体而驻备受人经们的关注。惩1994年陡，Dran偏eDP等拒建立了一种芬CPVEL醒ISA，此飘法可在野外屿对犬粪便中叼的CPV抗滨原均进行快速检守测。现在，营ELISA漂检测法在国仁外已广泛推体广，并已有煮商品化试剂舍盒。-7区--劳1.6．5适．1间接圈ELISA蕉：吴金石等[11]恶用蔗糖密度晕梯度离心和五凝胶层吸纯抓化CPV作虾抗原，建立靠了检测CP水V抗体的问碑接ELIS荣A法。其特远异性和稳定暖性良好，结快果判定准确赛明显、易于罚把握。待1.6．5失.2抗晋原竞争EL戏1SA：江此法也称竞壤争性抑制E商LISA，碑主要用于测宾定小分子抗影原，如CP地V。Rim撑melzw夸aanG淡F等[12]乘分别用间接羽ELISA逮、抗原竞争哑ELISA酸和HI试验逐对犬血清中字的CPV特证异性抗体进骂行了检测比速较，下结果发现，狗两种ELI拣SA的特异杂性和可操作丢性比HI的早都高。据报嗓道国外有学打者分别用抗划原竞争畅ELISA膝和HA试验挣对犬粪便中协的CPV进钻行了检测并适对结果进行膨了比较。凯1.6．5低．3双抗尚体ELIS闲A：条此法建立在伴单克隆抗体慕技术之上，饰对CPV的雀红血球凝集谋蛋白具有特缸异性。Mi谦ldbra康ndMM域等(19凯84年)用胃双抗体EL爬ISA检测挣了犬粪便样贴品中的CP矛V。映1.6．5码．4双抗椒体加心EL劈ISA(D喉as-El秃ISA)：辩利用此原理梦已研制出犬女CPV酶标痒诊断试剂盒絮[13,1非4]扛，此试剂盒准在30m豆in内即可把用肉眼判定骑结果，具有赵简便、快捷地、特异性高挽的优点。其补方法是：取跳少许粪便溶慌于生理盐水秋中，取一滴主悬浊液加到判犬CPV酶叮标诊断试剂浴盒，30芳min出现今明显的沉淀适线，即判为舅阳性。Ri幼mmelz斗waan私GF等[12]气分别用Da扒s币—假ElJSA办和HA试验尝对犬粪便中民的CPV进作行了检测比王较，结果发虾现Das-采ELISA品的特呼异性和敏感协性都比HA汉的高，此后世，他们又用晃Das-E室LISA对飘犬粪便样品图中CPV、品犬冠状病毒手和轮沈状病毒抗原迷进行了检测戒。梅1.6．5惯．5斑点烘ElISA叛(Dot-疏ELISA昌)：击国内有学者宁应用Dot关-ELIS笑A对CPv牌进行了快速己检测，并发商现Dot伟—页ELISA赛的敏感性比搭常规己ELISA字的高很多。偿Banja您-BK等[15]么用Dot-火ELISA控检测了17丛1只犬的粪耳便样品，结河果发现cP叶v和犬冠撒状病毒的阳皂性检出率分誉别是29．凑8％和6．樱4％，同时各他们发现C扛PV病的发额病率随犬年交龄的增大慰而逐渐降低波。熄1.6．5脆．6复合势物捕获阻断滩ElJSA犯(Ctb-迟ELISA轰)：巧此法可检测霸病毒抗原，愁Rimme擦lzwaa鸽nGF等[16]刻分别用Ct垮b言—删ElJSA板和间接EL拜ISA检测离了犬血密清中CPV站、犬冠状病击毒和轮状病姨毒的抗体。绞1．6.6内乳胶凝集向试验(LA续T):躲LAT可用供于检测CP悼V抗原和抗海体，它是一伐种可在玻片磁上进行的试圈验方法，操兄作简便，结示果慎容易判定，次特别适用于芝现场检测之甘用，用它可箱检测到4n乓g／ml的顺CPV抗原号。Subh冰ashin遭i-CR等[17]福分别用LA摊T和PCR神法检测了5鲁56份CP爹V患犬粪便柱样品，结果透发现，就样授品的阳性检虽出率而言，膝PCR比L犹更敏感。效国外另有学睬者分别用L巧AT、HA没、EIJS旋A对犬、猫析及其他毛皮误兽粪便样品眼-8--滚进行了检测易，结果发现务，ELIS果A的敏感性按最高，HA幼和LAT的遥敏感性分别治是96％和寒9l％；甚LAT、H蛾A架—佣EIJSA晋三者的特异航性分别是9捉2％、9半5％、93底％。甩兄荧光抗体航试验:细此法用于检晴测病犬肠切封片、心肌切恶片以及细胞枣培养物中C袍PV，具有属与ELIS晶A相同的敏秧感性，翅但被检病料怎的来源有一或定的局限性华，用于死后晶检测。．顶Rypul灶K等[18]全分别用间接蚕荧光抗体试胃验(IFA祸)、LAT弊和PCR方厌法检测了l喘8份CPV树患犬的病料畜样品，并对轻检出的CP首V野型毒株汇上的VPI笋／VP2基花因片段进行输了序列分析汤，结果发现义，此毒株的刷系统发生具汤有高度的相减似性。它草病毒分离介鉴定厚将病毒处理散后接种犬肾辜原代细胞或奶猫、犬肾传览代细胞系培统养，分离病宴毒，观察细搂胞病变弃及核内包涵纹体，以便确熟诊。Mar喜tinel盯loF等[19]析分别用EI潮lSA、H翁A和病毒分勇离技术对1帝15份狼粪奴样品便进行究了检测，其铃中在4份样驱品中检测到蒙了CPV，呆并经电镜检劝查得到了证稼实，这是第装一次确切的建观察到了欧派洲狼体内的仍CPV。孕语PCR诊暗断技术盏PCR技术斑发明以来，患因为其快速紫敏感的特性枕而倍受青睐将，1993总年Hara友sawa据R[20]专等人将PC腥R用于CP先V的基因组马检测.Mo移chizu蝶kiM[玻21]用P听CR.病毒佳分离与HA句/HI等方碍法检测粪便党中CPV并巴比较结果，镇表明PCR津方法与用M影DCK细胞篇分离病毒的悄敏感性相同宝，比用CR上FK细胞分诸离和HA试搁验敏感。随赞后人们为了涨提高PCR抱反应的敏感晴性或特异性肠，建立了套趋式PCR、堤降落PCR喇等改良的P窜CR方法[往22，23洪]。人们在掏将PCR方埋法用于检测赔粪便样品中熄病原时发现家粪便中存在夺的抑制物质毙使PCR出喊现假阴性结超果，为了灭猜活或除去这踩些物质，可鸽以采用直接铲稀释法、改呢换不同的耐贝热DNA聚界合酶、离子给交换层析法夺和免疫磁珠畅吸附法等[嫌21，24骄，25，2例6]PCR毙技术是美国梢PE-Ce们tus公司堵人类遗传研瑞究室Mul姥lis[2杨7，28]飞于1985包年发明的一方种DNA体唇外扩增技术纹，此技术可该以在儿个小颤时内将极微己量的目的基亮因DNA成处百万倍地扩弓增放大，并拆能够特异性素地扩增任何午所需要的目刮的基因DN展A片段。P梁CR技术开丈始时是手工羞操作，在不鲁同温度的水士浴中往复进逼行，198塑7年逐渐制新成了自动操额作的装置，裤现在已发展穴了适合多种盏不同用途的奥仪器.19胡88年Sa婚iki发现刚耐热DNA酷聚合酶[2岭9]，PC链R技术逐步处进入应用阶脆段。我国的眨毛裕民也于做1988年口开始耐热D蓄NA酶的研蚂究，同时我转国多个实验瓦室进入应用吼研究[30跪]。PCR炊技术首先应虾用于人p一伙珠蛋白DN蚀A的扩增及扁镰刀状红细垮胞贫血病的工产前诊断[盼31]。P紧CR商品试腊剂盒的出现防使PCR进排一步自动化刊，因此应用友更广泛，但限是准备样品搬也是一个耗竿费人力的过酬程，Jun压gkind余[32]介奸绍了一种样额品处理的试将剂盒COB洞ASAm汗pliPr灾ep，试剂拾盒能使核酸兼自动释放，诊用特异的探鸭针捕获靶序牺列，核酸探乐针是通过生热物素一抗生止蛋白链据临睬床观察，对浊于呕吐的治居疗，确诊为武细小病毒肠押炎早期的，腥不应盲目止衬吐，而应在幼其生理条件茎可以承受的拍范围内任其脑呕吐，因为筒呕吐是犬排搭毒的一种正华常反应。若涂呕吐频繁并乓且较严重时叶，临床上用蝴于止吐的药机物有胃复安童，吗叮啉，墙爱茂尔，维系生素B6凡，氯丙嗪和样阿托品等。善临床实践得赖知，对胃肠若呈空虚状态该的犬呕吐，辱尤其是伴有敲出血性肠炎早病征的呕吐粪，临床上宜俩选用促使胃普肠活动静止许下来的止吐甲药，如爱茂广尔，氯丙嗪捡或阿托品。脾这些药的单伯独应用或对甩顽固性呕吐记的联合应用呀，一般均可迷获得可靠的刑止吐效果。弓若选用胃复伍安或吗叮啉斯等胃动力性功止吐药，不鼠仅止吐效果浇不确实，而谎且其促进胃算肠正向蠕动布的药理效应槐往往致肠道末出血加重。积维生素B春6在人医腰用于放射病光和抗癌药引则起的呕吐或怨妊娠呕吐的芹辅助治疗。莲其止吐作用絮认为是维生惕素B6能够普促进氨基酸锹代谢，而氨熔基酸可刺激偏延脑催吐化介学感受区引秤起呕吐，故银可用于此病忆的止吐。与滨其它适宜的搂止吐药配合画使用，效果徒更佳。腹泻夫：腹泻多在偶呕吐1～川2天后发咱生。早期表遮现粪稀软，集不久转变为狡稀水，并带蹦淡粉红色。获约在腹泻出招现2谋—机3天后，喘即发展为西尺红柿汁样的汤暗红色的腥浓臭血便，并现经常在临床嚼检查肛门插锯入体温计后样立即出现。回对于腹泻的此治疗应着重康消除肠道炎全症，减轻肠每蠕动防止脱于水。在消除眼胃肠炎方面斤除应用抗犬深细小病毒血盆清外，一般闸临床上应用值氨苄青霉素设，庆大霉素学或卡那霉素香，配合应用旧维生素C域，以及早期鸦应用适量的狮糖皮质激素尼，即可获得后满意的疗效魔。临床用于腿腹泻的抗生艳素有氨基糖白苷类，氯霉那素类，四环得素类和喹诺悼酮类，对革浪兰氏阴性杆要菌具有抑制绝或杀灭作用际，故在治疗狐单纯性腹泻洗是可选用的气。但当腹泻饼发展为出血喊性时，则不勒宜选用，因鞋为能引起红拴细胞生成受魄阻和血小板绢减少，加速臂便血症状而哄不利于止血腹。当腹泻伴粥有频繁呕吐拘症状时，不养应选用对胃锈肠粘膜具有裙较强刺激的嚷，易引起空蛾腹病犬恶心尾、呕吐反应卵的土霉素和寺四环素，否宅则将会减弱浸止吐药和止浇泻药的疗效塘，促使病状弄恶化。喹诺挑酮类药虽疗饿效显着，但停因口服给药旋会诱发呕吐辩，则不宜选牢用。所以，厚对腹泻症状亭的治疗应选演用氨基糖苷迟类抗生素，裳如庆大霉素继，卡那霉素态或小诺霉素程等。给药方念法以肌肉注沙射或静脉注忙射较合理。垦临床证明，匆即使对于严增重的肠道感郑染，在应用舟氨基苷类抗乳生素的同时的，联合应用阴广谱半合成突青霉素及短较期应用糖皮摆质激素如地丹塞米松，可膨获得良好疗傲效。适时应偿用减缓肠蠕乖动的药物如补阿托晶(一我般用药1纽～2次)躺，腹泻症状刘即可得到有开效控制。便穗血：血便表暑现为粪便呈鸽较典型西红萝柿汁样、有军特殊腥臭味坟，往往伴有孙体温突然升建高，精神萎意顿和心跳呼朴吸加快等症肌状，表现为杀病情比较严眨重。治疗吧上，采取治却疗腹泻和止鬼血的方法。聋病初宜较大撑剂量应用止授血敏或安络榜血，以加强工血管壁的正冷常结构，加估速血凝过程盯。随着病程脏发展和治疗适中抗生素的师持续应用，照由于肠道壁塔受抑制，内啦源性维生素急K合成相减少或菌素昆结合在磁珠井上的，靶序转列一旦被磁各珠捕获，即慎得到提纯。碑这一过程使若常规的样品劝准备时便间减少了，拌现在PCR观技术甚至己技经发展到使砖用机器人操速作的水平。堡PCR技术狸的改良与发族展必将极大悄地推动跨世递纪的人类基稿因组计划研蔽究的顺利进指行和提前完啦成。根据应选用目的不同惯出现了许多盒改良的PC阵R技术，它厅们包括:联申合PCR.穿套式PCR肆、免疫PC士R、原位P辫CR、定量黎PCR等。语联合PCR歪(mul值ti-PC哈R,mPC起R)是在一期个反应体系絮中加入多对辰引物对多个辣目的基因同勇时进行扩增鹿的试验方法缘。联合PC细R能够捕获坟更多基因信闻息，使应用乓范围更加广伶泛，分析的钓基因更加复啦杂[33]酬；套式PC慨R(ne神sted饥PCR)是章用第一套引奥物扩增15落-30个循赏环，再用第担一次扩增D迅NA片段内线设定的第二锯套引物扩增漂15-30书个循环。此新方法比常规短PCR方法画吏为特异。雁套式PCR魔可用于更微艺量DNA的昌检测。特别装适应于环境窑样品中微生翼物检测和单锅拷贝基因的芳扩增[34盐]；免疫P待CR(im燥muno-奋PCR)是饮将抗原抗体餐反应与PC庸R技术结合慢起来以检测匀微量抗原的携技术，比E尚LISA敏喉感105倍泄，因此免疫骂PCR具有顿非常广泛的厌应用前景[陪35]；原臂位PCR(稳insi凯tu-PC僻R)自19肃90年Ha精ase[3抚6]等人建碌立以来发展终得很快速，求它将PCR市技术和原位粉杂交技术结榴合起来，既械可以检测出滤低拷贝的D滩NA或RN尖A，又可特尾异地确定其侨细胞来源和舞细胞内定位翻；定量PC汗R:由于P国CR扩增在男某一特定时滚期的产物呈哪指数增长，粪那么最终P叉CR产物与进模板量直接抖相关。人们极利用这一特耳点进行模板才定量。此技淋术的出现使挥极少量的R腹NA定量成患为可能，为佳基因表达的睛调控研究提嗓供了很好的模数据，也使杰一些与基因威数量有关的苦疾病被人们懒所认识[3窗7]。这些染改进的PC掏R技术，大例大提高了实凡际应用能力翁，促进了分移子生物学技假术的进一步匠发展。由于诚CPV～2封、CPV～牌2a和CP龙V～2b三枝种抗原型之良间的差异主答要存在于基共因组308寿7～445廉1之间8个艳点突变，本只文所设计的钥引物位于2茧023～2彼470保守角区，为CP摔V～2、C揪PV～2a弓和CPV～册2b三种抗允原型的通用沸引物。该引徐物从犬五联旬疫苗中只扩顶增出CPV医特异性基因葬片断，没有瓶扩增出犬瘟曲热病毒，犬学腺病毒台Ⅱ践型，犬副流扶感病毒的基牲因片断，说迅明该引物的就特异性较强伪。将粪便上息清液稀释1尘000倍以鼠后仍然能扩赞增出CPV篮特异性基因惭片段，说明另该方法具有俊较高的敏感阻性。在对临且床病料检测驴时以粪便上若清液作为模疮板，只需一孤步煮沸过程渐，省去了普怨通PCR反豪应时DNA拿提取的繁琐租步骤，不仅返节约了试剂糖，降低了检副测成本，而界且节省大量产的时间，从悲而使整个检汇测在2．5影h以内完成辩，达到快速功检测的目的服。削1.7治踪疗方面蜂现有的治疗亏细小病毒的疾方法主要为刑对症治疗、析特异性疗法远及支持疗法女。睁跪对症治疗瑞呕吐：呕吐县是此病的主冬要症状，呕距吐物可能是元食物或无色便粘液或混有卡少量粘液的做清水。-饺11--阅停止，且因藏消化道出血混又极易造成截血浆中诸多扬凝血因子的毁丢失，故止拥血治疗中及缸时运用维生交素K促娇进血浆凝血巩因子的合成分，尤为必要送。对出血症遗状持续较久惹的犬，配合修应用氨甲苯踏酸撒或止血环酸兄等纤维蛋白内溶解药，会括协同上述止功血药的药效使，加速凝血宝过程，达到饼止血目的。映在治疗中，嘱必须适量补奴充葡萄糖酸谎钙和维生素泰C，对于拖降低消化道娇粘膜毛细血马管的通透性当，涝提高止血药筑的疗效，促盛进消化道粘沃膜损伤的愈贴合，具有十冒分重要的作准用。脱水：吹脱水是呕吐夏、腹泻及便送血发展的必抵然结果，也些是病犬死亡盛的主要原因寨。其症状主耀要表现为眼完窝凹陷、鼻拉镜干燥、皮辟肤弹性减弱盟、全身衰弱选等，多数病谋犬渴感明显保。治疗上，酿最有效的方匀法是静脉输轨液，尽快补颂充丢失的水玻与电解质。终临床上常用狠的体液补充糖剂有葡萄糖柔、左旋糖酐塑、生理盐水厦或复方盐水妈、氯化钾和亡NaHC染03等，治楚疗时应注意昨糖盐的输入许比例，如病汗犬渴感明显曾，可将5施％～10％泳葡萄糖和复救方盐水按兰2：1比治例静脉输入难，输液量一易般控制在调50～10忌0ml／k妄g。注意，颂静输的葡萄筝糖浓度不能后过高，否则效体液会向血诸中转移，造轮成水分自肾绝排出，加重绵脱水。经两绢次输液，若宽脱水症状仍背未得到纠正裁，且病犬无亏饮欲，此时志应选用10孤％的Na斑Cl溶液的以增加有限君输液量中读NaCl烈的绝对含量食，可提高细派胞外液的晶勒体渗透压，悟扩充并维持京有效循环血仿量。此时，谷病犬脱水状秧态多可得到溜改善。同时妖应注意病犬匆钾的补充，溜由于病犬呕灿吐腹泻，可激导致犬体内棒钾的丢失，拥而病犬通常孩食欲废绝，耻钾的摄入量纸也下降。在好一次大量补标充无钾液体激时，则易很彩快促进低血照钾症的发生拜。具体应用榴时，在每捆500ml膝输入液中笼最多加入环10％KC激l溶液南10ml，载不会引起不哥良反应。在伪纠正脱水状泻态的同时，夹应注意是否袋补充Na扮HC03。镜如病犬持续既腹泻，可造刃成大量碱性渔消化液的丢炕失。机体丢染失NaH蝶C03过多著，易引起代哲谢性酸中毒宇。如频繁呕此吐则造成胃归酸的大量丢固失，引起代宿谢性碱中毒更。此外，低充血钾也可促剥进碱中毒的骡发生，故对痛犬细小病毒依性肠炎的治秤疗是否需用邪NaHC堡03，应对狸具体病例而益定。最好根累据犬呕吐和逢腹泻分别发幕生的时候，蹄次数及呕吐盈物和大便的慰数量作出估砍计。实践证胶明，对患犬漆细小病毒性末肠炎的大多奏数病例，在座采用上述各浩种用药方法谊后便可好转常，之后，输碍液中加入适炼当剂量的铜NaHC0植3，对促进顷病犬完全好稿转和食欲恢菜复具有非常生有益的作用驾。在输液过骆程中，一定售要掌握好速彼度，输液速哨度与本病的轮康复有一定乔的关系。一什般3月擦龄以内的犬流50～7盲0滴／分布为宜，4～还6月龄病腔犬以60～抢90滴／沃分为宜，6燕月龄以上卸的病犬以1仁00滴／匀分左右为宜富，对于体质朗虚弱的病犬淋，输液速度忽尤应注意，势切忌过快。艰其它对症治悉疗：如呕超吐可用胃复次安注射液喘0．5mg沃／kg，肌从肉注射，每椅日3次鉴，呕吐严重推者可加大用讽量为了补充谣营养，适当察增加葡萄糖醉的用量，每剥日5g/繁kg。必要福时可静脉注务射复方氨基所酸注射液介20ml/攀kg，适当百增加一些能础量合剂，以诉促进能量的腿转换及利用桥，以及促进桨蛋白质的合巾成。酷征特异性疗封法支对于病毒性某疾病，最根国本的是使用劫特异性抗体茶进行治疗，击临床观察表陵明，CPV雪单克隆抗隶体，特异性障好，抗体含嘱量高，针对项性强。临床总应用效果显程着，试验证手明，在足量奔注射犬细小嫩病毒单克隆熔抗体8耽小时后，收岛集粪便电镜朴下观察，仅达见有连片的妈病毒颗粒。仰而五联血清诉就其含有的响CPV球效价而言，婆要比单克隆免CPV旧抗体低1酒—叉2个稀释绪度，因此效俘果稍差，如扩病犬有其它滋病毒（如瞎CDV）混召合感染时，现使用五联血疏清则起到了穴抗多种病毒肯的效果。临魂床上抗体的师作用强调用箭药时机，C晶PV感染低的早期，使周用抗体治疗互，效果尤为损显着。因为帮抗体主要作皇用是产生体右液免疫，不恰能跟踪病毒捎进入细胞内回将其结合，灿所以临床上纹主张早期应或用。而且随超着治疗天数截的增加，在董单抗或五联乌血清使用一卵个疗程后，月应配合应用弊干扰素，胸束腺肽等细胞暂免疫促进剂她，效果应更节为理想。董术支持疗法侮清理胃肠道葱：患犬细小唯病毒病的犬灿，清理胃肠忌道尤其重要昂，因肠道脱缎落物是细菌火繁殖平最佳场所，起不及时清理流，吸收入血渔，发生脱水以性和中毒性者休克。方法薄是用1：纽5000跌洗必太溶液乘进行灌肠，肌用量视犬体征大小而定。坐一般在2道0、30m抖l／k9。犁提起后驱，寨将(人)用蛙导尿管(也便可用输液管引代替)缓缓尼送入直肠，寄最后通过直锄肠狭窄部，术灌致病犬从车口中呕出为称佳，每次灌慢完使犬排泄惜，直至再没主粪便，血污宿或肠粘膜排仇出，若不能株从口中呕出禾时，可将灌姜肠液从口中家服30，挎50ml(僻小大酌减)史。若无洗必煎太亦可用修0．9％的舅生理盐水灌说洗(需稍加危温)。输液续：输液对彩于治疗本病惹至关重要，谢严重的腹泻亏，便血及呕鹿吐很快导致雹病犬脱水，志酸中毒乃至形休克。输液俊量可根据脱何水的程度来野确定，轻度妙脱水为5抚0ml／k初g，中度脱级水70m巡l／kg，叫重度脱水互馒00ml治／kg，临敞床可根据病冷犬心脏情况衡，以上三种效程度脱水酌祸加或酌减势10～20白ml／kg轧。液体以等照渗为佳。处信方：平衡液唉0．5％争葡萄糖氯化皆钠溶液或用椒0．9％忆氯化钠溶液食及5％葡萄青糖溶液各占汇50％，并葛加入其它药似品，如维生狡素C50～露100mg丈／kg，维突生素B1驳50～10锡0ml／k擦g，以及其浇它辅助药品长缓慢静脉输墨入，每日郊2次。抗兰菌消炎：为双了防止因机己体抗病力降踢低，引起的傅继发性感染村，在清理肠仔道后，可用撞吡哌酸(氟葱哌酸10溜mg／k9金，每日3壳次，7d扰为一疗程从；或用庆大振霉素50索00U／k忧S内服，清每日2次枝，2～5d伪为一疗程啊：在静脉输忙液时再加入翻氨苄青霉素姓4万单惭位／kg，句每日2扶次。或小诺馆霉素3～堂4mg／k汇g，维生素翻C0．1柄mg／kg处,地塞米松铲10mg烟／kg。同渐时，还可以忆肌注50布％普杀平0喊．1ml／窗kg,或蚁20％氟哌距酸0．2熟~0．4m优l／kg。校止血：在清驰理胃肠道的纺基础上，可锋内服云南白址药0．1构g／kg，央每日2／隐u3次，组连续应用-唤3底—劈5d。也可惠选用止血敏械0．5～榜2mi，肌饺肉或静脉注袍射，每日撒2次。或纱肌注安络血皇10～2揪0mg。抗卫休克：病咬犬严重脱水漫时，四肢及逗各末端发凉莫，齿龈微血阅管再充盈时插间延长时，苹即意味着休吉克，此时补纳充血溶量和索应用抗体休反克药物为当赖务之急。可俯选用去甲肾庭上腺素0别．5mg，想或复压敏摧5mg，或拥地塞米松国3～5mg纪／kg，静涉脉或肌肉注灾射。当脱水市得到纠正，模血溶量补足骑以后，可选虾用扩血管药谦以改善微循坛环。如6司54煤—菊2，肌肉或杨静脉注射处1mg／k寿g，若不见盒好转，30艳min后剥再重复注射场一次。辜抗酸中毒：图患犬精神忍沉郁，口流培粘液或发生埋休克时，容勒易导致酸中野毒。一般应安用5％碳龙酸氢钠注射归液8~1箩0ml/k晕g静脉输族入，每日异1~2次膛，以调节酸门碱平衡，预摆防酸中毒。绍在纠正酸中衰毒的基础上鹅给予适当的仰多巴胺，对披增强心肌收妄缩力，增强湿心脏排血量龙，升高血压罪，增加肾小赢球的滤过率逗，对改善微宁循环，抗休字克均有重要李意义。部护肝：为保唉护肝脏和预蓄防心肌炎，裤可在糖盐水浆中加入A桑TP20m明g,辅酶纤A100~纸200mg浓,或肌苷练200~6状00mg航静注。扰输血：以做病初、中期仗为输血最佳雄时机。但临差诊多见已是谷中期或中后燕期了，病犬很表现精神不苹振，喜卧，独体温升高或盛处常温，食庆欲废绝，呕痛吐，粪便稀耽软带多量粘卡液和血(黑趴红色)，病皆情较重时，喜排粪如水注街，早蕃茄汁改样，腥臭难涝闻，心跳加体快，呼吸困杯难，此时采掠用输血疗法凑配合大量补阿液、抗菌，斯止血治疗也贞可收到满意有效果。当患疫犬体温下降顷至36饼摄氏度以下终，机体高度幕衰竭，体表罚静脉塌陷，欣甚至无法进爽针，输血也客难以逆转病馒程。(1)队供血犬的选泄择两病都要慰相应的康复蝶犬做供血犬教，犬细小病域毒病亦可用烈患犬的母犬屡供血。前者盼供血犬的血斥与受血犬的唐血必须相合饺(相合血)接，即供、受姐血犬一方的破血清1伯滴在玻片上救与另一方全印血1滴确搅拌后不产茅生血凝块。南后者因有血坡缘关系，可迫不用做相合映血试验。(怀2)采血方导法采血用命消毒注射器搜先吸取抗凝陵剂(4％枸乌橼酸钠)1兆ml,然后纠从供血犬静懒脉采血9栋ml,1男次采不够可酱重复多次采誓。采得的抗踢凝血立即注练入盛有5哑％葡萄糖盐巧水(约1隐00～20兰0ml)瓶疮内，轻轻摇铁匀并加入毯1～2ml穿(5~10塑mg)地塞纤米松，以防洞发生过敏，洲即可供输血误。一般是现傲用现采血，类也可冰箱股4~8摄劲氏度存放层24h,不锦会丧失其理蔽化及生物学对特性，仍可迁使用。(3悦)输血量和啊方法：一般哲每kg敌体重输血吵2ml,输抱血量宜多不芦宜少，1垃次即可，严晶重病例可重赏输1次杨。桶本实验的目槽的在于对临盆床所见C蹲PV进行枕正确诊断并境提出合理、伏有效的治疗郑措施献2材料与室方法软2．1调爆查资料屯2007辟年8月张至200护8年1东月，在宠任物医院实习连阶段，正值汉秋季犬细小担病毒病高发聋时期，毙参与诊治了蜜106葱条疑似腹泻盆与呕吐病犬伞，其中6翁0条疑似宇为犬细小病滋毒病，为实筒验提供了依我据。凶2．2实值验材料尖2．2．1吹实验动物组2．2．1障实验动物表实习期间诊汽治的60锤例呕吐和扬腹泻的疑似懂为犬细小病哄毒病的病犬价2．2．2睁实验仪器帜区.1韩国碑SDC污PV酶标狼试纸条去STAND消ARDD凑IAGNO刻STICS愿，INC骑，CAT字．NO．：辜80FK2蜂0销—侵10外—誉1，EXP秆：2005妨—宗12碎—梨04帐组成：1哨试纸条+1猪微量塑料直滴管，真空稼包装*20司2.2.滴2.2混聚合酶链扎式反应PC冲R芹(1)S定epaGe蚁ne核酸提阿取试剂盒(赵购自三光纯贺药株式会社娘)萄TaqD奔NA聚合酶仙、MgC1祥2、dNT貌P、10短×歼缓冲液(均错购自南京天粗为生物科技戏)够。庙(2)引物美设计称根据Gen辽Bank中恋已发表的C梅PV基因序福列，采用多幼重序列分析磨软件进行核参酸同源性分阻析，选择基就因保守序列穗作为PCR膝扩增的靶序徐列。自行设弃计引物如下歼：誓PI:5烂恳’菊一TA奋CCAT崖GGTAC胃AGArC珍CAG一3员'坟P2:5英港’仰一C端TCCTA蜓TATCA差CCAAA衔GTTA一汤3'圣以上引物由植上海生物工椒程公司合成盲，并在P,抱5'端标恐记生物素，旷由此引物扩链增出来的目突的片篇断为226发bp市御.3酶联条免疫吸附试秃验ELIS柱A这部分是你诊断的依据和方法这部分是你诊断的依据和方法涂3实验结衬果滤3.1不饿同诊断方法常对犬细小病交毒病的诊断燃结果（见表碗3）湿表3不肌同诊断方法问对犬细小病鲜毒病的诊断扑结果炎诊断方法鞋检出率准沾确率假阴草性率假阳冲性率辽PCR7剧6.69真5.74问.37.隶7架ELISA恐809绞1.58管.538帅.5爽胶体金试纸匙条86.某789.馒310.荣676.顽9片血凝抑制试肯验100德93.6胖6.4亭23滴由表3的聪诊断结果可租知，PCR贡方法诊断犬变细小病毒病狮准确率最高态达95.7朵%，而检出慨率却殖最低，只有宫76.6%淘；ELIS疮A方法诊断病犬细小病毒瑞病准确率9摄1.5%，脉而检出率为架80%；胶请体金试皆纸条诊断犬痒细小病毒病蠢准确率达8秧9.3%，范而检出率达旧86.7%耳；血凝抑制债试验诊断犬为细小病毒丽病准确率9及3.6%，档而检出率却帜最高达10紧0%。由此赵可见最佳诊嫩断方法依次悦为PCR、而血凝抑制试禁验、ELI做SA、胶体价金试纸条。病3.2实秩验犬血常规武检查结果衣采集临床诊打断为犬细小虑病毒病的病且犬的末端血骡，作血项分及析，结果见触表4。识表4患多犬细小病毒颜病犬血常规揪检测结果丛动物号白银细胞屈数分类（109咱/L）中享性淋巴慈单核嗜酸亡嗜碱1（娃娃）2（欢欢）3（沙沙）4（欢欢）5（咚咚）4．576．802．651．861．62686052615926172119270124171000700000谷早期病犬白钩细胞数均有嘉下降，但到召晚期，白细停胞数下降至疗1.62答×吐109忘/L，说明爹犬细小病州毒病实验诊钢断一项重要土指标，主要盖表现在白细僚胞明显减少脾。-22桥--愿3．3临冤床个案病例拍治疗结果卷3．3．1灰娃娃榨使用对其方输法治疗3演天，在治张疗期间，病希犬精神仍就赠良好，对其傻进行粪检，瞒发现便中肌的血丝是由典于该病犬还跑患有有蛔虫众，进行趋虫彼后，体温逐抵渐恢复正常皂，所有进院志时病症完全男恢复正常。劣使用CP江V细小病慈毒试纸条为封其检测，检其测结果为阴辱性。于是确瓦诊该病犬治慈愈康复出院。肃3．3．2贺沙沙蓄使用对其方清法治疗3欧天，在治映疗期间，病苍犬精神仍就菜良好，体温缝有所升高，报鼻镜有清水拐鼻涕出现，孔并伴有轻微唱咳嗽，对其废进行（10既%NaHC铅O3）气雾粥治疗；2淘天后，所有狐病症完全取恢复正常。席使用CP屈V细小病义毒试纸条为机其检测，检买测结果为阴赶性。于是确诱诊该病犬治信愈康复出院。躺3．3．3锄欢欢洒使用对其方川法治疗3阅天，病情亮没有起色，渔伴有低热出马现，有犬细港小病毒病中辆期转入晚期认，匀脱水严重，孤食欲完全废毅绝，呕吐红滴色泡沫样稀妹薄液体，拉少稀呈西红柿嫂酱样，腥臭内。采用输血惰之后当晚高够烧40．裹2摄氏度片不退，凌晨屈死亡。竞3．3．4碑咚咚吓使用对其方原法治疗3谷天，病情廉没有起色，乐脱水严重，抢食欲完全废霞绝，呕吐黄盛色泡沫样稀榆薄液体，拉装稀呈西红柿摘酱样，腥臭勒。血管塌陷赌无法输液，敬主人要求给恼于安乐死。判3.4患首病幼犬临床辅病例整体治宿疗结果（见比表5）佛表5患劣病幼犬临床急病例整体治涉疗结果照犬名发病沉天数临床坏诊断阳性数例血清学诊逗断阳性数份治愈数孝莎摩犬（白更）宅比雄犬（白滑）金毛猎犬婚迷你笃宾（押黑）垦英国可卡（即棕）西施（黑）222114841012384812363712身2-19边--声呕吐物为未狠消化的食物亩，精神良好匠，触摸肠道烤阴性，鼻镜重干燥，皮肤常弹性一般，拴根据临床症裙状，初步诊江断为犬细小糠病毒病肠炎框型，使用纵CPV细太小病毒试纸亦条为其检测川，检测结果骄为阳妖性。确诊为辣犬细小病毒震病。搞治疗方案（径住院治疗）韵：盆①船0．9%携Nacl桃50ML冠，胃复安朗0.8ML身②根5%GN级S50毫ML,球蛋头白1支桶③冷复方盐水涝40ML吸，654-卡20．5稠ML，DX过M0．5复ML，AT习P+COA鞋各1/富2支蔑④在乳酸格林如氏液10岗ml,头胞叠色污钠1麦g汇⑤尊5%0．隔9%GNS刊10ML乖，VB6短1ML称，VC1态ML第⑥确止血敏隶1ML肌屋注醒⑦系干扰素枯1支⑧止吐灵什⑨剪单克隆抗分体15M城L肌注芦⑩风口服双黄脾连0．5转MLBI会D换2．4．1够.3沙沙淡（吉娃娃）韵2007董年10唇月25胀日，本市陈兴先生送来侧1只病犬差就诊，为哨3月龄雄预性0．5板kg吉娃颜娃犬，组陈先生主诉沟：沙沙购回歪7天，莲从前天开始狐出现呕吐，兴昨日拉一天兰软便，有腥散臭味，今晨出现倒地。耗检查：倒地帝无力，体温盏37.1艘℃伐，脉搏1狮30次/蒸分钟，呼吸塔30次斜/分钟，大大便呈淡黄色尽，佛有腥臭味，惩精神良好，鄙鼻镜干燥，越皮肤弹性好榆，用CP肠V细小病枝毒试纸条为健其检测。检恭测呈采弱阳性，即微确诊为犬细坐小病毒病早卖期。膝治疗方案（则住院治疗）容：蜜①逗5%0．里9%GNS踩10ML凝，球蛋白漆半支凯②仔复方盐水筝10ML，载654-2助0．5M捏L，DXM洗0．5M责L赖③倍利巴韦林注0．5ML赴④删胃复安0防．5ML支肌注晚⑤徐单克隆抗体抱2．5M焰L肌注头⑥卧转移因子孕2．5ML僚（3丘μ无）BID站肌注藏⑦坊口服双黄连袄0．5M唱LBID妨2．4．2症犬细小病默毒病晚期病亩例治疗-牺24--诊断结果和治疗方法诊断结果和治疗方法4讨论尺4.1几阵种诊断犬细俯小病毒病的爽方法效果分喂析云料PCR遮技术诊断犬滥细小病毒病脱效果分析浓PCR技范术具有操作浮简便、省时它、灵敏、特阁异等优点。蜂目前，PC砌R技术采昌用耐高温的尘TaqD神NA聚合它酶，并且在牵有计算机控滨制的DN栋A扩增仪贼中进行，使花操作大为简酷化，一次加趟入的晨酶即可满足在反应全过程离。DNA颜扩增仪能自绘动迅速升降丹温度，只需索把反应所需久的全部材料屈混匀，唐置入仪器内缴，反应便依们所输入的正这确程序进行迁；应用T执aqDN摔A聚合酶烧时，单核苷妹酸掺入速率时较高，75尽-80旦℃偶时，每个酶尤分子每秒钟粗可完成1亩50个核若苷酸的合成对。PCR夫每一循环需道数分钟，摧所以，一般粱常取用2妨0-30玻个循环能使准目的DN胖A达数百随万倍扩增的妄反应只要樱1至2馅小时即可袋完图成。在基因拉分离、突变可体构建、D量NA测序瓦等方面，P傻CR方法群均较之常规槽法快速得多融；PCR锯产开物的生成是疏以指数方式减增加的，所乎以欲扩增厅pg量级养的起始物到迎ug水猴平或放大真酷核细胞单拷贩贝基因，通凑过PCR副方法都是梳不难完成的霜。PCR腰方法还可用指单一双倍体鼠细胞、一根窗头发、甚至爬单一精子进劣行DNA轨定型；作酸为引物的寡旋核苷酸与模绣板结合的正涂确性是决定畜反应产物是粉否特异群的关键。T蛙aqDN跳A聚合酶输耐高温的性千质使反应中蜘引物与模板爆退火的步骤摸可以在较高使的温度下允进行，结合灶的特异性大辱大增加，被塞扩增的目的宝片段也能保馅持很高的正烫确程度；另预外，5、对承原始材料质线量要求低。局由于PC安R技术有违较高的灵敏膝度和特异性号，故仅含微挂量（pg，云ng）的目攀的DNA咐的粗制品梨或者总R矮NA，就可肤以用作反应味起始材料来生获取目的产步物。部分降崇解的DN域A材恋料也可以通平过PCR王多次反应暂循环，最终汗得到所需的义全长DN逝A片段。置在犬猫病毒遭性疾病预防五中，允注射疫苗是雪一项重要的韵措施，并在桑疫病防治中饲发挥了很大刊的作用。但盖不利的是为杆利用血清学血检测方法诊宇断疫病带来档了困难。检香测出的抗体梦很难区别是窄疫苗免疫还仿是感染病毒怜产生的。因絮此，病原学免检测的重要拍性越来越受焦到人们的重绒视。扔多数PC想R反应中吐，对模板的尘要求并不严体格。首先，致对纯度要求冠不严，前人辆有大量的实烤验数据表明察存在一定量寻的蛋白质或喇其它物质，芽只要没有交企叉污染，则视对实验过程敬影响不大;释其次，PC授R反应中树模板用量很泳低，理论上隔102-104社拷贝的模板承可满足各种苹要求的P苗CR反应阵。-25层--鸦因此，用导PCR法炸作为检测工惠具，敏感性幅非常高，也聋正因为如此薄，PCR拿法容易出现缓假阳性问题肢。皆为了尽量避香免假阳性的渠出现，从实浆验条件到操蹦作上都要严慌格要求，例惧如，保持室洽内整洁卫生页，艺空气流通，根操作时配带蒸次性手套，泊使用一次性铜加样枪枪头哀，并对有关男器材进行严胁格高压灭菌梯。网另外，在每孝次PCR胃实验时，登设立阴阳性做对照，也是僚防止假阳性皂的重要措施顷。我们在检券测未知患粪便样品时照，有5圈个样品H产A法检为淘阴性，而读PCR法久检测为阳性屈，为了防止临PCR拼法的检测结脱果为假阳性榆，我们进行愉了重复检测茫，同时设立读阴性对照，粪反应结果一疏致。愧耗ELIS蔽A技术诊范断犬细小病夹毒病效果分嫌析咱与HA搅法相比，E咏LISA溜的准确度为牌91.5麦％，HA欢法的准确度絮为93.亚6%。对于绪强阳性和明坝显岂阴性的样品洞，两种检测三方法的符合析率为10鬼0％；而斜HA效价接为1：4爪0的1元0份弱阳诊性标本，述经试剂盒检蜜测6份糟为阳性，4刊份为阴性孤，并且这些新样品均为临竟床症状明显迅的晚期病例粗。分析邀原因，有以煤下几种可能浓：（1）C员PV主要进存在于肠粘脑膜上皮细胞键中，晚期病否例肠粘膜大简量脱短落之后，可丑能导致排毒很量减少[38]街；（2）发筝病后期，肠迁道中特异性问IgA认的分泌以及贱便血中特素异性Ig星G的产生据，CPV牙与其形成抗聚原抗体复合耀物随粪便排准出，竞争性闯地干扰了酶化标单抗的结合。就光免疫胶体葬金技术诊断醉犬细小病毒兔病效果分析江如表3所示玻，应用PC渡R方法和胶狗体金诊断试怪剂盒，PC里R检测方法催阳性率为7天6.6％靠，胶体金诊着断试剂盒检姥测阳性率为夹86.7％告。胶体金枣诊断试剂盒映的阳性检出竿率要高于P固CR检测方啊法，但这熊并不能说明魂胶体金诊断势试剂盒的敏愈感性高于P虚CR检测方隆法，临床治撞疗效果的追里踪调查结果氧显厚示胶体金诊缎断试剂盒诊苏断为阳性的咏病例的治愈如率高于PC缩R检测方法同诊断为阳性堆的病例的治毫愈切率，表明免耀疫胶体金试罢剂盒检测出缴的某些弱阳刷性的病例并粒不是犬细小滴病毒感染，兆而是普通的会肠炎，PC扯R检测方法溉的准确性高姑于胶体金诊抗断试剂盒，态胶体金诊断贺试剂盒存在视假阳性的现脊象。半这种假阳性挪现象的产生绞可能由于粪磁便中所含有嚷的复杂的成拐分有关(细妈菌、细胞碎罪片等)，这源些雅成分和免疫香胶体金复合里物或检测线而上的抗体之优间发生非特悦异性的结合仁，从而产生窑假阳性的信谅号；检测时骑间过长也会矿产生假阳性作的信号；为污了追求检测籍的灵敏度，笔必然加大检懂测抗体的用评量，但是假群阳性现象也岗会随之产生[39]狱。-26监--威互血凝抑制猫试验诊断犬纲细小病毒病利效果分析锡由于肠炎型器犬瘟热、犬庆冠状病毒、习轮状病毒感肌染，以及某劣些细菌、寄兼生虫和急性肯胰腺炎参也常呈现肠摄炎综合症，驴所以临床诊灶断并不能确虹诊犬细小病版毒病，确诊踏需要进行实瑞验室诊断。渔但是目前实浙验室诊断中垮HA要求红浑细胞质量较疲高，需要新燃鲜的猪红细坝胞，也可以坑使用猫或恒柏河芒猴红细胞，貌但是这些红猎细胞都不容修易获得，而夏且价格较为缘昂贵。况且谷有报道显示之有些毒株缺践乏HA活性烤，给该病毒屡的HA诊断酱带来了一定弱的困难[40]爬。HA方法技主要的缺点御是敏感性不致高，可喊能由于感染电犬的肠腔内渔的抗体吸附激到病毒颗粒倍表面，使H握A活性失活识，阻止了病铺毒和细胞受选体丹的结合，敏饼感性大大降丘低[41]。扫相对于传统碧的方法来说丈，PCR检孤测方法具有选敏感性高、形特异性强，筛操作简便、番快速等优棋点，在病毒口感染的早期话就能做出快敌速的检测，肯而且PCR拾检测方法所花需要的试剂肾都很容易获忧得，燕不需要免疫果血清学诊断浆技术所需要介的标准抗原作、标准阳性揭血清、单克店隆抗体等，舱在有PCR宽仪胖和电泳设备宁的条件下很弟容易推广应饲用.卡4.2.本怕试验设计品资种与年龄评雪价付叹在收冶的病撇例中，周岁破以内的犬及使纯种犬(如乔博美、可卡症、京巴等)旦易感性较高缘，杂交死狗的易感性尿较差，不同望品种的犬，绞易感性有明亿显差异。以刷大麦町、可肆卡的病死率挨最高，草狗邪、南杂交狗及牧列羊犬的病死捆率较低。从堤另一角度上络分析，博美这、可卡、京扛巴的发病数砌较多也与居叉民的饲养量徒有很大关系乘。航刮试验发现，或不同品种的续犬，尤其是岛不同年龄的车犬，易感性校有明显差异涉，主要表现辜在其诱感染率(犬追细小病毒快认速诊断试纸殿阳性率)和肌发病率的高掉低不同及其哪两者的关系瓦上可以看出泛，沈小于3月龄喷的病犬占发证病犬总数的庄32．94统％，而2远月龄以下的制犬很少发病得。这可能与贪2月龄犬蹦有特异性母钞源抗体有关纯。3功—汽6月龄病犬辩占发病犬总歌数的52．习77％，未可能是由于驳母源抗体降线低或消失而编自身的免疫陷机能尚未健秆全的缘故。志12月龄以男上的成年犬吗发病数仅占舒发病总数的奖2.04％槐，说明成兔年犬对该病虑有一定的抵高抗力。捏4.3本消实验所用的溜综合性治疗花犬细小病毒嫌病方案效果恋评价泊丘抗体疗法六对于病毒性和疾病，最根钱本的是使用陈特异性抗体匹进行治疗，盼临床观察表蚁明，CPV章单克隆抗灰体，特异性盲好，抗体含域量高，针对示性强。临床话应用效果显想着，试验证笔明，在足量阳注射犬细小诵病毒单克隆拼抗体8小时煌后，收集粪阶便电镜下观悄察，仅见有深连片的病毒银颗粒。而五洽联血清就其躁-23-侮-表5续久哈士奇（灰念白）博美八哥巴吉度阿富汗猎犬拉布拉多京巴不详1．51．531~3211322610813216861111585学合计60贫534窑3击对不同品种设犬收治，发期现大型幼犬谈患病数偏多叼，治愈数相桥对高，所选废择的治疗手章段有效。激3.5临挂床病例治疗质效果统计结虽果（见表扒6）醉表6临荒床病例治疗拾效果统计结逆果单治愈率%仙有效率%胞死亡率%方案一方案二方案三505565757080253020谜从上表中可桂知，单独使都用单克隆抗序体、干扰素帅治疗治愈率宵分别为50侨%，55%见，而同时应润用蚂单克隆抗体王和干扰素治耳愈率大大提妇高到65%税，说明综合即治疗方法有忠效。-2抖8--投出白色粘稠秆的液体或出极现干呕，到皆这种程度时敲，机体己接妖近衰竭，而咏且呕吐使胃够酸大量丢失毙，婶肠道发生变懒化，本来肠宰道吸收功能鬼已经接近于细零，这时又乐丢失大量体土液，致使机季体出现脱水坝，纳酸碱平衡失牺调，严重呕妈吐可导致机胁体代谢性酸巾中毒。另外蝇呕吐是胃道天逆蠕动的结聋果，有时小颠肠液或胆汁届逆流到胃，券也极有可能植通过十二指航肠，胰腺开帅口进入胰脏寺，小肠液中属所含肠肽酶宏能激活胰蛋师白酶原，引捕起胰腺组织船自身消化，句引起胰腺炎猪。腹泻也落是病犬主要畅的临床症状准之一。腹泻蒜是机体体液暂渗出，稀释害异物，并将荷其排出体外红，是机体的打保护性机能勤的体现，临延床上不能盲丧目止泻，应逗注意把握时贺机，并配合魔灌肠疗法，降以求取得止挎泻，排毒，善排泻的显着潜效果。此病驻例中使用了殊生理盐水和宏绿宁进行灌加肠，不但冲射洗了肠道，臭而且作为生梅物制剂的绿臣宁，它含有内十六种生物毁工程菌和十腐六种酶类，假对动物肠道平菌群的建立圾和重建非常恭重要，而且斗具有修复肠烟黏膜的作用车，使用此药嚼物灌肠，使拘肠道内环境吗得以改善，狸疗程缩短，错提高了治愈提率。若无条定件的情况下承，也可以用赠生理盐水和枣碳酸氢钠，遇生理盐水主政要是作为药住物的载体，皂起到冲洗肠三道作用，碳历酸氢钠则用趣于维持肠道市的碱性环境闹，补充机体振损失的碳酸挎氢根离子，翠但对促进肠常道正常菌群夺的建立效果笼不大。临床洋上的灌肠同干样具有危险束性，采用何逢种灌肠，对扇于不同个体仰来讲有所区已别，临床上项根据病犬所锹处的病程不幼同，以及它社对灌肠的承炉受能力的差舌别，再依据镰病犬排便的仪间隔时间，遇便的颜色，编软硬度以及缘它的精神状捞态，心脏的颠负荷能力，关整个肠道所竭处的状态，罚选用适当的凯灌肠深度、弃用量、使其妨更加安全有啄效。述输液是犬细皮小病毒治疗友过程中普遍骑采用的方法萝之一，由于愁病犬饮食欲狸废绝，机体肆所需抬的水分，糖牲，脂肪，蛋努白，维生素球，微量元素漆，矿物质等塌均不能由肠望道吸收获得芒，而且还在鸦不断丢失，岁因此只能通亦过输液的方质式补充机体朴所需物质。鹿同时病犬由河于呕吐，腹屈泻也损失了临大量的体液相、电解质，枕导致机体代塌谢紊乱，酸注碱平衡失调阔，因此补充粥体液是必不时可少的环节宣。劳乳酸林格氏蓝液的成份是席0．05郑％氯化钠，垃0．03％姻氯化钾，0穷．033％役氯化钙三种辽药物。它补邀充了由于腹坝泻，呕吐所嫂丢失的电解玩质，调节微先循环的效果翠较好。在补出充体液、离斜子的同时，诚补充一些葡骂萄糖，维持陷抗体的正常锁代谢机能，销促进机体的惭抗病能力，踪而且能够起蒜到促进肝脏皆的解毒功能府以及肾脏的放排毒功能，角而Vc膜具有促进细灿胞的修复，闯止血，解毒疮等作用。临岁床上肝补液疗法，务是补充机体万所需水份，冬维持生命所搅需的能量及防无机盐的重片要手段，可盏为治疗病犬驶争取宝贵的积时间。在输籍液过程中，貌一定要掌握朋好速度，输养液速度与本气病的康复有故一定的关系因。茫一般3锤月龄以内的多犬50～死70滴／程分为宜，4破～6月龄妖病犬以6案0~90跃滴／分为宜金，6月龄壤以上卫的病犬以锅100滴淡／分左右为掠宜，对于体神质虚弱的病圈犬，输液速带度尤应注意尾，切忌过快捐。洋烟其它应对飘措施的评价隆-29-买-屑治标、治本灯的药物临床唇上配合是治绵疗细小病毒解的根本，但挡治疗上还应抛配合对犬的悟护理，朋病犬的整个某消化系统已佣不能接受任铸何食物对病职犬所产生的女不良刺激，言这是因为食贷物进入胃肠幸后不仅不能寸被消化吸收隙，反而会发梳生腐败，加益重胃肠负担圾，加剧损伤赚。因此，禁准饲是治疗犬驾细小病毒肠辰炎重要措施芳之一，使胃毙肠道得以安讲静休息，促闭进损伤的肠辆黏膜的修复衡。在病犬胃宋肠道已排空泽，呕吐基本园停止后，为物了促进胃肠使功能的恢复兼，可投微生亚态制剂如绿引宁，丽珠肠赌乐，整肠生溜和乳酸菌素坐等。顽愈后开始饲胸喂时，一般典先给予易消峡化的流体食锡物。如酸奶勤，营养米粉梦等。禁饲肉各类、蛋台及不易消化攻的食物。否稍则，会导致割或产生胃肠才道二次损伤童的应激反应渴。速冬天发病时气，患犬一定妥要采取保温卡措施，尤其蹲是处于休克沿状态的病犬予，微循环障慕碍，末习稍及表皮体卡温下降，如称不注意保温绢，极易造成胶冻伤。狸临床上往往善也会遇到较爪多危重病例暑，它们呈现爬不同的临床港症状，如体狠温高达4忽0摄氏度忆以上或低于晌37．5炊摄氏度，宾心率快或呈摩微弱的跳动焰，呼吸高度桶困难，而且御结膜苍白发扛暗等表猴症，表明机删体处于高度键的衰弱状态肯，生命垂危取，来不及拯别救。在统计伟的121溉例中，其泛中2造例是死于这冶种情况。临督床出现这种买症状，主要芹以吸氧为前讨提，先缓解夸它的呼吸困染难，保证氧炭的供应，稳朋定病情，注塔射肾上腺素介及解毒敏。徒在病情有所壤缓解，再采顶取其它的治争疗措施，据捡病犬主人叙蹈述，这样的高病犬往往是钱突然发病，永时间一般不华会超过2崭4小时，步突然出现呕暑吐腹越泻，可见精愿神高度萎靡葬，呼吸急促昏等。叛犬群暴发本营病后，应及胞时隔离，对懂隔离病犬加它强饲养管理蕉，病初限制伤进食，病重双时禁罢止进食，康申复期要喂适贴量易消化的味熟食。对无既治愈可能的馋犬，应及早借扑杀、焚烧解深埋。对犬笨舍和用具，民用2％～肌4％的火碱尼，1％甲醛洽溶液，0．趁5％的过氧提乙酸或5节％～6％的时过氯酸钠(组32谣倍希释)反岸复消毒，以瓜防扩大传播策。总之，实涝验应用的综式合治疗措施俗对犬细小病魄毒病早期的菠治愈率达估84%，中东期的治愈率度达45%今，晚期的治伤愈率为9召%以上。寺谋本实验所租用的治疗方愁法与其他常躬规的治疗方滚法效果的比墨较分析早斧.1对症姨治疗颤呕吐：呕吐葡是此病的主丹要症状，呕迷吐物可能是霸食物或无色刚粘液或混有啄少量粘液的吃清水。忙据临床观察麻，对于呕吐赌的治疗，确旱诊为细小病河毒肠炎早期访的，不应盲莫目止吐，而针应在其生理轧条件可以承税受的范围内舟任其呕吐，摘因为呕吐是绑犬排毒的一愿种正常反应例。若呕吐频狡繁并且较严章重时，临床撕上用于止吐锋的药物有胃稿复安，吗叮保啉，爱茂尔沙，维生素钟B6，氯丙皱嗪和阿托品锐等。坐临床实践得司知，对胃肠样呈空虚状态谦的犬呕吐，扶尤其是伴有肺出血性肠炎袖病征的呕吐食，临床上宜吴选用促使胃承肠活动静止则下来的止吐街药，如爱茂家尔，氯丙嗪除或阿托品。俭这些药的单绣独应用或对舒-27-阀-绞含有的CP痰V效价而言军，要比单克卡隆CPV抗意体低1糖—杆2个稀释度腊，因此效果恋稍差，如病梁犬有其它死病毒（如C廊DV）混合谈感染时，使吵用五联血清援则起到了抗穷多种病毒的俩效果。临床秒上抗体的作而用强调用药奋时机，CP鱼V感染的早宋期，使用抗鹅体治疗，效惠果尤为显着袍。因为抗体邀主要作用是轰产以生体液免疫袋，不能跟踪石病毒进入细而胞内将其结课合，所以临颠床上主张早利期应用。而捡且随着治疗菊天数的增加海，在单抗或而五联血清使矩用一个疗程掏后，应配合系应用干扰素摘，胸腺肽等纸细胞免疫促铸进剂，效果捷应更为理想算。CPV锦McAb作吧用特点为：群(1)Mc炸Ab可通过支抑制对宿主斯细胞的吸附误或复信制过程中和续病毒，不同高的McAb窜能通过不同浇的机制中和腔病毒，同一稼McAb也挽可通过几个按不同的途屠径发挥中和熄作用。(2崇)补体可促都进McAb届对病毒的中昂和作用，有意些McAb裳只有在补体端存在时才能岭发挥中和作奖用，补体也住能通过包被瓜或凝集病毒亡一抗体复合裙物从而增强搞。(3)某茶些非中和活柏性师的McAb航可能参与了取体内其他抗藏病毒保护机今制，如免疫侄调理，抗体势依赖细胞介芳导的细胞毒筝中和袋抗体依赖补皱体介导的细猪胞毒作用，欠从而进一步贯激活患犬体舍内细胞免疫钞系统，发挥冬中和病毒作皆用。(4)扬McAb可环通过淋巴和访血液循环系题统，快速到恩达病毒侵染宜的组织和细酒胞，抑制病搜毒对宿街主细胞的侵贵染及病毒的已复制。本实络验应用的综碌合治疗措施绞对60例处唉于不同发病撤阶段的犬细劳小积病毒病病例织进行治疗，喊结果，早期历的治愈率达碧84%，中暗期的治愈率络达45%，冰晚期的治愈浊率为单90%以上元，是一种行货之有效的治荐疗措施。补运抗生素疗芒法困临床上抗生个素的合理应中用，治疗犬蒸细小病毒引绩起的继发感鸟染非常重要牺。因为细小顶病毒首败先破坏肠壁舞细胞，使肠杆