第十单元第4课时动物细胞工程

动物细胞工程第4课时课标要求1.阐明动物细胞核移植和动物细胞培养及应用。2.阐明动物细胞融合、单克隆抗体制备及干细胞应用技术。考点一动物细胞核移植技术及其应用考点二动物细胞培养及干细胞技术考点三动物细胞融合技术和单克隆抗体内容索引重温高考

真题演练课时精练动物细胞核移植技术及其应用考点一

1.动物细胞核移植技术(1)概念分析①供体：动物一个细胞的

。②受体：去除细胞核的成熟

。③结果：重新组合的细胞发育成

，继而发育成动物新个体。④原理：

。(2)哺乳动物核移植类型：

细胞核移植和体细胞核移植。梳理归纳

夯实必备知识细胞核卵母细胞新的胚胎动物体细胞核具有全能性胚胎2.体细胞核移植的过程细胞培养去核重组细胞供体思考讨论(1)动物核移植技术的理论基础(原理)是什么？克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖？提示动物细胞核的全能性。克隆动物属于无性繁殖。(2)为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难？提示由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。思考讨论(3)受体细胞为什么选用卵母细胞？提示体积大，易操作；去核时易于同时吸走第一极体；含有激发细胞核全能性的物质。(4)为什么不是取供体细胞核进行核移植操作，而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中？提示保证供核不被破坏，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。思考讨论(5)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？提示为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的核遗传物质去掉或将其破坏。思考讨论(6)克隆动物是对体细胞供体动物100%的复制吗？为什么？提示不是；克隆动物细胞核中的遗传物质来自供体动物，但细胞质中的遗传物质同时来自供体细胞和受体卵母细胞。此外，生物性状还受环境因素的影响。3.应用动物体细胞核移植技术应用非常广泛，对促进畜牧业的发展、培育优良

、生产实验动物和

动物、拯救

、保护动物资源都具有一定的应用价值。畜种转基因濒危动物考向动物体细胞核移植技术和克隆动物1.(2022·南通模拟)2018年1月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能考向突破强化关键能力√因为克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体发育而来的，该过程经过了细胞核移植，只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，A项错误。2.我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界上首个体细胞克隆猴——“中中”和“华华”。这标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代。下图为克隆猴的流程示意图。请回答下列问题：(1)我国克隆猴利用的是猴胎儿成纤维细胞，该细胞是一种已分化的体细胞，从理论上分析，它具有细胞的全能性，这是因为_________________________________________。成纤维细胞的细胞核中含有猴的全部核基因(2)克隆猴时需要进行“去核”操作，即去掉卵母细胞的细胞核。先在体外培养卵细胞让其分裂，一般选择________________

的细胞进行去核操作；然后进行“核移植”，即将体细胞的细胞核移到去核卵母细胞中形成重组细胞；此时采用的方法是_____________；得到的重组细胞再进行人工激活使其分裂形成胚胎。减数第二次分裂显微注射法中期(3)科学家将79枚克隆胚胎移植到21只代孕母猴中，最终只有两只母猴正常怀孕产下“中中”和“华华”，它俩的性别是否一致？____；原因是____________________________________________________________。是“中中”“华华”的细胞核中遗传物质一样，是经过有丝分裂形成的(4)克隆动物有很多优点：①可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；②_______________________________________________________________。可以增加濒危物种的存活数量(或可以建立实验动物模型研究人类疾病)动物细胞培养及干细胞技术考点二

1.动物细胞培养(1)动物细胞的培养过程梳理归纳

夯实必备知识无菌胰蛋白酶悬浮细胞接种原代一层新培养液传代(2)动物细胞培养需要严格的环境条件，包括温度、pH、合适的

和营养物质(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、

因子、微量元素)等，此外通常还需

等一些天然成分。气体促生长血清深度思考(1)为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？提示血清中含有多种未知的促细胞生长因子等营养物质，这是细胞生长和增殖所必需的。(2)培养前为什么分散成单个细胞？提示①成块组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长与增殖；②利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。深度思考(3)将组织分散成单个细胞时为什么要用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理？胃蛋白酶可以吗？提示胰蛋白酶可以将动物组织细胞间的蛋白质成分酶解，使细胞分散开，获得单个细胞。胃蛋白酶的最适pH为，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为～，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以不可以用胃蛋白酶。深度思考(4)定期更换培养基的目的是什么？提示以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。(5)幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？提示幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养，原因是这些细胞分裂能力强。深度思考(6)如何区分原代培养和传代培养？提示关键看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶，分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养为原代培养；而用胰蛋白酶处理将贴壁生长的细胞从瓶壁脱离下来，分瓶后的培养为传代培养。归纳总结动物细胞培养和植物组织培养的比较项目动物细胞培养植物组织培养理论基础___________________________培养前处理无菌；用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，使组织分散成单个细胞无菌、离体取材动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织植物幼嫩的部位或花药等细胞增殖植物细胞的全能性归纳总结动物细胞培养和植物组织培养的比较培养基性质____________培养基成分________________________________________________________________________________________________________________________结果_______________________________________________________液体固体葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、维生素和动物血清等水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等细胞培养产生大量细胞，不形成新个体可产生新个体归纳总结动物细胞培养和植物组织培养的比较应用人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等相同点①都需人工条件下的无菌操作；②都需要适宜的温度、pH等条件；③都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂2.干细胞技术(1)干细胞①概念：动物(包括人)胚胎及某些器官中同时具有

和________的细胞。②分类：单能干细胞、

、全能干细胞。(2)应用干细胞技术应用于

、新药研制和开发。自我更新分化能力多能干细胞疾病治疗考向一动物细胞培养3.为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜(溶剂)的药物X或Y，培养过程及结果如图所示。考向突破强化关键能力下列有关叙述错误的是A.细胞培养液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来

并进行计数C.对照组中应加入等体积的无菌蒸馏水D.根据实验结果，可以初步判断药物X的抗

癌效果较好√实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜(溶剂)的药物X或Y，故对照组中应加入等体积的二甲基亚砜(溶剂)，C错误；分析实验结果可知，添加药物X的实验组肝癌细胞数目最少，可以初步判断药物X的抗癌效果较好，D正确。4.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理C.丙过程是原代培养D.丁过程直接将丙过程得到的细胞分瓶培养√动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程是指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B项正确；丁过程表示传代培养，需要再次用胰蛋白酶处理并离心收集，然后分瓶培养，D项错误。考向二干细胞技术5.动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对下图的相关叙述中，错误的是过程可表示干细胞的自我更新、c过程表示干细胞具有分化能力、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同、b、c过程中遗传物质发生了定向改变√a过程可表示干细胞的自我更新，干细胞通过细胞分裂产生新的干细胞，A正确；b、c过程表示干细胞具有分化能力，可以分化出特定功能的细胞，B正确；a、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同，即发生了基因的选择性表达，C正确；a、b、c过程中遗传物质未发生改变，D错误。6.胚胎干细胞必须从胚胎中获取，但这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图(c－Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因与细胞的脱分化有关)。回答下列问题：(1)在对成纤维细胞进行培养时，常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞，这说明细胞间的物质为________，_______(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶处理成纤维细胞，原因是_________________________________________________________________。蛋白质不能多数动物细胞培养的适宜pH为～，胃蛋白酶在此环境中失活变性(2)在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是____________________________________________________。清除代谢物﹐防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害(3)过程③④为iPS细胞提供的条件不同，分化得到的细胞不同，可知细胞分化是___________________的结果。若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导，再将其分化出的细胞移入患者体内的优势是________________________。基因选择性表达避免了免疫排斥问题(4)如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，该技术可能的应用是_______________。解决不育问题动物细胞融合技术和单克隆抗体考点三

1.动物细胞融合技术(1)概念：在一定的条件下将

个或

个动物细胞通过物理、化学或生物方法结合形成

个细胞的技术。(2)条件：常用的促融方法有生物方法(如

融合法)、化学方法(如

诱导融合法)、物理方法(如

诱导融合法)。(3)原理：

。(4)结果：形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为____

。梳理归纳

夯实必备知识两多一病毒诱导聚乙二醇电场细胞质膜的流动性杂种细胞2.单克隆抗体的制备(1)制备原理①浆细胞特点：浆细胞只分泌

种特定抗体。②骨髓瘤细胞特点：能在体外

。③杂交细胞的特点：既能

，又能产生足够数量的

。一大量增殖大量增殖特定抗体(2)制备过程能产生特定抗体①图中给小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？提示刺激机体发生免疫应答，从而产生特定的浆细胞。②若仅考虑细胞的两两融合，在获取杂交细胞的过程中，淘汰的细胞有几种类型？为什么？提示有未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞两种类型。出现不同类型是因为细胞融合不是100%的，且是随机的。③应用制备单克隆抗体靶向制剂是单克隆抗体在临床上实际应用的一方面；由于单克隆抗体可以

地识别抗原，在疾病诊断上也有一定的临床价值。高度特异性考向动物细胞融合和单克隆抗体7.(多选)如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是A.若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合细胞和b细胞之间的融合一般需要促融处理后才能实现细胞的形成与a、b细胞质膜的流动性有关细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因考向突破强化关键能力√√若a细胞和b细胞是植物细胞，应该先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。8.(2022·江苏东台高三月考)如图表示利用经抗原免疫后的B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞进行杂交，制备单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：(1)在单克隆抗体的制备过程中，应用了细胞工程中的________________和________________两大技术。(2)将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次，其目的是_____________________________________。动物细胞融合动物细胞培养加强免疫刺激小鼠产生更多的淋巴细胞(3)培养杂交细胞的培养基中需加入动物血清，原因是___________________________________，植物组织培养的培养基与该培养基在物理性质方面相比，需要添加______，杂交细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是__________________。补充细胞生长所需的未知营养物质琼脂定期更换培养液(4)对筛选出来的杂交细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液____(填“”或“10”)mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。由于稀释后密度是3～10个细胞/mL，要使每个孔内不多于一个细胞，则每孔应该加入细胞稀释液为0.1mL，这样可以达到单克隆培养的目的。(5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(如癌变细胞等)并与之结合，而不攻击正常细胞，故可制成“生物导弹”，这是利用了_______________________________。抗原与抗体能高度特异性结合由于抗体能够与抗原特异性结合，因此将单克隆抗体制成“生物导弹”，可以保证将药物定向带到癌变部位，达到定向治疗的目的，同时也不攻击正常细胞。重温高考真题演练1.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况√12345单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；单抗制备过程中通常是免疫后将脾脏破碎，然后用离心法将脾脏细胞(包含各种产生或不产生抗体的B细胞)和红细胞分开，然后用脾细胞与骨髓瘤细胞融合，而不能直接分离出浆细胞，B错误；12345非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。123452.(2021·浙江1月选考，18改编)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是A.步骤①的操作不需要在无菌环境中

进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培养过程中不会发生癌变1234√51234步骤①的操作需要在无菌环境下进行，A错误；在制备动物细胞悬液时用机械的方法或用胰蛋白酶等处理，使组织块分散成单个细胞，B错误、C正确。53.(多选)(2019·江苏，23)如图为杂交细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞质膜的流动性是细胞融合的基础1234√√√512345动物细胞融合可以用灭活的仙台病毒、聚乙二醇(PEG)、电场等进行诱导，A正确；两两融合的细胞包括：免疫B细胞与免疫B细胞的融合细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞、杂交细胞，据题干信息骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中无法生长，因此骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞在HAT培养液中无法生长，而免疫B细胞与免疫B细胞的融合细胞不能无限增殖，故不能生长，杂交细胞可以在HAT培养液中生长，B错误；1234融合后产生的杂交细胞并不是都能表达产生所需的单克隆抗体，还需要进一步筛选才能用于生产，C正确；动物细胞融合依据的原理是细胞质膜的流动性，D正确。54.(2021·湖南，22)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：1234(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是_________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的___________断开。限制性内切核酸酶(限制酶)磷酸二酯键5(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____________________________________________________________________________。1234(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是___________________________________________________________________________动物胚胎细胞分化程度低，恢复清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够的营养其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其_______________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为________________________________(答出两点即可)，功能上具有_____________。细胞体积小，细胞核大，核仁明显的全能性全能性十分困难发育51234(4)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的___细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路：______________________________________________________________________。取动物A浆和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交55.(2020·全国Ⅰ，38)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。12345回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_________________________________________________。诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞利用小鼠甲制备单克隆抗体时，先要给小鼠甲注射相应的抗原，目的是获得经免疫的、能产生相应抗体的浆细胞。12345(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：___________________________________________________________________________________。取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液12345利用小鼠甲的脾脏制备单细胞悬液的主要步骤是①取小鼠甲的脾脏并剪碎；②用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞；③利用培养液将分散的细胞制成细胞悬液。12345(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于____________，使用该培养基进行细胞培养的结果是______________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是______________________________。选择培养基只有杂交细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性12345为了得到所需要的杂交细胞，在细胞培养过程中要进行筛选。第一次筛选(筛选1)是利用选择培养基进行筛选，在选择培养基上只有融合的杂种细胞才能生长，未融合的、同种细胞融合的细胞都不能存活。后续过程还需要利用抗原与抗体的反应具有特异性的原理进行多次筛选(筛选2)，目的是得到能产生所需要的抗体并能无限增殖的杂交细胞。12345(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交细胞大量增殖，可采用的方法有____________________若要将得到的杂交细胞进行大量培养，可以在体外条件下进行大规模培养或将其注射到小鼠腹腔内增殖。______________________________________(答出2点即可)。将杂交细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养12345一、易错辨析1.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理(

)2.动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH(

)3.制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交细胞(

)4.灭活的病毒能促进动物细胞融合，但不能促进植物细胞融合(

)5.克隆动物都只具备一个亲本的遗传特性(

)6.克隆动物的制备属于有性繁殖(

)×√√√五分钟查落实××二、填空默写1.(选择性必修3P64)动物细胞核移植技术：_____________________________________________________________________________________________________________________________________。2.(选择性必修3P65)动物细胞培养技术：指____________________________________________________________________________________________________________________________。3.(选择性必修3P65～66)原代培养：指______________________________

。指把一个动物细胞的细胞核移植到一个已经去除细胞核的成熟卵母细胞中，并使重组细胞发育为一个新的胚胎，继而发育为动物新个体的技术从动物体内获得相关组织，分散成单个细胞后，模拟体内环境，在温度适宜、营养充足、无菌等条件下培养，使其继续生长、增殖的技术从供体获取细胞或组织后进行的初次培养4.(选择性必修3P66)传代培养：___________________________________

。5.(选择性必修3P66)动物细胞融合技术指___________________________

的技术。6.(选择性必修3P67)单克隆抗体：利用单克隆抗体制备技术产生的_____

的抗体。7.(选择性必修3P69)干细胞：指动物(包括人)胚胎及某些器官中同时具有

的细胞。将原代培养的细胞继续转接到新的培养基上继续培养的过程在一定条件下将两个或多个动物细胞，通过物理、化学、或生物方法，结合形成一个细胞化学性质单一、特异性强自我更新和分化能力课时精练一、单项选择题1.(2022·泰州高三期中)下列关于细胞工程的叙述，不正确的是A.将胚胎或幼龄动物组织制成单细胞后需去除胰蛋白酶B.细胞质膜外表面糖蛋白是培养细胞发生贴壁的重要因素C.植物组织培养过程中通常需要进行更换培养基的操作D.宜在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体√123456789101112132.下图是某动物细胞培养时，培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果。下列相关叙述不正确的是A.实验中要控制胃蛋白酶溶液浓度和处

理时间，以免损伤细胞B.培养液中应适当加入青霉素、链霉素，

以避免杂菌污染C.曲线bc段产生的主要原因是培养液中

营养物质不足及有害代谢产物积累等D.为获得更多的该动物细胞，最好在第6天进行分瓶培养√12345678910111213动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶处理，因此实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞，A错误；动物细胞培养需要无菌环境，因此培养液中应适当加入青霉素、链霉素等抗生素，以避免杂菌污染，B正确；12345678910111213曲线bc段表示活细胞密度减少而死细胞密度增加，产生的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累等，C正确；图示第6天时，活细胞由于营养物质不足等原因而出现了下降现象，因此为获得更多的该动物细胞，最好在第6天进行分瓶培养，D正确。123456789101112133.干细胞具有能够分裂、分化成为人体任何一种组织的潜能，被医学界称为“万用细胞”。下列有关干细胞的叙述，错误的是A.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等B.成体干细胞具有组织特异性C.胚胎干细胞和成体干细胞均具有发育成完整个体的能力D.用正常人(异体)的造血干细胞治疗白血病，白血病患者体内会发生排

斥反应√123456789101112131234567891011胚胎干细胞具有发育成完整个体的潜能，成体干细胞只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力，C错误。12134.对RNA病毒进行核酸检测需要通过PCR技术进行扩增，其周期长、专业技术和设备要求高，很多科研单位开发了能快速进行病毒检测的免疫试剂盒。下图是某科研人员提出的制备检测病毒的单克隆抗体的技术路线。下列说法错误的是12345678910111213病毒的核酸检测需要用到逆转录酶B.给动物注射的抗原A是病毒的RNAC.图中a表示对杂交细胞的克隆化培养D.可用聚乙二醇作为细胞融合的促融剂√123456789101112131234567891011给动物注射的抗原A是病毒的蛋白质，B错误；图中a表示对杂交细胞的克隆化培养从而获得较多的待检测抗体，便于检测，C正确。12135.中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是A.卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法B.兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质C.重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程D.在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化√123456789101112131234567891011卵母细胞去核的方法有显微操作直接去除、紫外光短时间照射、化学物质处理等方法，A项错误。12136.将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合(只考虑细胞两两融合)后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如表。下列相关叙述正确的是1234567891011细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X1213A.在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖B.可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhhC.可以确定①②③的相关基因组成相同D.可以将T(t)基因定位于人第17号染色体√1234567891011细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X12131234567891011融合细胞有多种，由题意知，在HAT培养基上，同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖，A错误；细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X12131234567891011由表格信息可知，①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，由于有丝分裂中期一条染色体上含有2个染色单体，因此此时细胞中含有HH基因，鼠染色体上的基因型是TTTThhhh，所以融合细胞①的基因型是TTTTHHhhhh，B正确；细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X12131234567891011由于“增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失”，故②③基因型不能确定，C错误；细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X12131234567891011据表格信息可知，残留人染色体编号均含有17号染色体，而①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，故可将H(h)基因定位于17号染色体上，D错误。细胞融合细胞人鼠细胞样编号残留人染色体编号ttHHTThh①17②10、10、17③17、X12137.近日，南京农业大学的科研人员用动物干细胞研发出我国第一块肌肉干细胞培养肉，该团队使用第六代猪肌肉干细胞，经过约20天培养得到重达5克的培养肉。下列有关叙述错误的是A.培养猪肌肉干细胞，通常需要用胰蛋白酶分散成单个细胞B.在培养过程中通常要通入5%的CO2，以刺激细胞呼吸C.培养肉往往使用添加了糖、氨基酸等多种营养物质的培养液D.培养肉作为食品上市还要经过产品安全性等相关性能的评估1234567891011√12131234567891011培养猪肌肉干细胞，通常需要用胰蛋白酶分散成单个细胞，A正确；培养过程中加入CO2是为了维持培养液pH的相对稳定，B错误；培养肉的培养液中需要添加糖、氨基酸等多种营养物质，C正确；培养肉作为食品上市还要经过产品安全性等相关性能的评估，D正确。1213二、多项选择题8.如图为科学家培育克隆猴的基本步骤，下列相关叙述正确的是A.所需猴卵母细胞需发育至减数第二

次分裂的中期B对A猴卵母细胞去核是为保证克隆猴

的核遗传物质都来自B猴C必须将重组细胞培养至桑椹胚或原肠胚时才能移植入代孕受体猴的卵母细胞质中含有促进B猴体细胞核全能性表达的物质1234567891011√√√12131234567891011应选用桑椹胚或囊胚期的早期胚胎进行胚胎移植，C错误；卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，故体细胞的细胞核需移植到去核卵母细胞后才能表现出全能性，D正确。12139.下图是生产抗新冠病毒的单克隆抗体的过程，下列相关叙述正确的是A.②过程融合的杂交细胞不止一种B.④过程若进行抗体检测结果为阴

性，应重新实验C.③过程经过选择培养后只有自身

融合的细胞死亡D.为保证获得相应的浆细胞，①过程给小鼠注射大量的新冠病毒1234567891011√√12131234567891011生物体内含有多种抗原刺激产生形成的浆细胞，故②过程融合形成的杂交瘤细胞有多种，A项正确；④过程若进行专一抗体检测结果为阴性，说明没有提取到相应抗原刺激产生的浆细胞，应重新实验，B项正确；③过程经过选择培养后自身融合细胞和未融合的细胞都死亡，C项错误；为保证获得相应的浆细胞，①过程应给小鼠注射适量的新冠病毒的相应抗原，D项错