诊断学基础血液学检查课件

第二章临床血液学检查学习目标1.掌握：血液一般检查的参考值和临床意义。2.熟悉：血细胞直方图的临床意义，ABO和RH血型鉴定、交叉配血的方法和临床意义。3.了解：溶血性贫血实验室检查的分析和临床意义。血液是由细胞成分（红细胞、白细胞和血小板）和血浆组成，临床上常根据血液成分的变化来诊断血液系统疾病及相关系统疾病。

血液一般检查

血浆(plasma)中性neutrophil

血液红细胞粒细胞酸性eosinophil碱性basophil有形成分白细胞单核细胞monocyte血小板淋巴细胞lymphocyte第一节血液一般检查血液一般检查主要是指对外周血中细胞成分的数量和形态的检查及与血细胞有关的实验室检查，包括红细胞、白细胞、及血小板等参数的检查。血细胞数量和形态的检查是临床上最常用、最基本的检查内容。近年来由于血液学分析仪器的广泛应用，血液常规检测的项目增多包括血红蛋白测定、红细胞计数、红细胞平均值测定和红细胞形态检测；白细胞计数及分类计数；血小板计数、血小板平均值测定和血小板形态检测。一、红细胞参数检查（一）红细胞计数和血红蛋白的测定通过红细胞计数和血红蛋白测定，发现其变化而借以诊断有关疾病。健康人群红细胞和血红蛋白参考值，见表。健康人群红细胞和血红蛋白参考值，见表。

临床意义（1）生理变化1）增多：常见于新生儿、高原居民等，当剧烈运动或者情绪激动时，RBC和HB可一过性增多，男性常高于女性。2）减少：常见于生长发育迅速，造血原料不足的6个月-2岁的婴幼儿，红细胞及血红蛋白一般比正常成人低约10％～20％；营养摄取、利用和造血功能减退的老年人，血容量增加的妊娠中、晚期均可使红细胞数及血红蛋白减少。临床意义（1）生理变化1）增多：常见于新生儿、高原居民等，当剧烈运动或者情绪激动时，RBC和HB可一过性增多，男性常高于女性。2）减少：常见于生长发育迅速，造血原料不足的6个月-2岁的婴幼儿，红细胞及血红蛋白一般比正常成人低约10％～20％；营养摄取、利用和造血功能减退的老年人，血容量增加的妊娠中、晚期均可使红细胞数及血红蛋白减少。红细胞值生理性变化的临床意义临床意义（2）病理性变化1）增多：指单位容积血液中红细胞数及血红蛋白量高于参考值高限。多次检查成年男性红细胞>6．0×1012／L，血红蛋白>170g／L；成年女性红细胞>5．5×1012／L，血红蛋白>160g／L时即认为增多。临床意义可分为相对性增多和绝对性增多两类：1．相对性增多

是因血浆容量减少，使红细胞容量相对增加，提示各种原因引起的血液浓缩，常见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、脱水、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进危象、糖尿病酮症酸中毒。临床意义2．绝对性增多

临床上称为红细胞增多症(polycythemia，erythrocytosis)，按发病原因可分为继发性和原发性两类，后者称为真性红细胞增多症。(1)继发性红细胞增多症：是血中红细胞生成素增多所致。提示慢性缺氧性疾病使红细胞代偿性增多，常见于肺源性心脏病。临床意义(2)原发性增多(真性红细胞增多症，polycythermavera)：是一种原因不明的红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造血干细胞受累所致。其特点为红细胞持续性显著增多，可高达(7～10)×1012／L，血红蛋白达180～240g／L，全身总血容量也增加，白细胞和血小板也不同程度增多。本病属慢性和良性增生，部分病人可转变为白血病等。临床意义2）减少：指单位容积血液中红细胞数及血红蛋白量低于参考值低限。见于各种贫血。根据贫血产生的病因和发病机制不同，可将贫血分为红细胞生成减少、红细胞破坏增多、红细胞丢失过多。红细胞参数检查（二）红细胞比容测定红细胞比容（HCT）又称为红细胞压积（PCV），是指红细胞在血液中占容积的比值。参考值：男性，0.4-0.5L/L(40%-50%);女性，0.35-0.45L/L(35%-45%)；新生儿0.6-0.7L/L（60%-70%）；1--3岁0.35-0.47L/L（35%-47%）。红细胞参数检查临床意义（1）增多：常见于各种原因引起的红细胞增加或者血液浓缩，如严重脱水、大面积烧伤，真红细胞增多症，肺源性心脏病等。（2）减少：常见于各种贫血和血液稀释。红细胞参数检查（三）红细胞三种平均值1.红细胞平均体积（MCV）指每个红细胞的平均体积，以飞升(fl)为单位，1L=1015fl.。2.红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）指每个红细胞内血红蛋白平均含量，以皮克（pg）表示，1g=1012pg。3.红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）指每升红细胞平均所含血红蛋白浓度，以g/L表示。参考值:三种平均值主要用于贫血的形态分类红细胞参数检查（四）红细胞体积分布宽度（RDW）红细胞体积大小分布的离散程度，常用变异系数（CV）表示。参考值：RDW-CV：14.5%-15.5%。临床意义：(1)用于缺铁性贫血的筛选诊断和疗效观察：有95%的缺铁性贫血患者的RDW值增大，且早于其他参数。（2）对于小细胞低色素贫血的鉴别诊断：缺铁性贫血时RDW值增大，轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血时RDW值正常。（3）用于贫血形态分类(MCV/RDW分类法)：对贫血的病因分析及鉴别此方法优于三种平均值分类法。贫血MCV/RDW分类法二、白细胞参数检查主要包括：白细胞计数和白细胞分类计数。(一)白细胞计数【参考值】

成人(3.5～9.5)×109／L；新生儿(15～20)×109／L；11～12个月(11～12)×109／L，儿童（8-10）×109／L。【临床意义】

白细胞总数的增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响，淋巴细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。白细胞总数改变的临床意义详见白细胞分类计数中临床意义的有关内容。(二)白细胞的分类计数临床意义（1）白细胞总数和中性粒细胞1）生理变化：外周血白细胞及中性粒细胞一天内存在着变化，下午较早晨为高。妊娠后期及分娩时，剧烈运动或劳动后，饱餐或淋浴后，高温或严寒等均可使其暂时性升高。新生儿、婴幼儿较成人高。临床意义2）病理性增多急性感染：特别是化脓性球菌(如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌等)感染为最常见的原因。应注意，在某些极重度感染时，白细胞总数不但不高，反而减低。急性中毒：代谢紊乱所致的代谢性中毒，如糖尿病酮症酸中毒、尿毒症和妊娠中毒症；急性化学药物中毒，如急性铅、汞中毒及安眠药中毒等；生物性中毒如昆虫毒、蛇毒、毒蕈中毒等白细胞及中性粒细胞均可增多。临床意义急性大出血：在急性大出血后1～2h内，周围血中的血红蛋白的含量及红细胞数尚未下降，而白细胞数及中性粒细胞却明显增多，特别是内出血时，白细胞可高达20×109／L。临床意义严重的组织损伤或急性溶血大量血细胞破坏：严重外伤，较大手术后，大面积烧伤，急性心肌梗死及严重的血管内溶血后12～36h内，白细胞总数及中性粒细胞可增多。临床意义白血病、骨髓增殖性疾病及恶性肿瘤：大多数白血病患者外周血中白细胞数量呈不同程度的增多，可达数万甚至数十万。急性或慢性粒细胞白血病时，还出现中性粒细胞增多，并伴外周血中细胞质量改变。真性红细胞增多症，原发性血小板增多症和骨髓纤维化等骨髓增殖性疾病均可有中性粒细胞增多。各类恶性肿瘤，特别是消化道恶性肿瘤，如肝癌、胃癌等可引起白细胞及中性粒细胞增多。临床意义3)病理性减少：白细胞总数低于4×109／L称白细胞减少(1eukopenia)。当中性粒细胞绝对值低于1.5×109／L，称为粒细胞减少症，低于0.5×109／L时称为粒细胞缺乏症。引起中性粒细胞减少的原因有：临床意义感染：特别是革兰阴性杆菌感染，某些病毒感染性疾病，如流感、病毒性肝炎、水痘、风疹、巨细胞病毒感染时，白细胞亦常减低。某些原虫感染，如疟疾、黑热病时白细胞亦可减少。临床意义血液系统疾病：再生障碍性贫血，非白血性白血病、恶性组织细胞病、巨幼细胞贫血、严重缺铁性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿，以及骨髓转移癌等，白细胞减少同时常伴血小板和（或）红细胞减少。临床意义物理、化学因素损伤：是引起白细胞减少的常见原因。X线、γ射线、放射性核素等物理因素，化学物质如苯、铅、汞等，以及化学药物如氯霉素、磺胺类药、抗肿瘤药、抗糖尿病及抗甲状腺药物等均可引起白细胞及中性粒细胞减少。临床意义单核一吞噬细胞系统功能亢进：各种原因引起的脾脏肿大及其功能亢进，如门脉性肝硬化、淋巴瘤、Niemann-Pick病常见白细胞及中性粒细胞减少。临床意义免疫性破坏增加：自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮等，产生自身抗体导致白细胞减少。药物性免疫，其中由药物所致的变态反应性粒细胞缺乏最常见。临床意义（2）嗜酸性粒细胞

嗜酸性粒细胞(eosinophil，E)细胞呈圆形，直径为13～15μm。胞质内充满粗大、整齐、均匀、紧密排列的砖红色或鲜红色嗜酸性颗粒，折光性强。胞核多为两叶，呈眼镜状，深紫色。嗜酸性粒细胞容易破碎，颗粒可分散于细胞周围。临床意义1)嗜酸性粒细胞增多(eosinophilia)变态反应性疾病药物过敏、支气管哮喘、荨麻疹、食物过敏、湿疹、剥脱性皮炎、血管神经性水肿、血清病等外周血嗜酸性粒细胞增多可达10％以上。临床意义嗜酸性粒细胞减少(eosinopenia)：常见于传染病早期，如伤寒、副伤寒初期，大手术、烧伤等应激状态，或长期应用肾上腺皮质激素后或者肾上腺皮质功能亢进症，其临床意义甚小。临床意义嗜碱性粒细胞

嗜碱性粒细胞(basophil，B)胞体呈圆形，直径为10～12μm。胞质紫红色内有少量粗大但大小不均、排列不规则的黑蓝色嗜碱性颗粒，常覆盖于核面上。胞核一般为2～3叶，因被颗粒遮盖，核着色较浅，而使分叶有模糊不清感。临床意义1）嗜碱性粒细胞增多(basophilia)过敏性疾病：过敏性结肠炎、药物、食物、吸入物超敏反应、红斑及类风湿关节炎等嗜碱性细胞增多。血液病：慢性粒细胞自血病、嗜碱性粒细胞白血病，以及骨髓纤维化等均可见嗜碱性粒细胞增多。临床意义恶性肿瘤：特别是转移癌时嗜碱性粒细胞增多，其机制不清楚。其他：如糖尿病、传染病如水痘、流感、天花、结核等，均可见嗜碱性粒细胞增多。临床意义2)嗜碱性粒细胞减少(basophilopenia)无临床意义。（4）单核细胞单核细胞(monocyte，M)胞体大，直径为14～20μm，呈圆形或不规则形。胞质较多，染淡蓝或灰蓝色，内含较多的细小、灰尘样的紫红色颗粒。细胞核大，核形不规则，呈肾形、马蹄形等，常折叠扭曲，淡紫红色，染色质细致、疏松如网状。临床意义1)单核细胞增多(mcmocytosis)

婴幼儿及儿童单核细胞可增多，属生理性增多。病理性增多见于：感染性疾病：如感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染的恢复期、活动性肺结核等，单核细胞明显增多临床意义血液病：如单核细胞白血病、粒细胞缺乏症恢复期、多发性骨髓瘤、恶性组织细胞病、淋巴瘤、骨髓增生异常综合征等也可见单核细胞增多。临床意义结缔组织病，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。急性感染恢复期。临床意义单核细胞减少(monocytopenia)

无临床意义。（5）淋巴细胞(lymphocyte，L)可分为大淋巴细胞与小淋巴细胞，前者直径在10～15μm，占10％；后者直径为6～10μm，占90％。胞体呈圆形或椭圆形。大淋巴细胞的胞质丰富，呈蔚蓝色，内含少量紫红色嗜天青颗粒；小淋巴细胞胞质很少，甚至完全不见，呈深蓝色。胞核均呈圆形或椭圆形，偶见凹陷，深紫色，染色质聚集成块状。临床意义淋巴细胞增多(1ymphocytosis)

婴儿出生时淋巴细胞约占35％，粒细胞占65％。4～6天后淋巴细胞可达50％，与粒细胞比例大致相等。2～3岁时高达70%，4～5岁左右降至50%，以后逐渐达正常成人水平。此为儿童期的淋巴细胞生理性增多。临床意义病理性淋巴细胞增多见于：感染性疾病：主要为病毒感染，如麻疹、风疹、水痘、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热，以及柯萨奇(Coxsackie)病毒、腺病毒、巨细胞病毒等感染，也可见于百日咳杆菌、结核分枝杆菌、布鲁菌、梅毒螺旋体、弓形虫等的感染。也见于某些细菌感染，急性细菌感染恢复期也增多。临床意义造血系统疾病：急性和慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。移植的排斥反应。临床意义

淋巴细胞减少(lymphocytopenia)主要见于长期使用免疫抑制剂（应用肾上腺皮质激素）、以及放射线损伤、细胞免疫缺陷性疾病、丙种球蛋白缺乏症等。三、血小板参数检查【原理】

血小板计数(plateletcount，PC或Plt)是计数单位容积(L)周围血液中血小板的数量，可以采用镜下目视法，目前多用自动化血细胞分析仪检测。血小板形态血小板红细胞血小板参数包括血小板计数、血小板平均体积、血小板体积分布宽度等，是诊断止血和凝血障碍的重要指标。（一）血小板计数（PLT）参考值：125-350×109／L；临床意义临床意义PLT<50×109／L易出现出血症状；PLT<10×109／L常有自发性出血倾向；PLT>600×109／L提示恶性疾病存在；PLT>1000×109／L常出现血栓。临床意义（1）生理变化增多常见于午后、进食、剧烈运动，冬季、妊娠中后期；减少常见于月经期、新生儿。临床意义（2）病理变化血小板数超过400×109／L为血小板增多。反应性增多：见于急性感染、急性出血、溶血性贫血、某些癌症患者，这种增多是轻度的，多在500×109／L以下。原发性增多：见于骨髓增殖性疾病和恶性肿瘤，如真性红细胞增多症和原发性血小板增多症、骨髓纤维化早期及慢性粒细胞白血病等。临床意义

血小板减少

PLT低于100×109／L称为血小板减少。可见于：①血小板的生成障碍：见于再生障碍性贫血、放射性损伤、急性白血病、巨幼细胞贫血、骨髓纤维化晚期等。②血小板破坏或消耗增多：见于原发性血小板减少性紫癜(ITP)、SLE、恶性淋巴瘤、上呼吸道感染、风疹、新生儿血小板减少症、输血后血小板减少症、DIC、TTP、先天性血小板减少症。③血小板分布异常：如脾肿大(肝硬化、Banti综合征)、血液被稀释(输入大量库存血或大量血浆)等。（二）血小板平均容积（MPV）血小板平均容积(meanplateletvolume，MPV)

即每个血小板的平均体积，为血细胞分析仪的计算值。在分析其临床意义时应结合PLT才有意义。【参考值】

MPV为7～11fl【临床意义】1．血小板平均容积(meanplateletvolume，MPV)

代表单个血小板的平均容积。增加见于：①血小板破坏增加而骨髓代偿功能良好者；②造血功能抑制解除后，MPV增加是造血功能恢复的首要表现。减低见于：①骨髓造血功能不良，血小板生成减少；②有半数白血病患者MPV减低；③MPV随血小板数而持续下降，是骨髓造血功能衰竭的指标之一。（三）血小板体积分布宽度（PDW）血小板分布宽度(plateletdistributionwidth，PDW)

反映血小板容积大小差异，用所测单个血小板容积大小的变易系数(CV％)表示。【参考值】PDW为15％～17％。临床意义PDW增高表明血小板大小悬殊，见于急性髓系白血病、巨幼细胞贫血、慢性粒细胞白血病、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。PDW减少表明血小板的均一性高，见于反应性血小板增多症。四、血细胞形态学检查（一）红细胞形态检查（二）白细胞形态学检查红细胞检测

－－RBC形态学改变

正常红细胞(normocyte,normochromic)

红细胞检测－－RBC大小异常红细胞大小不等(anisocytosis)常见于缺铁性贫血

红细胞检测－－RBC大小异常

小红细(microcyte)：直径<6um

伴中心淡染区扩大低色素性(hypochromic)常见于缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血红细胞检测－－RBC大小异常大红细胞(macrocyte)：

直径>10um巨红细胞：(megalocyte)

直径>15um常伴中心淡染区消失。常见于巨幼细胞性贫血。红细胞检测－－RBC形态异常球形细胞(spherocyte)椭圆形细胞(elliptocyte)口形细胞(stomatocyte)靶形细胞(targetcell)红细胞检测－－RBC形态异常

镰形细胞(sicklecell)泪滴形细胞(dacryocyte)棘形细胞(acanthocyte)红细胞检测－－RBC结构异常

嗜碱性点彩(basophilicstippling)有核红细胞(nucleatederythrocyte)（二）白细胞形态学检查1.外周血正常白细胞形态2.外周血异常白细胞形态中性粒细胞形态异常

中毒性的变化细胞大小不均：慢性感染、化脓性炎症。中毒性颗粒：化脓性感染、

败血症、中毒

、大面积烧伤、严重传染病、恶性肿瘤等。空泡变性：严重感染、败血症。核变性(固缩、溶解、碎裂)中性粒细胞形态异常杜勒小体：提示严重感染。

棒状小体(Auer小体)

：提示急性粒细胞性白血病。正常外周血中的中性粒细胞中性粒细胞核象变化

中性粒细胞核象变化

核左移－－杆状核或之前细胞

轻度中度重度(%)＞610～25＞25伴随细胞少量晚中幼粒少量早幼粒幼粒原粒意义：感染、急性溶血、急性中毒和白血病等。

中性粒细胞核象变化

核右移－－核分叶过多(>5叶)意义：巨幼细胞性贫血抗代谢药物治疗后疾病预后不良

异形淋巴细胞Ⅰ型(泡沫型/浆细胞型)Ⅱ型(不规则型/单核细胞型)Ⅲ(幼稚型)

异形淋巴细胞

意义：病毒感染，一般病毒感染>2%传染性单核细胞增多症时>10%药物过敏输血、血透或体外循环后免疫性疾病血小板形态检查红细胞正常血小板形态血小板血小板形态变化五、血细胞直方图的临床应用20世纪50年代，Coulter研制了电阻抗法血细胞分析仪。血细胞为不良导体，用等渗电解质溶液稀释的血细胞悬液通过两侧有稳定电流的小孔时，由于细胞导电性质较电解质溶液低，小孔感应区内电阻增加，瞬间引起电压变化而产生一个脉冲信号，称为通过脉冲。电压变化的程度取决于细胞体积，即细胞体积越大，产生的脉冲越大，脉冲振幅越高。脉冲信号经过放大、甄别、整形后，送入计数系统，而得到细胞计数结果，同时还提供细胞体积分布图形。这些显示细胞群分布情况的图形，称为细胞分布直方图(nomo-gram)。直方图是由测量每个细胞通过小孔感应区的脉冲累积得到的，与细胞计数同时进行分析测量。直方图的横坐标表示细胞体积，纵坐标表示细胞的相对数量。体积数据以飞升(f1)为单位。（二）红细胞体积分布直方图正常红细胞直方图体积分布曲线的显示范围从36～360fl。仪器将大于36fl的颗粒计为红细胞，直方图上反映的是生理状态红细胞的大小。在典型的直方图上，可以看到两个细胞群体：①红细胞主群：从50fl偏上开始，有一个近似两侧对称，基底较为狭窄的正态分布曲线，又称“主峰”。②小细胞群：位于主峰右侧，约分布在130～185fl区域，又称“足趾部”。它是一些二聚体、三聚体、多聚体细胞，小孔残留物和白细胞的反映。正常红细胞直方图正常白细胞直方图异常白细胞分布图正常、异常血小板直方图六、网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyte)是晚幼红细胞到成熟红细胞之间的一个阶段，其胞浆中残有RNA，可经活体染色显示网状结构。

参考值：成人0.5%~1.5%绝对值(24~84)x109/L新生儿0.3%~6%人血涂片示网织红细胞(煌焦油蓝染色)

网织红细胞－－临床意义1.反映骨髓红系造血功能的敏感指标增高：骨髓造血功能旺盛；常见于溶血性贫血、急性失血；缺铁性贫血、巨幼细胞贫血及某些贫血病人治疗后，如补充铁或维生素B12及叶酸后。

减少：造血功能减低，常见于再生障碍性贫血，在骨髓病性贫血(如急性白血病等)时，骨髓中异常细胞大量浸润，使红细胞增生受到抑制，网织红细胞也减少。放、化疗后。临床意义2.作为贫血治疗的疗效判断和治疗性试验的观察指标七、红细胞沉降率

(erythrocytesedimentationrate,ESR)

ESR是指红细胞在一定条件下沉降的速率。

参考值：魏氏法(Westergren)成年男性：0～15mm/h成年女性：0～20mm/h

血沉

测定原理：RBC表面带负电→RBC相互排斥→RBC悬浮于血浆中→RBC沉降较慢

血沉－－影响因素血浆中大分子蛋白纤维蛋白原、球蛋白、免疫复合物血浆中脂类物质胆固醇、甘油三脂RBC数量、大小数量多，ESR↓;数量少，ESR↑细胞大，ESR↑;细胞小，ESR↓

血沉－－临床意义

生理性变化：新生儿：ESR↑妊娠3月以上或月经期：ESR↑老年人：ESR↑高原地区：ESR血沉－－临床意义

病理性变化－－ESR↑炎症性疾病组织损伤或坏死恶性肿瘤

血浆球蛋白相对或绝对升高免疫性疾病高胆固醇血症血沉－－临床意义病理性变化－－ESR↓临床意义小，常见于严重贫血、纤维蛋白原重度缺乏者。第二节

溶血性贫血的实验室检测定义溶血性贫血(hemolyticanemia)是指各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，而骨髓造血功能不能相应代偿而发生的一类贫血。当有轻微溶血时，由于骨髓强大的代偿功能，可不表现出贫血，此时为溶血性疾病。溶血的概念

溶血

：病理状态下，红细胞的寿命缩短，红细胞过多、过早被破坏，称之为溶血。代偿性溶血：在溶血情况下，骨髓代偿性增生，生成红细胞的效率可以补偿过早、过多消亡的红细胞，而不出现贫血，称之为代偿性溶血。溶血性贫血：红细胞的破坏过速、过多，超过代偿能力所发生的贫血，称之为溶血性贫血。

检查目的

肯定溶血证据确定主要溶血部位寻找溶血原因反映红细胞破坏增生的检查红细胞畸形RBC、Hb测定减少，进行性下降血浆游离血红蛋白明显增加血清总胆红素增加，尿中尿胆原（+）排泄增加血红蛋白尿、尿含铁血黄素阳性血清结合珠蛋白降低间接胆红素增高粪便中粪胆原排泄增加高铁血红蛋白血症反映红细胞寿命缩短的检查

51Cr标记红细胞寿命缩短有关红细胞代偿性增生的检查

网织红细胞增多血中出现大量幼红细胞和嗜多色性红细胞骨髓检查呈典型增生性改变确定溶血部位的依据血浆游离Hb增多，血红蛋白尿（+）表示存在血管内溶血；含铁血黄素尿为慢性血管内溶血的依据。

血管内和血管外溶血的鉴别

血管内和血管外溶血的鉴别

确定溶血病因的依据1.红细胞膜缺陷(1)血涂片观察：球形红细胞增多常见于遗传性球形红细胞增多症，椭圆形红细胞常见于遗传性椭圆形红细胞增多症。(2)红细胞渗透脆性试验

是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。是红细胞膜缺陷过筛试验，脆性增加为红细胞膜异常。脆性降低主要见于珠蛋白生成障碍性贫血，血红蛋白C、D、E病，低色素性贫血，肝疾病等。（3）对阵发性睡眠性血红蛋白尿，蔗糖溶血试验为过筛试验，酸溶血试验为确诊试验。（五）蔗糖溶血试验

实验原理

在离子状态蛋白质结构发生某些变化，RBC与血清免疫球蛋白之间发生抗原抗体反应，被补体包围，PNH患者RBC由于膜结构异常，在有补体情况下，容易破坏，发生溶血。试剂

1.蔗糖2.3.8%枸橼酸钠溶液样本要求枸橼酸钠抗凝静脉血2ml（3.8%枸橼酸钠与静脉血比为1：9）

操作程序

将一份枸橼酸钠全血加入9份新鲜配制的糖水中（即0.5g蔗糖+4.5ml蒸馏水+0.5ml抗凝血，或10%蔗糖水5ml+0.5ml抗凝血），混合后，置37℃温箱中孵育30分钟，离心沉淀。结果分析

如有溶血蔗糖液为红色，即为阳性。参考值正常为阴性（三）酸溶血（Hams）试验

实验原理

PNH患者体内存在对补体敏感的红细胞。Hams试验即红细胞在酸性（PH6.4-6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血，而正常人RBC不被溶解，无溶血现象。试剂

1.1/6NHCL2.8.5g/LNaCl溶液样品要求1.机械抗凝静脉血5ml，用0.9%NaCl洗涤数次，取RBC备用（需同时用同型或O型正常人对照）。

2.静脉血2ml分离出血清备用

参考值正常人

阴性临床意义本试验阳性主要见于PNH，确诊意义大。某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性

确定溶血病因的依据2.红细胞酶缺陷高铁血红蛋白还原试验为葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏（G-6-PD）缺陷症的过筛试验，还原率降低常见于G-6-PD缺乏症。变性珠蛋白小体（Heinz）生成试验，G-6-PD荧光斑点试验和活性测定、丙酮酸激酶荧光斑点试验和活性测定等。确定溶血病因的依据3.血红蛋白病（1）血涂片观察（2）异丙醇沉淀试验（3）血红蛋白电泳试验（4）抗碱血红蛋白增高(5)血红蛋白基因PCR技术确定溶血病因的依据4.自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血(autoimmunehemolyticanemia，AIHA)系体内免疫发生异常，产生自身抗体或(和)补体，结合在红细胞膜上，红细胞破坏加速而引起的一组溶血性贫血。确定溶血病因的依据（1）抗人球蛋白试验：直接抗人球蛋白试验阳性-

新生儿溶血病、输血导致溶血、自身免疫性溶血性贫血、SLE、类风湿关节炎、恶性淋巴瘤、甲基多巴及青霉素型等药物性溶血反应。阴性-不能排除免疫性溶血性贫血，遗传性溶血性贫血（自幼发病家族史阳性）确定溶血病因的依据间接抗人球蛋白试验，用于新生儿同种免疫性溶血中母亲和新生儿血清内不完全抗体的检测。2.冷凝集素测定：阳性见于冷凝集素综合征，阵发性冷性血红蛋白尿。第三节血型鉴定与交叉配血基本概念

血型是指各种血液成分以抗原为表现形式的遗传多态性标记，是人体血液的一种遗传性状。由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系，称为血型系统。与人类输血关系最密切的是ABO血型系统，其次是RH血型系统。

ABO血型系统分型ABO血型系统A或B抗原在第5～6周胚胎的红细胞上便能检出，出生时抗原的敏感性仍较低，估计仅为成人的20％～50％，以后逐渐增强，至20岁左右时才达高峰。抗原性终生不变，但到老年敏感性有所下