医院检验科培训课件：《定量检验性能验证要点分析》

定量检验性能验证要点分析主要内容性能验证的背景性能验证的条件性能验证的内容和方法性能验证实例和要点分析背景实验室质量和能力的认可和评价在国内和国外都有很多权威机构实验室质量和能力性能验证背景《医疗机构临床实验室管理办法》：质量、能力、性能验证背景ISO15189：2012《医学实验室质量和能力认可准则》未来实验室的必经之路CLIA实验室主要有三个机构监管医疗保险和医疗补助服务中心（CMS）疾病控制和预防中心（CDC）美国食品和药物管理局（FDA）获得CLIA认证，实验室出具的检测报告和结果数据，将获得美国医疗保险、医疗救助机构及FDA的认可背景美国CLIA认证美国病理学会对临床实验室进行的认可活动它主要参照了CLIA-88

的标准美国的法律法规背景CAP认证大多数国家包括中国都部分依赖CLSI发布的方法和标准指南EP16-A、EP5-A、C28背景美国【临床实验室标准化协会】CLSI（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute）验证：通过提供客观证据证明特定的要求得到满足的认定

（“verification”：broadlyas“confirmationthroughtheprovisionofobjectiveevidence,thatspecifiedrequirementshavebeenfulfilled”.）

性能验证（CLIA）：特指使用某种检测方法的实验室按照所提供的试剂盒或检测系统说明书使用时，能复现生产厂家所宣称的检测性能

（CLIAusestheterm“verification”：specificallytorelatetoconfirmationthatthelaboratoryusingatestcanreplicatethemanufacturer’sperformanceclaimswhenthetestisusedaccordingtothepackageinsert.）性能验证（verification）《医学实验室质量和能力认可准则》（ISO15189：2012）5.5.1检验程序的选择、验证和确认5.5.1.1总则实验室应选择预期用途经过确认的检验程序。每一检验程序的规定要求（性能特征）应与该检验的预期用途相关5.5.1.2检验程序验证(Verification)未经修改而使用的已确认的检验程序在常规使用前，应经过实验室的独立验证临床应用价值预期用途1.疾病的筛查（提示）2.鉴别诊断（确认或验证）3.疗效观察4.预后判断5.用药指导检验程序检验结果性能验证的意义性能验证是为了确保实验室所用检测系统的分析性能或检验项目的方法学(检验程序)能够满足检测和临床要求，从而保证患者标本检测结果准确可靠性能验证的评价方法定量分析临床应用价值结果的准确可靠精密度正确度线性范围/临床可报告范围生物参考区间性能验证的时机新安装的仪器拟开展的项目新开展项目同一项目的试剂变更厂家或检验方法发生变更时试剂升级、仪器更新、校准品溯源性改变等仪器搬迁等严重影响检验程序分析性能性能验证的过程性能验证的过程人机料法环性能验证的过程性能验证过程人人员培训仪器、试剂的常规操作：校准、质控、维护性能验证的数据处理：判定标准、最终报告人员资质仪器操作报告处理：中级以上人员人员分配时间分配：收集标本时间、验证时间测试项目分配、验证类别分配性能验证的过程仪器的状态性能验证过程人机仪器的状态试剂：批号、有无过期、有无超过稳定期质控：批号、有无过期、有无超过稳定期、有无失控及处理校准：批号、有无过期、有无超过校准时间验证过程宜使用同一批号的试剂和校准品性能验证的过程性能验证过程机料试剂正确的位置同一批号有效期稳定期试剂消耗品正确的位置正确的配比和配制质控和校准品同一批号有效期稳定期验证的标本标准物质临床样本外借样本质控品常用小工具和耗材加样枪校准新的枪头新的反应杯干净的滴定管法法规标准文件科室管理体系文件试剂盒说明书方法精密度正确度线性范围/临床可报告范围生物参考区间性能验证的过程法规标准文件CNAS的各种指导文件国标文件、卫生行业标准CLSI文件指南CLAI文件指南科室管理体系文件试剂盒说明书法规方法-精密度精密度在规定条件下，多次重复测定同一量值时各测定值之间彼此相符合的程度包括：重复性、再现性、中间精密度、实验室内精密度方法-精密度精密度---验证要求CLSI颁布的EP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》应同时验证重复性和中间精密度用于精密度验证的样本应具有很好的稳定性和均一性样本浓度至少含两个浓度水平应尽可能与厂家精密度评价时所用样本浓度一致宜确定医学决定水平处的精密度方法-精密度样本每个浓度测定的最低要求是每批测3次，测定5天获得的数据按照《WS/T420-2013》或《WS/T492-2016》或EP15-A2的要求进行分析精密度---方案1《WS/T420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》《WS/T492-2016临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》

CLSIEP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》方法-精密度重复性：每个浓度样本批内重复测定20次，使用浓度对数值计算不同浓度时的测量精密度中间精密度：每个浓度样本连续测定20天，每天测定1次获得的数据按照《WS/T420-2013》或《WS/T492-2016》或EP15-A2的要求进行分析精密度---方案2《WS/T420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》《WS/T492-2016临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》

CLSIEP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》方法-精密度1、2方案不可用或样本量不足时（核酸扩增试剂盒)重复性：每个浓度样本批内重复测定10次中间精密度：每个浓度样本连续测定10天，每天测定1次获得的数据按照《WS/T420-2013》或《WS/T492-2016》或EP15-A2的要求进行分析精密度---方案3《WS/T420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》《WS/T492-2016临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》

CLSIEP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》方法-精密度批内精密度＜1/4TEa或说明书给出允许CV为符合批间精密度＜1/3TEa或说明书给出允许CV为符合精密度---判断标准方法-正确度真实度，大量（无限）测量值的均值与真值（参考量值）的接近程度（一致程度）正确度---定义和法规方法-正确度测定具有溯源性的标准物质物质参加卫生部临床检验中心室间质评样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施较好的、或已获认可或的实验室，或与使用配套分析系统的实验室进行比对正确度---要求方法-正确度正确度---方案1测定具有溯源性的标准物质物质国家标准物质（如GBW）国际标准物质（如WHO、IFCC）CNAS认可的标准物质正确度控制品CNAS认可的正确度验证样本每个浓度水平的标准物质样本至少每天重复测定2次，连续测定5天记录检测结果，计算偏倚比较分析方法-正确度参加卫生部临床检验中心室间质评，用回报结果作为评价指标，测定值在允许范围内，且符合率≥80%则通过正确度验证对3个不同水平的室间质评样本每个测定2次，测定均值与靶值的偏倚小于卫生部临床检验中心室间质评的允许误差表示准确度可以接受正确度---方案2方法-正确度样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施较好的、已获认可实验室，使用配套分析系统的实验室进行比对正确度---方案3CNAS-CL02-A003：2018医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明方法-线性范围/临床可报告范围

线性范围---释义临床可报告范围---释义线性范围（LinearRange)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围临床可报告范围（ClinicallyReportableRange)是指对标本采用稀释、浓缩或者其他预处理来扩展直接分析测量值的范围方法-线性范围/临床可报告范围应用高、低浓度的标本配制至少5-7种不同浓度应在一批内完成各浓度标本检测，每份标本至少测定2次做线性回归图计算线性回归方程式y=ax+b和相关系数r判断标准：每点实测均值与预期值偏差应<1/2TEa；r≥0.975（r2≥0.95）；b在1±0.03范围内，则符合标准

线性范围---方案方法-线性范围/临床可报告范围临床可报告范围---方案

准备3份样本在线性高限1/3内样本采用项目最大稀释倍数或临床需求倍数进行手动稀释每个样本重复三次计算还原浓度与原始浓度相对偏倚判断标准:相对偏倚＜1/2TEa或说明书给出允许CV为符合

方法-生物参考区间生物参考区间在参考人群中进行抽样和根据该项目检验结果的分布特征用统计学方法处理后得出的衡量该项目是否异常的指标常采用参考人群的95%区间方法-生物参考区间生物参考区间---验证要求和方案验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性卫生行业标准、国家标准、试剂盒说明书、权威的指南共识选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，若20份标本的检测结果均在仪器说明书提供的参考区间内或仅有2个标本超出，则验证通过性能验证的过程性能验证过程环温湿度冬季夏季用水仪器用水消毒用水生物安全人员操作试剂、标本的存储和运输AST检测项目的性能验证性能验证实例及要点分析性能验证实例及要点分析验证前的准备人员培训仪器操作验证试验数据处理生物安全人员分配收集标本仪器操作整理数据整理报告收集标本时间高值标本验证时间一天做完连续5天同一时间性能验证实例及要点分析精密度的判定标准：以国家标准为准性能验证实例及要点分析精密度标本浓度的选择可采用新鲜或冻存的样本当待测物不稳定或样本不易得到时，可考虑使用质控品有明确医学决定水平的浓度水平在生物参考区间上限左右选一个浓度，再根据检验项目的特点在测量线性区间内选择另一个浓度线性范围标本浓度的选择线性高值的30%以内，低值的50%以内没有达标的高值标本，选一个月以内的最高浓度先验证，以后再补若不易获得低浓度标本，可通过不含被测物的患者标本稀释获得标本的选择和留取方法-生物参考区间生物参考区间标本关键在于——筛选“健康人群”体检人群一次通过没有通过应该反查纳入人群是否有问题，而不是怀疑生物参考区间本身有问题排除标准：经常喝酒近期患病献血者哺乳期血压不正常肥胖吸毒特殊职业正在服用医生开方的药物