DB11∕T 1804-2020 实验动物 繁育与遗传监测_第1页
DB11∕T 1804-2020 实验动物 繁育与遗传监测_第2页
DB11∕T 1804-2020 实验动物 繁育与遗传监测_第3页
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文档简介

ICS

65.020.30CCS

B

44DB11 DB11/T

1804—2020代替

828.3—,DB11/T

—,DB11/T

1461.1—,

—,DB11/T

1461.3—,

—,

1461.5—实验动物

繁育与遗传监测Laboratory

animal—

and

genetic

monitoring

发布

实施北京市市场监督管理局 发

布DB11/T

1 范围本文件规定了实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖方法和遗传检测。本文件适用于爪沙鼠猫雪貂、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验鱼(斑马鱼和鱼)的繁育和遗传监测。2规范性引用文件下列中的文中的规范性引用而构成本文件的条款。其注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版所有的修改适用于本文件。GB/T

东北羊GB/T

荷斯坦牛GB

14923实验动物 类实验动物的遗传质量控制GB/T

19166西门塔尔牛GB/T

19376波尔山羊种羊GB/T

22283 长白猪种猪GB/T

22284 大约克夏猪种猪GB/T

22285 杜洛克猪种猪GB/T

22909 小尾寒羊GB/Z

34792 引种技术规程NY/T

高产奶牛饲养规范NY

625 迪卡配套系猪种猪NY/T

肉牛育肥良好管理NY/T

种公牛饲养管理技程NY/T

畜禽微卫星遗传多样性检测技术规程NY/T

鸡遗传资源保种场保种技术规范NY/T

标准化养殖场 奶牛NY/T

标准化养殖场 肉羊3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1实验动物 laboratory

经人工饲育,对其生寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,用于科学研究、DB11/T

—教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。[来源:GB

14925-2010,3.2实验种群 experimental

population以远交方式进行繁殖生产的实验动物群体。3.3封闭群 closed

colony以非近亲交配方式进行生产,在不从外部引入新个体的条件下,至少繁殖4代以上动物。3.4近交系inbred

strain通过式培育,近数(

)高于的实验动物群体。3.5单倍型群体 haplotype

population通过繁殖方式培育出的单倍体基因型一致的实验动物群体。3.6杂交群 由两个不杂交产生的后代群体。F14缩略语下列缩略语适用于PCR:聚合酶链式反应(

Chain

)SNP:

单核苷酸多态性

Nucleotide

Polymorphism)STR:

短串联重复序列(

Tandem

Repeat)5 遗传分类及命名原则5.1 遗传分类根据不同品种品系动物及个体间遗传差异将实验动物分为实验种群、封闭群、近交系群体和杂,具体符合表1的要求。表1 实验动物遗传分类表DB11/T

—表

1 实验动物遗传分类表(续)5.2 命名原则5.2.1 实验种群在原有的品种品系名称前面加上实验,如实验长白猪。5.2.2 封闭群由2~4个大写英文命名。种群名称前标明保持者的英文缩写名称,第一个字母大写,后面的字母小写,宜不超过4个字母。保持者与种群名称之间用冒号分开。5.2.3 近交系以大文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名,符号应。5.2.4 单倍型群体以单倍体基因型英称(或缩写)加英文和阿拉伯数字命名,应简短。5.2.5 杂交群DB11/T

—以雌性亲前,雄性亲称在后,二者以“Í”相连。将以上部分用括号括起,在其后表明杂交代数,以F1……Fn表示。6 繁殖方法6.1 实验种群6.1.1引种选择双亲、无、繁殖性能好、品种特征的动物作为种用动物。6.1.2繁育方法实验猪按照NY

的规定进行。实验西门塔尔牛按照NY/T

1339和NY/T

执行,实验中国荷斯坦牛按照

14和

的规定进行。实验羊应GB

14923和

的规定进行。实验狨猴和雪貂应按GB

的规定进行。实验猫按照雌雄5:1以进行繁殖。6.2 封闭群6.2.1 引种作为繁殖用种子的群动物应三代以内无共同亲代并

34792对群种用动物的要求。封闭群实验长爪沙鼠和实验鸽引种数量于25对。封闭群实验小型猪引种数量不少于13对(循环交配方式繁殖)或25对(随机交配方式封闭群实验鱼(斑马鱼和剑尾鱼)引种于尾。实验鸡、实验鸭和实验鹅引种规模

执行。其他群实验动物引种规模GB

14923执行。6.2.2 繁育方法封闭群实验小型猪、实验长爪沙鼠和实验鸽繁殖方法按照GB

14923的规定执行。实验鸡、实验鸭、实验鹅应按照NY/T

的规定。6.3 近交系6.3.1引种作为繁殖用种子的近交系动物应符合GB/Z

34792对近交系种要求。6.3.2 繁育方法近交系实验动物可分为群(foundation

stock)、血缘扩大群(

expansion

stock)和生(

stock),生产供应数量不是很大时,设血缘扩大群,仅设基础群和生。各群、血缘扩大群和生的繁育方式GB

14923执行。6.4 单倍型群体6.4.1 引种1510030100DB11/T

—作为繁殖用种子的单倍型群体

34792的规定执行。6.4.2繁育方法以全同胞或半同胞兄妹方式进行。6.5 杂交群将不同品系实验动物的亲代雌亲代雄性杂交,即可F1实验动物。7 遗传监测7.1 遗传要求遗传以下要求:——体貌符合品种;——谱系;——繁殖方法科学;——群体品种;——遗传质量检测合格。7.2 遗传检测7.2.1 检测频率每12个月至少进行一次检测。7.2.2 抽样7.2.2.1 实验种群和封闭群抽样数量从每个种群中随机抽取窝成年实验动物的血液或其他组织,雌雄各半。抽样数量按照表2执行。表2 实验种群和封闭群遗传检测抽样数量7.2.2.2近交系实验动物抽样数量基础群留种动物的均应进行遗传检测;各生体窝成年,抽样数量按照表3规定执行。表3 近交系实验动物遗传检测抽样数量

GB

GB

GB

GB/T

GB

GB

GB/T

GB/T

DB11/T

—7.2.3遗传检测方法采用群体DNA标记、分子标记和直接测序等,在有检测能力的实验室,具体按照表4执行。表4 遗传检测方法适用实验动物群体7.2.4结果判定7.2.4.1 实验种群检测结果判定7.2.4.1.1 群体遗传结构评估当实验猪、实验牛、实验羊体貌特征与品种品系相时,判定合格,否则判定不合格。7.2.4.1.2 微卫星

DNA

标记检测法实验狨猴、实验猫和实验雪貂适用于微卫星DB11/T

—实验狨猴和实验猫采用群体平态方法进行评价哈代-温伯格(Hardy-Weiberg律,根据各位点的等位基因数封闭群的,进行卡chi-square

)检验。当群体平衡状态,该群体判为合格,否则判为不合格。实验采用群体平均度,当群体平均杂合度在0.5~0.7时,该群体判为合格,否则判为不合格。7.2.4.2封闭群实验检测结果判定封闭群实验长爪沙鼠鹅鹅采用微卫星DNA封闭群采用平均杂合度评价,当群体平均度在~时,该群体判为合格,否则判为不合格。7.2.4.3 单倍型群体检测结果判定单倍型实验鸡和实验鸭采用聚合酶链式反应(PCR)产物直接测序法。单倍型采用单倍基因型序列进行评价,当测定序列与参考序致率为100%时,体判为合格,否则判为不合格。7.2.4.4 近交系检测结果判定7.2.4.4.1 微卫星

DNA

标记检测法近交系实验小型猪采用微卫星近交系实验小型猪采用微卫星DNA品系特征,当位点符合品系的特征时,该群体判为合格,否则判合格。7.2.4.4.2 SNP

分子标记检测法近交系实验鱼采用分子标记检测法。近交系实验鱼采用分子标记位点特征进行评价,当检测位点品系的时,该群体判为合格;当一个位点与参考位点不一致时,判为可疑位点数量和增加检测方法重新;当有两个及以上位点与参考位点不一致时,判合格。(52+Mg

mMSW974GGTGAAGTTTTTGCTTTGAACCGAAAGAAATCCAAATCCAAACC2.05817129S0091TCTACTCCAGGAGATAAGCCAGATCAGTGACTCCATGCACAGTTATGA1.5551496SW240AGAAATTAGTGCCTCAAATTGGAAACCATTAAGTCCCTAGCAAA1.5581192SW1066GCAGGATGAACCACCCTGCTCTTGAGGCAACCTGCTG2.06019166SW1089TTTTCCCCTTCACTCACCCGATCAAAGTCCCTTACTCCGG1.55810142S0005TCCTTCCCTCCTGGTAACTAGCACTTCCTGATTCTGGGTA2.05411204SW1057TCCCCTGTTGTACAGATTGATGTCCAATTCCAAGTTCCACTAGC2.05814142SW632TGGGTTGAAAGATTTCCCAAGGAGTCAGTACTTTGGCA2.054148OPNCCAATCCTATTCACGAAAAAGCCAACCCACTTGCTCCCAC2.05912138SW29AGGGTGGCTAAAAAAGAAAAGGATCAAATCCTTACCTCTGCAGC2.06112133SW911CTCAGTTCTTTGGGACTGAACCCATCTGTGGAAAAAAAAAGCC2.06014151DB11/T

—附

录A(规范性)实验动物微卫星

DNA

标记遗传检测方法A.1 基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照

的规定执行。A.2微卫星位点A.2.1用于封闭群和近交系实验小型猪遗传质量的微卫星位点分25个和10个,各微卫星位点的名称、体位置、引物序列、等位基因数、等位基因范围和表的规定执行。表A.1表A.1 实验小型猪微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围(5Mg2+mMSW511AAGCAGGAATCCCTGCATCCCCAGCCACCAGTCTGAC1.56212161SWr158TCCAATTCAACTCCTGGCTCGAATGTGCACATACCACATGC102.06018158SW951TTTCACAACTCTGGCACCAGGATCGTGCCCAAATGGAC101.55814108SW271TTCCAGTGGCTTTCTGTGCCATTCATTCCCAGTGAAACTTG111.55813111S0386TCCTGGGTCTTATTTTCTATTTTTATCTCCAACAGTAT112.04812155S0068CCTTCAACCTTTGAGCAAGAACAGTGGTCTCTCTCCCTCTTGCT132.06210210SWr1008ACAGCCACCAACAGTGTTTGGAACTTCCATATGCTGCAAGTG132.0621698S0007TTACTTCTTGGATCATGTCGTCCCTCCTCATAATTTCTG142.05415142SW857TGAGAGGTCAGTTACAGAAGACCGATCCTCCTCCAAATCCCAT142.05816129SWr312ATCCGTGCGTGTGTGCATCTGGTGGCTACAGTTCCGAT151.56411116SW81gatctggtcctgcacagggGGGGCTCTCAGGAAGGAG161.560128SWr1120CAAATGGAACCCATTACAGTCCACTCCTAGCCCAGGAGCTTC171.56011147S0062AAGATCATTTAGTCAAGGTCACAGTCTGATAGGGAACATAGGATAAAT182.05612144S0218GTGTAGGCTGGCGGTTGTCCCTGAAACCTAAAGCAAAG1.55411158CGAATAGACATTATGTAAGTTGCTGATGAACTTTCACATCCCTAAGGTCGT1q2.55512250SW240AGAAATTAGTGCCTCAAATTGGAAACCATTAAGTCCCTAGCAAA2P1.55596SW72ATCAGAACAGTGCGCCGTGTTTGAAAATGGGGTGTTTCC3P1.555100S0005TCCTTCCCTCCTGGTAACTAGCACTTCCTGATTCTGGGTA5q3.05510205S0090CCAAGACTGCCTTGTAGGTGAATAGCTATCAAGTATTGTACCATTAGG12q1.555244DB11/T

—表A.1表A.1 小型猪微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)CAJA1GAAGACGGGGGCGTAAATATGTGGTGGCTCATACCTGAA60386CAJA6GAGCACCAAGATTGGCATTTCCAATACACATCGGCTTTGA60235CAJA10ACCCTACATTGCCAAATTGCGCCTCTTCTGAGGGAAGTGA60198CAJA11CGAAAGTGTGCTCAACAGGAAAGGTGGGATTCTGAAAGCA60254CAJA13AGCACATGAACACCCAGGTTAGTGAAAACAGGCTGGGAGA60378CAJA14AGCACATGAACACCCAGGTTAGTGAAAACAGGCTGGGAGA60216CAJA17GGGCACTCCAAGGTCAGTAATTGCCCCCTGCTTATTGTAG6010382CAJA18ACTTGCAGGCCAGTGTTCTTTGGACAGCTGAGGTTTCCTT63315D10qham51CGGGAATTCAAAGGCGTTCTAGGAGGATTTCGCATTTGGG60103Ham157CAGCCAACATGCTTCTCAGTGGTGGAATAAATCAGGCTACCAG60193Ham60TGCTCTAGAGGTTCCACTCTGGGCATGTTACCTAACCTCTCTG58139(5Mg2+mMSW769GGTATGACCAAAAGTCCTGGGTCTGCTATGTGGGAAGAATGC133.055106SW857TGAGAGGTCAGTTACAGAAGACCGATCCTCCTCCAAATCCCAT141.555144S0355TCTGGCTCCTACACTCCTTCTTGATGGTTTGGGTGGGTGCTGAAAAATAGGA153.05514243SW24CTTTGGGTGGAGTGTGTGCATCCAAATGCTGCAAGCG171.55596S0218GTGTAGGCTGGCGGTTGTCCCTGAACCCTAAAGCAAAG1.555164DB11/T

—表A.1小型猪微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)A.2.2表A.1小型猪微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)数、等位范围和退火温度表A.2的规定执行。表A.2表A.2 实验微卫星位点的序列、退火温度、等位基因Ham65TGAGAACGACTGCTCTAGGTTGGAAGTGGCTTCATTCCTG5810177Ham181CAATGAGATGTGTCCAAGTGAGCCAAACACCCAATATGCAGT58213Ham184GGCGCAGCTCATCTCTTCACCCTCCCCAGCATCTTCAAGAC63150Ham125GTGGGTAAATGCTGCCATCTGTTTCAACTCCTGCGTCTAGTC59187Ham101AGACCAAGCATCTTCTTGGACCACCTTTAAACTGCTGTGGTTG59281Ham61CAAAGATGCTTGGGGATGGAAAGATCTTGCAGGGCGTAAG6110263Ham32GCCCAAATCCTGTTTGACACCCACCTAGATCATCGAGAGTAG58183Ham100GACCAACTCCAAAGCTAGCAGGTAACATGCTCTCGACCTT58244Ham26GCAAATTCGTGAAGCATTCCAACAGTTGGATGAGTTCCAG59182AF200942CAGGCACCCCCAGTTTGTCTACACAGGCTGAGGATGT5415180AF200943GGCTCCTGATTCTACATTTCTCAACCATTGGCAACTCTC5717154AF200944GCTGGGCTTTAATGTTTATTTGGTGGCTCACACTTTCTGT5419113AF200946TTTCTGGGGTCTCTTTCTCTCCCATTCTGCAAGACTCCTCT5728195AF200945AGTCCCTATTACATCCACAAGTTATCCTGCAAAGCCTAAG5712166AF200941TGGGTCCTTTGGAAGATGGCTTAAAATGAATCACTTA5524115AF200947GACAGAGTGGGAGGGGTATGTTGGCAAGTTTGGTTTGTTTGA5517188DB11/T

—表A.2微卫星位点的序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围(续)A.2.3表A.2微卫星位点的序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围(续)基因数、等位范围和退火温度表A.3的规定执行。表A.3表A.3 实验微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因分布范围D16Mit7CTGCCACCCCTGAACCATTACTACAAGATGTGGGGCATGA52.615480D16Mit26CAGGAATAAAGTATAATGGGGTGCCCCATGATCAGTTGGGTTTT49.1207D1Mit362TGTGTGACTGCTTGGAAGATGCTGAGTCCCTAAAGTTGTCCTTG50.016476D8Mit184GTTTTTCTCAGAAGAATGCAATATACCTGAGAAGAATGAGGAATTTGTCC48.111196D7Mit33TCTGAAGTTTGAATGGTTGTGGTTTCAAAATCGTGTCATTTTGC47.315376D6Mit37AAAGAATTGCACATCCACTGGTGCCCAGGATGTTTAAGAGG47.014246D5Mit31TCAGGGCTCTCTAAGGGACAACTATGCAGCCACCAAATCC53.1318D12Mit201CCACTGGATGGCAACAGACTATGTGTTTCAAAACCACACTCG53.118245D2Mit22GCTCCCTTTCCTCTTGAACCGGGCCCTTATTCTATCTCCC49.1173D15Mit124AGGAGAGAACCAACTGCTGCGGCCAGTGATGACTTTATAATGC59.817232D11Mit36CCAGAACTTTTGCTGCTTCCGTGAGCCCTAGGTCCAGTGA58.715234D7Mit71CCACCTGGAATACATGTAACCCTAAGATCCAAGAGATGGGTTAAGC49.111165D2Mit76CTCAAGTCTCACTTCTCTGCACAACACCCAAGGTTGACCTCTG47.319281D3Mit130AACACATGAAACGTGTGCGTTGATAGGCATGCTTAAGCCC50.611213D19Mit1AATCCTTGTTCACTCTATCAAGGCCATGAAGAGTCCAGTAGAAACCTC49.115133D11Mit35AGTAACATGGAACATCGACGGTGCTCAGCTCTGGAGTGCTA48.113287D17Mit38CCTCTGAGGAGTAACCAAGCCCACAGAGTTCTACCTCCAACCC52.614195DXMit17CCTGTTTGGGCACCTAGATTTAATAACCCATGTTTTCTGTGGG48.1234D8Mit56ACACTCAGAGACCATGAGTACACCGAGTTCACTACCCACAAGTCTCC50.6100DB11/T

—表A.3表A.3 位点的序列、退火温度、等位基因数及等位基因(续)Mpu1A4wCACTTCCTCCCATGGACACTCAAAGTCTCCCACCCTATGC152(AC)23MpuA10w4TGGCCTATATGTGCAGATGACTGTTTGTCTTGTACCCTCTGACC154(AC)13(AC)7Mpu7A121wACTGCCATCAGGTCATCTAGG

GGGTAGACACCTGGCTCAAG105(CA)14Mpu7A129wGGCCTCTGAACACATAGTTGAAGTACAGAATGGAAGGATCTG197(CA)13Mpu1A212wCCCTATGAGGGCATGTTTGTCTGCCATGTTTCCACTGGT137(TG)13Mpu3A223wGAAGACAGCACCCCAGAGTC

213(GT)19Mpu4A229wGGGTAGGACGTGCTTAAAGATGAGCCCTCAAAGCCTCTTCTC107(GT)11(TG)7Mpu6A231wCCTCTGGTAACCATCTGTTTGTCTTCAAGATGTTCAGTGTGGA182(GT)15MpuB1w4TCCACTACCTGGCCTCATTCACCTCAGGCTCCACTCTCAG178(CT)15(CA)8(AC)5(AC)11MpuB6w2

TGCCTATTCCAGGTACCTCAT156(TC)18MpuB9w7CGTTACCAACTGTGGCTGTGTGCCTGGGCCTGTGATTA180(GA)18MpuB12w3AGTCGACAGATGAGTCCACGAAG

TGTCACACATGGCAGGATCT175(AG)11(AC)8(AC)7MpuB112w5CCATTACAAGTGCTTGGAGACATGGAACATGCTGGAAATTGT161(AG)

14MpuB202w3TCTCCTCCTCCTCCTCCTTCATGAGATTGACCGTGCATCA164(CTC)5(GA)14D10Mit66TCTCCTTGGAATTCACAGCCGACATTCCTTAAGAGAGACAGTCC54.714272D13Mit1TCATTCAACATTCTGTCAATCGCACAACAAGGTTAACCTCTAGACA49.014104DB11/T

—表A.3位点的序列、退火温度、等位基因数及等位基因(续)A.2.4用于表A.3位点的序列、退火温度、等位基因数及等位基因(续)复等位基因数表A.4的规定执行。表A.4表A.4实验微卫星位点的序列、等位基因等位基因分布范围(52+Mg

mMFCA123CTTCACACTGCGAGAGGACTTCTGACAGGCTCCAGGTTACTA11.557FCA1062CTTCACACTGCGAGAGGACTTCTGACAGGCTCCAGGTTACTA11.558FCA522GTTTGAAATTATGGCTTCCCAACTTCTGGAGAACAAGAGGGAAAAGTB11.554FCA275TCACTCCTGGACTTAACCATCAGTGCTATTGACGAAGGGGCAGB21.557FCA848CTCCTTCACCAAAGGCTGGATGGACATTCTGGAAATGCGGAGB31.557FCA664AGAAAAATGACTACCGACATGGTTGAGTGCGGCTACTATCTGGGC11.556FCA346AATGCCTAGGTAGCACTGTCCCCCAAGTCACCCTCCTGTTGC21.558FCA920CTAGTTGAAGGGGCCAGCACTCTGTCCAGCCCATAGGTGTD11.559FCA221TGGCCCATTAAGCAAGAAGGTTGGCTATGCCAGCAGTTGAAD31.557MpuB209w2TGCTTCTCCCTCTGACTGCTCCGCCCAAGTATCCCTAAAT119(CT)16MpuB217w3TTCCCTGCTTGTGCTCTCTTTGGGGTAAGGGTAGGTATGC126(TC)5(TC)17MpuC4w7CTGGCCCTATCACATACATATTCAGGAAGTATACTCATGCCTGCAA147(TCCA)9MpuC102w3GGGTGGATGGGTGAGTAGGTA

CCTTCCCACATTCCATCCTT119(TGGA)7MpuD207w5CAGGTGAAGAAGTCCCTCTGTCTTGGTTCTGACCATTTGGA188(CT)10(ATAG)7MpuD209w4GAACAGCAAGTAGTCCAACTCTCAGTTGGATCCTTTCCATCACC165(TATC)7MpuD231w2TTTGGGTTCCACAGTAGGTGATGCTCTCAATCCATGCTCA132(GATA)9DB11/T

—表A.4 微卫星位点的序列、等位基因数及(续)A.2.5用于表A.4 微卫星位点的序列、等位基因数及(续)退火温度表A.5的规定执行。表A.5表A.5实验猫微卫星件和染色体分布(52+Mg

mMFCA1014CTGGCAAGAAGTCCACTGGGCATGGCTCCTGAGGTCATGTE31.558FCA1015CTCCAGTGCCCATACGTTGTTGGCCACAAAGATGGTTGTTCE31.557FCA1016GTCACTAAGTGGTGACAGAGCAAACGTTTGAAAGGTGTGCCTF11.556FCA1030CGCCCGCAAAAAGACTCAAGGGACGCCCACTAGCCAAATAF11.558FCA1315CCTGCATCAGTTGATTCCTTGTGGACCATCAGAATGCAGCTCF21.558FCA823AGGGTGTGCTAGAACTAGCTGGCATTTAGAGGTTCAGGACTGGGB11.558FCA770TCAAGAGTCTTTGCTCAAGGGTTTACTTAGGACTGACAGGGCAA11.556FCA559GCCAAAATGTTCAAGAGTGGTTTTGGCTTGATGAGCATCAB11.555FCA976TCCATTTACCTGGGAAATTCCACCCTCATGTCTTGGCAATCD41.555FCA1240TCCTGATGTGGCAGTTAAACCGCATGCCTTGAACCTTTCATD21.558FCA176GGAAACTTGGAAAGCAAAACCTCCACAGTTGGAGTTCTTAAGGA11.558FCA045TGAAGAAAAGAATCAGGCTGTGGTATGAGCATCTCTGTGTTCGTGD41.558FCA723TGAAGGCTAAGGCACGATAGACGGAAAGATACAGGAAGGGTAA11.558FCA085GGTCCTCACGTTTTCCTATGTCTGTATGAGATGCGGTE21.558FCA084TAGGTGAATGTTGGGATTTATGGAACTGAAGACCAAATTGATGAGA11.555FCA210TGAGCCACCTAGGCACTCTTAGAAGCATCCAGTGACAATGGB41.559FCA453AATTCTGAGAACAAGCTGAGGGATCCTCTATGGCAGGACTTTGA11.560FCA672AAGTTGCTTGCACACACTGCTCCAAGAGCCTTTTCAGTTAGGF21.560FCA1056GGTGTGAGGGCCTATTCTGAGGATGTCTCCCTTGACTGGTB41.558DB11/T

—表A.5表A.5猫微卫星体分布(续)(52+Mg

mMFCA1239AAAAGCCCTGACACCCAAGCTTGACCTTAATTGCTCATTGGD21.558FCA700CCCTTAAAATCGCAGCTCTGAATCCAAGGAAAACAGGCCTB11.558FCA742TCAATGTCTTGACAACGCATAAAGGATTGCATGACCAGGAACD41.556FCA678TCCCTCAGCAATCTCCAGAAGAGGGAGCTAGCTGAAATTGTTA11.556FCA096CACGCCAAACTCTATGCTGACAATGTGCCGTCCAAGAACE21.558FCA075ATGCTAATCAGTGGCATTTGGGAACAAAAATTCCAGACGTGCE21.558FCA149CCTATCAAAGTTCTCACCAAATCAGTCTCACCATGTGTGGGATGB11.558FCA220CGATGGAAATTGTATCCATGGGAATGAAGGCAGTCACAAACTGF21.558FCA229CAAACTGACAAGCTTAGAGGGCGCAGAAGTCCAATCTCAAAGTCA11.558MCW0029GTGGACACCCATTTGTACCCTATGCATGCAATTCAGGACCGTGCA63.8139ADL0293GTAATCTAGAAACCCCATCTACATACCGCAGTCTTTGTTC53.9106ADL0317AGTTGGTTTCAGCCATCCATCCCAGAGCACACTGTCACTG58.5177GCT0016TCCAAGGTTCTCCAGTTCGGCATAAGGATAGCAACAG52.2111ADL0304GGGGAGGAACTCTGGAAATGCCTCATGCTTCGTGCTTTTT53.9138LEI0074GACCTGGTCCTGACATGGGTGGTTTGCTGATTAGCCATCGCG58.5221ADL328CACCCATAGCTGTGACTTTGAAAACCGGAATGTGTAACTG53.9107DB11/T

—表A.5猫微卫星体分布(续)A.2.6用于检测实验鸡遗传质量的微卫星位点为29个,各微卫星位点表A.5猫微卫星体分布(续)和等位基因范围按照表的规定执行。表A.6表A.6 实验鸡微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围GGANTEClGCGGGGCCGTTATCAGAGCAAGTGCAGGGCGCTCCTGGT65.0139LEI0094*CAGGATGGCTGTTATGCTTCCACACAGTGCAGAGTGGTGCGA56.0176MCW0330TGGACCTCATCAGTCTGACAGAATGTTCTCATAGAGTTCCTGC58.5217LEI0141CGCATTTGATGCATAACACATGAAGGCAAACTCAGCTGGAACG52.2221MCW0087ATTTCTGCAGCCAACTTGGAGCTCAGGCAGTTCTCAAGAACA58.5268MCW0347GCTTCCAGATGAGCTCCATGGCACAGCGCTGCAGCAACTG52.0121ADL176TTGTGGATTCTGGTGGTAGCTTCTCCCGTAACACTCGTCA58.5183ADL0201GCTGAGGATTCAGATAAGACAATGGCYGACGTTTCACAGC58.5111GGNCAMZOGTCACTAGGTTAGCAGCATGGCTGGATACAGACCTCGATT56.0234GGAVIRAGAGATGGTGCACGCAACCTCGAGCACTTTCTGGCAGAGA60.786MCW0063GGCTCCAAAAGCTTGTTCTTAGCTGAAAACCAGTAAAGCTTCTTAC53.9116ADL185CATGGCAGCTGACTCCAGATAGCGTTACCTGTTCGTTTGC58.5116GGMYCCGAGGCGCTCTGCGAGTTTATGGGGACCTCTGGCTCTGAC62.4139LEI0094GATCTCACCAGTATGAGCTGCTCTCACACTGTAACACAGTGC53.9250GGVITCAGCCATCATTCAGGGCATCTGATGTCCTGAGTGATGCTCA58.586ADL0292CCAAATCAGGCAAAACTTCTAAATGGCCTAAGGATGAGGA58.5110GGVITIIG*GGCAGGTTTCTAATGCCTGACCCATCGTTTCAACTGTATG56.0186ADL166TGCCAGCCCGTAATCATAGGAAGCACCACGACCCAATCTA58.5131MCW0014AAAATATTGGCTCTAGGAACTGTCACCGGAAATGAAGGTAAGACTAGC58.5172DB11/T

—表A.6表A.6鸡微卫星引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)APL2GATTCAACCTTAGCTATCAGTCTCCCGCTCTTGGCAAATGTCC58.5115APL579ATTAGAGCAGGAGTTAGGAGACGCAAGAAGTGGCTTTTTTC55118APH09GGATGTTGCCCCACATATTTTTGCCTTGTTTATGAGCCATTA5893APH11GGACCTCAGGAAAATCAGTGTAGCAGGCAGAGCAGGAAATA58.5183APH18TTCTGGCCTGATAGGTATGAGGAATTGGGTGGTTCATACTGT58179AY258ATGTCTGAGTCCTCGGAGCACAATAGATTCCAGATGCTGAA58.190AY264GCAGACTTTTACTTATGACTCCTTAGCCCAGTGAAGCATG58.111112AY314CTCATTCCAATTCCTCTGTACAGCATTATTATTTCAGAAGG50.3135CAUD001ACAGCTTCAGCAGACTTAGAGCAGAAAGTGTATTAAGGAAG55.5234CAUD002CTTCGGTGCCTGTCTTAGCAGCTGCCTGGAGAAGGTCT60.8175CAUD004TCCACTTGGTAGACCTTGAGTGGGATTCAGTGAGAAGCCT60.8162CAUD005CTGGGTTTGGTGGAGCATAATACTGGCTGCTTCATTGCTG60.8180GGCYMA*AGCGAGGCGCTCTGCGAGTTGGGCACCTCTGGCTCTGACC64.6140MCW0402ACTGTGCCTAGGACTAGCTGCCTAAGTCTGGGCTCTTCTG56.015141STMSGGHU2-1ACTTAATATGTGTGAGGTGGCGTTCTCACAATTGCATTAGC53.9235DB11/T

—表A.6鸡微卫星引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)A.2.7 表A.6鸡微卫星引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)和等位基因范围按照表的规定执行。表A.7表A.7 实验鸭微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围CAUD006ATGGTTCTCTGTAGGCAATCTTCTGCTTGGGCTCTTGGA63.5183CAUD007ACTTCTCTTGTAGGCATGTCACACCTGTTGCTCCTGCTGT60.8100CAUD010GGATGTGTTTTTCATTATTGATAGAGGCATAAATACTCAGTG50.3180CAUD011TGCTATCCACCCAATAAGTGCAAAGTTAGCTGGTATCTGC50.3137CAUD012ATTGCCTTTCAGTGGAGTTTCCGGCTCTAAACACATGAATG63.5182CAUD014CACAACTGACGGCACAAAGTCTGAGTTTTTCCCGCCTCTA58.1136CAUD026ACGTCACATCACCCCACAGCTTTGCCTCTGGTGAGGTTC60.8134CAUD027AGAAGGCAGGCAAATCAGAGTCCACTCATAAAAACACCCACA66100CAUD028TACACCCAAGTTTATTCTGAGACTCTCCAGGGCACTAGG55.5153CAUD031AGCATCTGGACTTTTTCTGGACACCCCAGGCTCTGAGATAA51.410140CAUD032GAAACCAACTGAAAACGGGCCCTCCTGCGTCCCAATAAG58.196CAUD034TACTGCATATCACTAGAGGATAGGCATACTCGGGTTTAG55.5160CAUD035GTGCCTAACCCTGATGGATGCTTATCAGATGGGGCTCGGA63.5174CMO211GGATGTTGCCCCACATATTTTTGCCTTGTTTATGAGCCATT55112CMO212CTCCACTAGAACACAGACATTCATCTTTGGCATTTTGAAG58186DB11/T

—表A.7鸭微卫星引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)A.2.8表A.7鸭微卫星引物序列、退火温度、等位基因分布范围(续)和等位基因范围按照表的规定执行。19Ans02TTCTGTGCAGGGGCGAGTTAGGGAACCGATCACGACATG58202Ans07GACTGAGGAACTACAATTGACTACAAAGACTACTACTGCCAAG58236Ans02TTCTGTGCAGGGGCGAGTTAGGGAACCGATCACGACATG58202Ans07GACTGAGGAACTACAATTGACTACAAAGACTACTACTGCCAAG58236Ans17ACAAATAACTGGTTCTAAGCACAGAGGACTTCTATTCATAAATA54111Ans18GTGTTCTCTGTTTATGATATTACAACAGAATTTGCTTGAAACTGC58229CKW47AACTTCTGCACCTAAAAACTGTCATGCTGAGGTAACAGGAATTAAAA62211APH13CAACGAGTGACAATGATAAAACAATGATCTCACTCCCAATAG55163APH20ACCAGCCTAGCAAGCACTGTGAGGCTTTAGGAGAGATTGAAAAA6013135Bca

AGTGTTTCTTTCATCTCCACAAGCAGACCACAATCGGACCACATATTC62197Bca

CCCAAGACTCACAAAACCAGAAATATGAAAGAAGAGTTAAACGTGTGCAA58155TTUCG1CCCTGCTGGTATACCTGAGTGTCTACACAACAGC58113G-Ans25CACTTATTAATGGCACTTGAAAGTTCTCTTGTCACAACTGGA62224G-Hhi1bATCAAAGGCACAATGTGAAATAGTAAGGGGGCTTCCACC60163G-BcaTAGTTTCTATTTGCACCCAATGGAGTAGTTTCTATTTGCACCCAATGGAG60164G-CAUD006ATGGTTCTCTGTAGGCAATCTTCTGCTTGGGCTCTTGG5613152DB11/T

—表A.8实验鹅微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围A.2.9用于检测实验鸽遗传质量的微卫星位点为16个,各微卫星位点称表A.8实验鹅微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围和等位基因范围按照表的规定执行。20UU-Cli02TGGGCAAGGTACACTTTTAGGTCTTTATGCTCCCCCTTGAGAT61158UU-Cli06TTTGAAAAACATGGATTGTGCAATTTGCAGAGGGTGAGTGG56140PG5GTTCTTGGTGTTGCATGGATGCAGTTACGAAATGATTGCCAGAAG59262C26L9(1265223)CAAAGCTGCTGACGTGAATCAAAGAGACGCTCCATGCAAAAG59467UU-Cli14CAGAACGTTTTGTTCTGTTTGGTCTTGCTGCAGTCTTCATCC58265C12L1(532572)GTTGTTTGGCTGAGTGGACGTCAACCAGGGGAATTGGCAG62126C12L4(906353)GCTGCTGTCTTCTTCATTGGGTTAAAACCTCCCGTCTCCCTG60210CliCCAATCCCAAAGAGGATTATACTGTCCTATGGCTGAAGTG5878C26L10(1404758)GCTGTCAGGTATCAGCCACAATCAGACCCACGAAAGCTGTAA59211C26L4(568923)CAACCCCATGTGGGTGAGACCACCACCACGTGGGACATC63357PG4CCCATCTCCTGCCTGATGCCACAGCAGGATGCTGCCTGC64136UU-Cli12CGCCAGACTGTATTGTGAGCAGCATGGCTGTTCTTTGAGG61231CliATGTGTGTTTGTGCATGAAGATGAAAGCCTGTTAGTGGAA56183CliGAGCCATTTCAGTGAGTGACAGTTTGCAGGAGCGTGTAGAGAAGT60136UU-Cli07GCTGCCTGTTACTACCTGAGCCTGGCCATGAAATGAACTCC61277C26L1AGGAGCCTACACTGGGTTTTCTGTAGCTCTGCAATCAGCCT60250DB11/T

—表A.9 实验鸽微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围A.2.10表A.9 实验鸽微卫星位点的引物序列、退火温度、等位基因数及等位基因分布范围卫星分子标记的遗传特征按照表A.10的规定执行。21bpABTULFWIKZ24LG15CACCTTCACGGTGAGTAGCAGTGGAATGGTGTGACTAATGTCA150150150Z928LG18CAGTCCAGGCTGAACATTCAACACCTTCGGCAGTTTTCAC13494134Z1059LG7AACAGGTGACAGAGCACACGGGGAGAGGGCAGGACAATAT150/122150/122Z1265LG6ATATGTGCTGCTCATGATGAGTAACAGACGAAGGGTGAAGGA90~110bp90~110bpZ1637LG8GGCTTTTGGATGAAGGTTGAGCGGAATCACAATGGCAGCAGA143133Z3725LG3ACTAAATCGCACTTCAGCAGCGGGTGTCCTCACATCAGCTGCA256248248Z3782LG19AATTCTGGGGGGTAATTCTGGCAAGGGGGCTAAACCTTCAACTG2009017012090Z4299LG5AGGAATGCGCTATGGGACGACACATCTGCCACTGAACCGG260230260280300260190Z5223LG15AACAGAGCCGATCTGCCACCAGCACAGCGGAGGAAATAAAGC178178Z9384LG19CCGACTGGAGAAGACCTGAGAGCATAATCAGACAACCGGG177134177134

177134

177134190177DB11/T

—表A.10 常用实验斑马鱼微卫星分子标记的表A.10 常用实验斑马鱼微卫星分子标记的A.3.1 PCR扩增的体系PCR总反应体积为15μL,其中含10×PCR

μL,上下游引物

pmol/μL)

各1μL,4×

μμL

,Taq

酶μL

,50

ng~100

组DNA:1μL

,纯水(ddH2O)

μL。PCR反序为:

变性,4

min;94

℃变性,30

s;退火温度(各位点序列、PCR反应条件见表A.1),30

s;

℃延伸,30

s;35个循环;72

℃继续7

;扩增产物4

℃保存。A.3.2 PCR产物的凝胶检测PCR产物经的琼脂糖凝胶电泳以及凝胶成像系照。A.3.3 扩增产物的STR扩增产物经过琼脂糖凝胶电泳确保扩目的片断后,选择分FAM、HEX、TAMRA标记的三个位点的扩增产物,以1:3:5体积比混合,取1μL上样进行。22CGA1891992032930.0230.8720.0230.0811.000SW7691051290.0930.9070.97SW8571501580.1630.837DB11/T

—A.4 STR的判读与分析扫描结果可出现两种波形:一种为纯合基因型,只有一个主波;另一种为杂合基因型,有两个主波。由群体遗传分件读出每个样本在每个微卫星位点的扩增大小。每个位点的等位根增片断从小到大顺序排列记录为a,b,c,d等。A.4.1 数据统计分析将所有样本的每个微卫星位点的基因型以ab,bb式运用软件的数据文件,计算样品在各微卫星位点上的基因频率、平均观察等位基因数、平均有效等位基因数(Ne)、香隆指数、平均杂合度(H)等。A.5 实验结果A.5.1 实验种群A.5.1.1 实验猫和实验实验狨猴和实验猫采用群体平态方法进行评价哈代-温伯格(Hardy-Weiberg律,根据各位点的等位基因数封闭群的,进行卡chi-square

)检验。当群体平衡状态,该群体判为合格,否则判为不合格。A.5.1.2 实验实验采用群体平均度,当群体平均杂合度在0.5~0.7时,该群体判为合格,否则判为不合格。A.5.2 封闭群封闭群实验长爪沙鼠鹅鹅采用平均度进行评价,当群体平均度在~0.7时,该群体判为合格,否则判合格。A.5.3 近交系A.5.3.1实验小型猪所有样品检测位点的等位基因都符合品系的特征,表A.11A.13的规定执行,没有新的等位基因出现为合格实验小型猪近交系,否则判为不合格。表A.11近交系五指山小型猪近交系培育过程中质量控制的微卫星座位及优势等位基因23CGA2712772970.490.2810.229SW7691231270.1940.806SW8571461540.1460.5730.719S00052162260.2230.660.883SW24094981040.5310.3330.1150.979S03552582602620.0830.4270.4270.854SW721101200.6980.0830.781S00902412432472490.0320.1170.4890.1170.606S02181671731791870.1150.740.1250.0210.854SW241021040.750.0210.75S03550.750.1381061140.888SW721061140.5880.2380.825S00902412470.7560.0120.756S02181731791810.0120.5470.4190.547SW241040.6310.631CGA2712832853050.0110.1360.3640.2950.795DB11/T

—表

近交系型猪近交系培育过程中质量控制的微卫星座位及优势等位基因(续)表A.12 近交系广西巴马小型猪和培育过程中遗传质量控制的微卫星及优势等位基因表A.13 近交系贵州小型猪培育过程中质量控制的微卫星座位及24SW7691051211291331391450.2910.2670.0930.1510.0810.1160.907SW8571561601660.1670.4520.2020.821S00052022042140.5580.2440.1860.988SW240961020.2270.1820.409S03552522542722740.1830.0980.110.3410.732SW721021121180.170.6250.0450.841S00902472492530.0450.580.3750.955S02181811871951970.1510.1860.0230.50.709SW241001041081120.1140.1140.2160.1360.466

DB11/T

—表A.13近交系贵州小型育过程中遗传质量控制的微卫星及优势等位基因(续)A.5.3.2 实验鱼近交系实验鱼(斑马鱼和剑尾鱼)检测结果判定按照表的规定执行。表A.14近交系实验鱼表A.14近交系实验鱼根据判定结果对实验动物群体出具。25SNP

ABTUdbSNP

01:018595529DS043503-5GGCGATTCCTACAATTCTTCGAAAGTCCTGTGTTGAAGGTGss4983890601:049159399DS036502-3GGCACATCGTCATATAATGCACAATACTGGAATGACACTGGss4983864002:025012321DS042554GAAGTCCATGTTGGCATCTACAGTGTTGAGAAACGGTCAGGss4982492802:027720831DS040180-3AACACTGGCACGTACACAAGGGGAATCGTGAACTCGTAACss4983878803:048073042DS032197-8TCATTGTAATAGCAGTAATGACGTGCAATGTTTGTTTCAGACCss4983845403:048073049DS032197-7TCATTGTAATAGCAGTAATGACGTGCAATGTTTGTTTCAGACCss4983845304:003254191DS036864-20CTGCTGTTACTGGGTCAGTGACTGCATGATAATGCCAAACss49838683DB11/T

—附

录B(规范性)实验

SNP

遗传标记的检测方法B.1 基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照

的规定执行。B.2 PCR按照附录A中A.3.1的方法进行。B.3 SNP的检测取10

μLPCR产25

μL的水,并用枪头吹打混匀。然后取1

μL为模板,用表中的引物进行扩增和产物测序,最后使用PolyPhred

程序软件分析果。B.4 SNP分子的选择及选择位于近斑马鱼25对染色体、鱼对体上的10个以上位点,作为遗传检测的SNP标记。分子称及常用近交系斑马鱼的SNP分子标记的特征符合表B.1的要求。表

常用实验系

SNP

分子标记位点SNP

ABTUdbSNP

04:003254203DS036864-19CTGCTGTTACTGGGTCAGTGACTGCATGATAATGCCAAACss4983868205:015736030DS002778-2AAACGTGGCAGAAATGAAACCCCATTTGTAGAAGAATCCAGss4983773805:025044903DS009184-1TTGCATTAGAGCCTTATCCTGTGTTCTTATGCTCTGTGACTGss4983783906:001111132DS014169-1GAGCAGCGATACTCACACAGTTCACTAGGTAAGACTCTTGAAGCss4983792906:024875905DS032220-5TCTCTTTAATGTTGGACTGCTGCCTTTAATCCATAGCCTTAGCss4983847007:018909158DS033959GACACATACCTGGCACTCGTCTCCTGAGAAGGATTCCACss4981668407:019711091DS023709CAGTTGAGAAGGGAGAAACGGCTGTTGGGTTGACTTGCss4980684708:010818674DS023589-1AGGAAAGACACCATCACTGAGCTTTAGGCGCAATAACAAGGss4983812608:026974745DS030842-1TATCTCGGTTAACGGGAGTGGCAGGGATATTTGACTTGAATGss4983838909:050927124DS048415-2TTCCCAAATACTGAATCTGCGGATCTGTTCATCGAGGTTCss4983896410:012029287DS027483-3CATTTAATAAAGGAATCACTACTCTTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTTss4983827710:012029405DS027483-4CATTTAATAAAGGAATCACTACTCTTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTTss4983827811:019554122DS025015-3AAAGAGCGTCAAGATGTGTGGCCTAACAGTACCATTCTTGGss4983817311:026314774DS033040ATCTCGACAACTCTGCTTCCAGTCCAGCAGAAATTGCACss4981581020:031443053DS053166-2TTAGGACACTCCACCATGAGTGCATGAAGACAGAGCAGAGss4983906721:013840265DS028819-10GTCCTTCCTGAAGCACTGAGTGTGAAAGGTTTTACTGTATTTCss4983832921:017891301DS023849-2TCTGACACAGGAAATAGTATGGCGAATCATATGGGAGTCGTTss4983813822:002853759DS036535-2AACTATGAGGCAGTCCGTTCAACTGATCCGTGAGTTGTCCss4983864722:022530591DS020970-1AAGCTGCTCATGTCACTCGGGGACAGGGTACAGGTAAGGss49838044DB11/T

—表

B.1 常用实验系分子(续)SNP

ABTUdbSNP

23:009386243DS022349-1GATGAGGACATGAGCTTGGTGACCAAACACCCTTAAATGss4983809923:009386361DS022349-7GATGAGGACATGAGCTTGGTGACCAAACACCCTTAAATGss4983810524:017922488DS055282-4GAGACGGGCACTGAACACGGATGTTTGTCACCCAAAGss4983913124:017922536DS055282-5GAGACGGGCACTGAACACGGATGTTTGTCACCCAAAGss4983913225:033544463DS024735-2TCTTGACATCGGTGGTGAGTTGTATTGGTGCTGTGACCss49838169DB11/T

—表

B.1表

B.1常用实验系分子(续)B.5.1 实验鱼检测结果判定按照表A.14的规定执行。B.6 结果根据判定结果对实验动物群体出具。281F384

56.41R2F-CTGTGTTTCAGGGTCTCACAC-3442

56.42R-GCAGGACAAGGTCAGGATC-31F-ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGCGCCTG-3984

601R-TGAAACCCATCAGGCACCATCCCAGGT-3DB11/T

—附

录C(规范性)MHC

单倍型实验鸡和实验鸭直接测序检测方法C.1基因组DNA的提取基因组DNA提取方法按照

的规定执行。C.2 PCRPCR扩增引物序列、片段长度及按表和表C.2的规定执行。表

C.1

单倍型实验鸡

遗传检测引物表表

C.2

单倍型实验鸭

遗传检测引物表C.3 PCRC.3.1PCRPCR

体积

15

μ

10×PCR

buffer:1.5

μL

,上

引物

pmol/μ

各1μL

,4×dNTP

μ

μL

酶1

μL

,50

~100

ng

基因组DNA:1

μL

,纯水(ddH2O)

μL。反应程序为:95

℃预变性,4min;94

℃变性,30

s;退火温度(各位点序列、反应条件参见表),

s;72

℃延伸,

s;35个循环;

℃继续7

;扩增产物4

℃保存。C.3.2PCR产物的检测PCR反应结束后,经琼脂糖凝胶电泳,合格的PCR产物进行果列进行比对分析,计算一致率。C.4 单倍型MHC实验动物标准结果判定所有样本序列列比对,一致率达100%,判为合格。29DB11/T

—C.5 单倍型MHC实验鸡C.5.1B2单倍型实验鸡标准序列片段(1)CGTGGGATCCTCAGACCCACACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGTCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCTCTACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTACGTGGACGGGGAACTCTTCACGCACTACAACAGCACCGCTCGGAGGGCTGTGCCCCGCACCGAGTGGATAGCGGCCAACACGGACCAGCAGTACTGGGACAGAGAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCAGATTGACCGCGAGAACCTGGACATACGGCAGCAGCGCCACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGACTCCATGGCGCAGTGCCG片段(2)CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGATGGCCTGCGATGGGAGAGACTTCATTGCCCTCGCTGAAGACATGAAGACGTTCACTGCAGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTTATGCTGAGAGGAAGAAGCAGTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGGGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGCAGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCAGTGTGGGGCTGGACGTGGGCCGGGGGCTCAGTGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCCGCCT-GCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.2 B5单倍型实验鸡标准序列片段(1)CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGAACAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段(2)CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGGAGGCCTACGATGGGAGAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGGCACGATGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGCGGAAGCAGTACCTGGAGGAAACCTGTGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATATGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGAGGGGGGGCCACGGTGTGGGGCTGGACATGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGATCTCAGCCCGGCCCTCACTGCCACCCGCCCGCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.3 B13单倍型实验鸡片段(1)CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段(2)CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAA30DB11/T

—ATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACCTGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGGGGGGGGGCCGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCTGCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.4 B15单倍型实验鸡片段(1)CGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段(2)CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCT-GCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGG

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