GB 15193.24-2014 食品安全国家标准 食品安全性毒理学评价中病理学检查技术要求

书中的病理检查技术要求(报纸文章)2 0 1 2 0 1 2 0 1 2 0 1 2 0 1中华人民共和国国家卫生和计划生育委员实施部门书狎鸥1 5 1 9 3.2 4-2 0 1食品安全国家标准食品安全毒理学评价中的病理检查技术要求1范围本标准在食品安全毒理学评价中的常规病理学本标准适用于食品安全毒理学评价的日常病理检查。2目的通过对病理检查技术要求的规定，规范检查者的操作，减少检查结果的偏差，使组织病理学检查结果更科学、有效，有利于实验室间比较和科学数据的积累，为食品毒理学安全性评价提供形态评价证据。3术语和定义3.1使用替代观察肉眼或放大镜、标尺和天平等工具，观察和检查替代标本及其病态特性的过程。3.2在解剖被检查样本的动物时，将器官组织的代表性部位和病变部位全部或切除，用作病理检查标本。3.3固定是将样本样本放入固定液中，使组织细胞内物质与活着时的形态结构和位置尽可能接近的过程。3.4在样本固定标本中，采访了根据病理检查的目的和要求提取适当大小组织块的过程。3.5脱水是通过一系列脱水剂将固定修复的组织块浸入替代组织内的水分，使内置介质进入组织的过程。3.6在透明组织块脱水后，与脱水机一起互溶常用溶剂的溶剂中浸泡剂在组织块中的过程。3.7使蜡组织块透明，熔化的熔点，梯度浓度不同的石蜡内浸渍过程。犄角1 5 1 9 3.2 4-2 0 1 4 2 3.8嵌入组织块是用浸渍剂(通常是石蜡)包裹的过程，通过浸渍剂浸泡。3.9切片嵌入后将组织块切成薄片装入切片机的过程。3.1 0染色适合于确定组织或细胞内的正常结构或病变结构，选择标记这些成分的染料。将染料与组织或细胞成分结合，经过一系列提高标本观察性的特殊收购过程。4病理检查的一般要求4.1人员由4.1.1病理人员由病理负责人和病理工程师组成，病理工作人员必须具有职业道德和科学严谨的工作态度，能够利用专业知识完成本职工作。4.1.2病理负责人必须具有医学病理学或兽医病理学背景，以进行准确的检查，熟悉病理学的报告过程，并对组织片段的组织病理学评价负责，包括对组织异常变化的检查和解释。4.1.3病理技术人员具有医学、兽医或生物背景，或有相关检查经验，应经过病理检查训练，掌握病理学基本技术。工作中要严格执行规范的技术操作程序。4.2设施和环境条件要求4.2.1病理实验室一般工作区包括标本保存室、采访室、冷冻保存室(区域)、一般生产预处理(组织脱水、透明、打蜡、嵌入)室(区域)、一般生产(切片、染色、密封)4.2.2实验室应具备紧急电源和个人消毒保护设施、紧急救援设施等的通风和照明设备良好。4.2.3病理检查相关设备的适当检查、维护、处置和其他操作管理程序。4.3技术要求4.3.1病理负责人接受检查组织标本，确认并记录相关信息。4.3.2在病理标本制作和检查过程中，应严格按照相应的标准操作程序(s o p s)操作。4.3.3在病理负责人用显微镜观察并发表病理报告之前，了解与试验相关的各种资料，包括实验设计、受试者的理化性质和生物活性特性、给受试者注射的方法、剂量和持续时间、实验动物的种类、系列、主要、临床表、生化及生理指标等。4.3.4为了获得可靠的病理检查结果，在同一动物检查中评估的所有组织切片必须由同一病理负责人按照一定的标准诊断和分级组织病理学变化。必要时，可由机构内或机构外病理专家审查。4.4文件和记录管理要求病理检查要求及时输入实验室计算机电子数据记录系统，以确保测试过程和结果的完整记录和数据完整性、准确性和可追溯性。5.1病理检查要求5.1病理检查前，了解实验动物的一般临床特点，并相应记录。5.2需要进行病理解剖检查的实验动物的编号、组、性别等个体信息必须有明确、明确的记录。5.3验尸前，要看看动物的毛(小麦、spa、光泽、脱毛或污染)和动物身体表面粘液膜的状态，皮肤和粘膜是否有明显的色素、角化、贫血、黄疸、水肿、结节、出血、淤血、创伤、侵蚀、溃疡等异常变化解剖检查仔细观察组织器官的位置、形状、形态、颜色、纹理，确定测试对象是否诱导了动物组织、器官的形态、大小、颜色、纹理等的病理变化，是否有病理移动，测试对象动物的胸部和腹腔，心包内体液残留及其特性(颜色、透明度等)5.4要按以下顺序进行：气管组织提取、腹腔尸检、胸部尸检、骨盆尸检、颈部尸检、清除体内器官、体内器官分离和肉眼观察、大脑和脊髓尸检、脊椎和骨髓尸检。尸检中看到的所有病理变化都要详细记录，必要时要有图片，影像记录。去除胃后，将胃大弯曲，用生理盐水清洗胃内容物，在纸板上附着伪装膜层，然后放入固定液中，将肠灌注中性福尔马林溶液固定。在肺叶取样时，为了防止肺组织漂浮在固定液表面固定，在肺表面复盖固定液的薄面具，必要时从支气管中注入适当的中性福尔马林溶液。肾脏组织在取样时，沿着肾脏外侧边缘中线，向肾门方向建立水平面，固定。肝脏组织在取样时沿长轴固定为1.5厘米至2.0厘米的纵向平行切口。心脏取样时，沿管道切开，去除血块，然后固定。骨组织在中性福尔马林溶液中固定2 4h后脱钙。需要进行病理检查的样品最好尽量避免外力和仪器造成的人为损伤，使样品的大小合适，用固定液填充浸渍中心。5.5考试中，死亡及死亡动物应及时解剖，快速提取器官组织，然后切下合适的标本固定。需要5.6计量的器官组织在计量前，要尽可能地去除周围脂肪组织和结合组织，用滤纸吸出器官组织表面的血液和体液，特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等小器官，去除后要立即进行计量，防止器官干燥、水量减少。血管器官组织在称重前必须去除血管内的液体，心脏要去除血液，胃肠道要冲洗内容物。一对器官组织要一起计量，根据器官组织的重量选择适当的秤，迅速计量，根据组织目录表检查需要提取的器官组织，然后及时固定。5.7病理抽样标本的固定应根据试验目的及组织标本的特点选择合适的固定液和固定方法，固定应及时充分，尽快取材制作。常规固定液是中性福尔马林溶液，应根据特殊病理检查(特殊染色和组织染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等)的需要使用其他合适的固定液。固定液与取样标本的体积比至少为4: 1，固定间一般为4 8h 7 2h。5.8对于需要检查的机构或组织的位置、方向(切面)保持一致，剪切的组织块大小小，结构完整。如果不需要的器官或部位有异常，则保留附加标本，选择病变中心及正常及病变连接组织。采访记录要完整。进行5.9病理检查的标本应进行染色所需的预处理，组织所需的修复，修复后组织厚度为3mm 5mm，修复后组织应进行脱水、透明、蜡浸和包埋等处理。5.1 0嵌入组织标本应表面平整，切片应包括组织器官的整体结构，石蜡切片厚度一般为3 m 5 m，同时进行多次染色时，应选择连续切片。嵌入时，组织块的最大面(或特别指定部分的组织面)如下，夹在同一蜡块内的多个小组织必须相互靠近，位于同一平面上，内壁、皮肤和粘膜组织必须垂直嵌入(入射)。制作时避免人工损伤。5.1 . 1常规病理检查一般为石蜡切片和苏格宁-李红(h&e)染色，必要时增加组织化学染色(包括特殊染色)、免疫组织化学染色等相关诊断技术，进行病理检查。在5.1 2组织制作过程中，要确保切片编号与蜡块编号相匹配。好的组织切片应包括被检查组织的整个截面，无褶皱，核浆染色，适当的分色，干净透明的外观。制作完成后，病理技术人员将与雕塑进行比较的1 5 1 3.2 4-2 0 1 4的病理检查记录和采访工作记录进行仔细比较，确认正确后，将准备好的雕塑及其记录等交给病理负责人，接管方完成检查后，必须通过转让签名程序。5.1 3病理负责人在看电影的时候要彻底检查切片，按动物编号或组织顺序检查，并依次观察和记录所有切片标本。病理结果描述要客观、细致、全面，有图像，使用标准病理专业术语，对有意义的典型病变要有照片记录。鉴别诊断需要特殊染色以确定特征。5.1 4非肿瘤性病变的性质和范围可以用半定量方法区分形态变化的差异。5.1 5应明确区分肿瘤病理检查、增生异常、肿瘤等增殖和肿瘤类型。实验观察的结果分为：a)良恶性；b)第一次和第二次；c)肿瘤发生率。6为了减少病理检查的质量控制6.1操作所产生的影响，在尸检和制作过程中，应采用对照组和实验组之间的交叉方式。6.2像肉眼看不见的病变一样，组织要适当地进行采访，机关和组织的采访部位要统一。组织切片应包括长期和组织的整体结构，结果切片应接受质量检查。例如，如果切片不合格，则必须保留原始切片，重新制作，然后使用详细提取、制作记录等信息制作。6.3病理报告观察结果应使用专门术语详细说明。6.4实验室应制定适用于每个试点流程的标准操作程序(s o p s)。6.5使用试剂标签必须明确、明确，购买试剂应包括试剂的名称、浓度和/或纯度、保管条件、买方、购买日期、产品批号、开封使用日期等信息，配方应包括配方试剂的浓度、制造者、制造日期、有效期等信息，所有试剂均详细使用6.6为了避免动物组织标本混淆，样品标本、蜡块、切片编号以相同的识别系统等级编号。6.7抽样标本、蜡块、切片应具有单独的临时保存和存档保存空间，测试结束后，应按照病理文件管理的标准操作程序进行存档保存。7病理检查中应注意的问题7.1替代病理尸检的说明。大体上，对解剖发现的病变进行详细记录，必要时，应用照片或图表显示病变所在的位置、颜色、大小、特性等特征。必须使用描述性语言，不要使用诊断术语。7.2组织病理学变化的说明。组织病理学变化的说明应包括病所的位置、病所的分布范围、病肺的特点、病肺的程度等。7.3使用诊断术语。术语要统一、明确、准确，必须为专业同事认可，不能创造术语。7.4病理检查应充分考虑a)病变的发生、特征、程度、分布特征。b)与频率的规律性和对照组相比，每个剂量组的特异性；c)病变与受试者的容量效应关系；d)病变特点与治疗因素的构效关系；e)疾病进展和处理因素相关部门；f)显微镜检查结果与尸检病变、器官组织重量、动物临床症状、血液生化检查、尿液检查和特别检查相关。g)人为因素和非测试因素引起的病变；h)历史背景和此次实验背景(历史对照和本对照)及相关知识等作为鉴别诊断的基础。狎鸥树1 5 1 9 3.2 4-2 0 1 4 5 8病理学检查报告的基本内容8.1标题以相关信息命名，如“被杀动物被杀动物名称毒理学测试项目”。8.2被试物和检验信息应包括毒理检验项目、被试物名称、被试物编号、检验单位或检验人员、标本固定时间、检验时间、移动来源、动物线、动物水平、病理学编号、染色方法、报告时间等信息。8.3目的简述此次实验观察指标的组织病理学变化及意义。8.4材料和方法应包括实验动物品种、数量、分节、长期组织名称、数量、试剂、仪器、制作和染色法。应用病理学结论语言摘要说明8.5结果解剖检查及组织病理学检查结果。8.5.1尸检结果：观察到的外观、身体表面和器官组织使用病理结论语言总结了受试者引起的有意义的病变。8.5.2组织病理学检查结果：使用病理结论语言说明，总结观察到的主体引起的病变，清单显示病变数量。8.5.3总结考试中死亡或死亡动物的尸检及组织病理学检查结果，并分析死亡原因。8.6讨论必要时进行讨论。8.7结论所有检查项目必须对是否与主体相关提出意见。8.8签名包括病理检查者、检查者签名，并注明日期。8.9参考文献必要时列出参考文献。9同事评价9.1病理学检查一般由一名病理官填写检查和报告，特殊情况下，多名病理官参与组织病理学观察，如果结果不一致，应组织该部队的同事评价。9.2同事评价意见仅供参考，最终结论由病理负责人决定。9.3如有必要，同事评价意见将作为附件附在报告中。