南医大药物分析-莨菪烷类抗胆碱药物的分析2

教学目的与要求

掌握莨菪烷类抗胆碱药物的鉴别试验和含量测定方法。熟悉莨菪烷类抗胆碱药物的基本结构和主要性质。了解莨菪烷类抗胆碱药物的杂质检查。当前第1页\共有81页\编于星期日\20点当前第2页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨基醇与各种不同有机酸缩合酯+生物碱当前第3页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(Tropane)当前第4页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tropine)当前第5页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸阿托品当前第6页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸莨菪碱当前第7页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构区别硫酸莨菪碱硫酸阿托品当前第8页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸莨菪碱硫酸阿托品熔点、溶解度、旋光度、分子量当前第9页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸后马托品当前第10页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱当前第11页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸东莨菪碱当前第12页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物甲溴酸东莨菪碱当前第13页\共有81页\编于星期日\20点莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱当前第14页\共有81页\编于星期日\20点二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品莨菪醇莨菪酸2.碱性与生物碱沉淀剂产生有色沉淀

阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易与酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.当前第15页\共有81页\编于星期日\20点二、主要性质当前第16页\共有81页\编于星期日\20点一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。二、鉴别试验托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类当前第17页\共有81页\编于星期日\20点一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。二、鉴别试验莨菪酸硝基化脱羧化共轭结构深紫当前第18页\共有81页\编于星期日\20点二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验当前第19页\共有81页\编于星期日\20点三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀二、鉴别试验生物碱沉淀试剂反应条件及结果碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀当前第20页\共有81页\编于星期日\20点三、沉淀反应二、鉴别试验当前第21页\共有81页\编于星期日\20点四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的或吸收光谱的一致性来进行鉴别以及吸光系数二、鉴别试验当前第22页\共有81页\编于星期日\20点四、光谱鉴别法红外光谱法CHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别二、鉴别试验当前第23页\共有81页\编于星期日\20点五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等二、鉴别试验当前第24页\共有81页\编于星期日\20点六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色二、鉴别试验当前第25页\共有81页\编于星期日\20点Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应当前第26页\共有81页\编于星期日\20点三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制当前第27页\共有81页\编于星期日\20点一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。如氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.0~5.5，可控制酸性杂质三、特殊杂质与检查当前第28页\共有81页\编于星期日\20点一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查当前第29页\共有81页\编于星期日\20点一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查当前第30页\共有81页\编于星期日\20点一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。三、特殊杂质与检查当前第31页\共有81页\编于星期日\20点本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：当前第32页\共有81页\编于星期日\20点其他生物碱ab当前第33页\共有81页\编于星期日\20点二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查CHP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度三、特殊杂质与检查当前第34页\共有81页\编于星期日\20点第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法当前第35页\共有81页\编于星期日\20点UV

酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量第四节含量测定当前第36页\共有81页\编于星期日\20点酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定第四节含量测定当前第37页\共有81页\编于星期日\20点当前第38页\共有81页\编于星期日\20点酸性染料比色法第四节含量测定当前第39页\共有81页\编于星期日\20点影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含量测定当前第40页\共有81页\编于星期日\20点影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定第四节含量测定当前第41页\共有81页\编于星期日\20点水相最佳pH当前第42页\共有81页\编于星期日\20点影响因素

酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节含量测定当前第43页\共有81页\编于星期日\20点影响因素有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第四节含量测定当前第44页\共有81页\编于星期日\20点影响因素水分的影响：第四节含量测定当前第45页\共有81页\编于星期日\20点影响因素酸性染料里面的有色杂质影响结果，先用萃取溶剂萃取除去第四节含量测定当前第46页\共有81页\编于星期日\20点应用示例氢溴酸东莨菪碱片的含量测定精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。第四节含量测定本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低的有机碱性药物（生物碱）制剂的含量或含量均匀度的测定。当前第47页\共有81页\编于星期日\20点

当前第48页\共有81页\编于星期日\20点应用示例硫酸阿托品片的含量测定当前第49页\共有81页\编于星期日\20点应用示例硫酸阿托品片的含量测定当前第50页\共有81页\编于星期日\20点应用示例硫酸阿托品片的含量测定当前第51页\共有81页\编于星期日\20点应用示例硫酸阿托品片的含量测定当前第52页\共有81页\编于星期日\20点二、非水溶液滴定法第四节含量测定当前第53页\共有81页\编于星期日\20点二、非水溶液滴定法第四节含量测定当前第54页\共有81页\编于星期日\20点二、非水溶液滴定法第四节含量测定当前第55页\共有81页\编于星期日\20点三、高效液相色谱法第四节含量测定当前第56页\共有81页\编于星期日\20点当前第57页\共有81页\编于星期日\20点三、高效液相色谱法第四节含量测定当前第58页\共有81页\编于星期日\20点三、高效液相色谱法第四节含量测定当前第59页\共有81页\编于星期日\20点应用示例第四节含量测定当前第60页\共有81页\编于星期日\20点当前第61页\共有81页\编于星期日\20点应用示例第四节含量测定当前第62页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考1、莨菪烷类生物碱的特征反应是A、与三氯化铁反应B、与生物碱沉淀剂反应C、重氮化-偶合反应D、丙二酰脲反应E、Vitali反应当前第63页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考2、药物水解后，与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味的药物是A、氢溴酸山莨菪碱B、异烟肼C、硫酸奎宁D、盐酸氯丙嗪E、地西泮当前第64页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考3、影响酸性染料比色法的最主要因素是A、水相pHB、酸性染料的种类C、有机溶剂的种类D、酸性染料的浓度E、水分的影响当前第65页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考4、采用酸性染料比色法测定药物含量，如果溶液pH过低对测定造成的影响是A、使In-浓度太低，而影响离子对的形成B、有机碱药物呈游离状态C、使In-浓度太高D、没有影响E、有利于离子对的形成当前第66页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考5、离子对HPLC要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析碱性物质时常用的离子对试剂有A、戊烷磺酸钠B、庚烷磺酸钠C、十二烷基磺酸钠D、四丁基溴化铵E、四丁基氢氧化铵当前第67页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考6、离子对HPLC要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析酸性物质时常用的离子对试剂有A、戊烷磺酸钠B、庚烷磺酸钠C、十二烷基磺酸钠D、四丁基溴化铵E、四丁基氢氧化铵当前第68页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考7、氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方法是A、水溶液加入氨试液产生浑浊B、水溶液加入氨试液不得发生浑浊C、加入氢氧化钾试液则有浑浊D、加氢氧化钾试液无浑浊E、加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的类白色浑浊当前第69页\共有81页\编于星期日\20点练习与思考8、ChP2010硫酸阿托品含量测定：取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸与醋酐各10mL溶解后，加结晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。已知：取样量为0.5009g，高氯酸滴定液浓度C=0.1028mol/L，V空=0.04mL；V样=7.05mL；(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O分子量694.83当前第70页\共有81页\编于星期日\20点思考题简述酸性染料比色法的原理和影响因素。当前第71页\共有81页\编于星期日\20点当前第72页\共有81页\编于星期日\20点习题1．药品临床试验管理规范的英文缩写是（）A.GAPB.GCPC.GLPD.GMPE.GSP当前第73页\共有81页\编于星期日\20点习题2．关于中国药典最恰当的说法是（）A.关于药物分析的书B.收载我国生产的所有药物的书C.关于药物的词典D.国家监督管理药品质量的法定技术标准E关于中草药和中成药的技术规范当前第74页\共有81页\编于星期日\20点习题3.药品质量的全面控制是()A.药品研究、生产、供应、临床使用和有关技术的管理规范、条例的制度与实施B.药品生产和供应的质量控制C.真正做到把准确、可靠的药品检验数据作为产品质量评价、科研成果鉴定的基础和依据D.帮助药品检验机构提高工作质量和信誉E.树立全国自上而下的药品检验机构的技术权威性和合法地位当前第75页\共有81页\编于星期日\20点习题6．日本药局方的英文缩写是（）A.BPB.JPC.USPD.CHPE.以上都不是

当前第76页\共有81页\编于星期日\20点习题7．GLP的中文全称是（）A.药品非临床研究质量管理规范B.药品生产质量管理规范C.药品经营质量管理规范