分子杂交技术

分子杂交技术Tag内容描述：<p>1、,第八章分子杂交技术,.,第一节分子杂交的原理核酸分子杂交（nucleicacidhybridization）指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基配对原则形成双链的过程。分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂。</p><p>2、核酸分子杂交技术核酸分子杂交技术 李如波李如波 中国医科大学法医学院中国医科大学法医学院 核酸分子杂杂交技术术(Nucleic acid molecular hybridi- zation)是检测检测 核酸分子间间序列同源性的一种技术术。 不同来源的核酸单链单链 只要彼此间间有一定的互补补序列 ，即可按碱基配对规则对规则 以氢键氢键 相结结合。通常是先对对一种 核酸进进行标记标记 （如放射性同位素35S，32P或生物素等）作 为为探针针，去探测测另一种核酸序列。核酸分子杂杂交可以在 DNA与DNA，RNA与RNA，或DNA与RNA之间进间进 行。 由于这这种技术术具有高度。</p><p>3、第八章分子杂交技术,第一节分子杂交的原理核酸分子杂交（nucleicacidhybridization）指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基配对原则形成双链的过程。分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。</p><p>4、分子杂交技术 一、分子杂交种类 二、分子杂交的一般程序 三、杂交样品膜的制备 四、标记探针的制备 五、分子杂交与结果检测 六、核酸分子杂交实验因素的优化 分子杂交技术 o 分子生物学中用于检测生物样本中是否含有特定的生物 分子的一门技术。 样 品 制 备 电 泳 杂 交 转 膜 结果显示 探 针 制 备 分 子 杂 交 流 程 图 核酸分子杂交 一. 分子杂交种类 1. 按其分子种类划分 1） DNA杂交探针为DNA或RNA 2） RNA杂交探针为DNA或cDNA 3） 蛋白质免疫分析探针为抗体 2. 按样品制备过程划分 1） 原位杂交(in situ hybridization) i. 原位菌。</p><p>5、第十章 分子杂交技术,分子杂交（molecular hybridization）是用一个DNA单链或RNA单链与另一被测DNA单链形成双链，以测定某特异顺序是否存在。,Basic Principle,Denature,Hybridize,Southern, Fish,PCR,Protein: Antigen-antibody interaction,DNA: denaturation and hybridization of the helix structure,第十章 分子杂交技术,第一节 分子杂交 第二节 核酸杂交简史与原理 第三节 核酸探针标记的方法 第四节 核酸分子杂交因素 第五节 几种常见的杂交 第六节 其他类型杂交介绍 第七节 原位杂交,第一节 分子杂交,1.1 原位分子杂交（in situ 。</p><p>6、分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization & Blotting Technology,核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) 在DNA复性过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂交双链(heteroduplex) 。,一、分子杂交与印迹技术的原理,复性,RNA,DNA,（一）印渍技术 Blotting,首先由Edwen Southern在1975年提出。 Blotting即“印渍”，指将存在于凝胶中的生物大分子转移（印渍）到固定化介质上并加以检测分析的技术，目前广泛应用于DNA。</p><p>7、1,第二节 分子杂交及相关技术,分子杂交,标记的探针DNA变性后与变性后的靶DNA/RNA通过碱基互补配对结合，形成杂种分子的过程 。 分子杂交包括：DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交及蛋白杂交等。 分子杂交的目的就是运用特异的探针鉴定复杂的靶DNA中同源的DNA片段。,2,双链probe或DNA解链，主要取决于： 1链的长度：链越长，需要的 能量多才能解链； 2碱基成分：GC含量高，较难变性； 3化学环境：单价阳离子稳定双链，甲酰胺，尿素破坏双链,3,一、杂交探针的获得,是指一段目的基因或DNA/RNA片段特异杂交的核苷酸序列。 Probe可以是整个基因，或是基。</p>