碱性磷酸酶的

碱性磷酸酶的Tag内容描述：<p>1、碱性磷酸酶的分离纯化与酶学性质研究碱性磷酸酶的分离纯化与酶学性质研究 董静董静 201131301031201131301031 摘摘 要：要：以猪肝为原料，采用低浓度醋酸钠(低渗破膜作用)制备肝匀浆，醋酸镁则有保护和稳定 AKP 的作 用，匀浆中加入正丁醇可使部分杂蛋白变性，释出膜中酶，过滤后，以去除杂蛋白。含有 AKP 的滤液用 冷丙酮和冷乙酸进行重复分离纯化。根据 AKP 在 33的丙酮或 30的乙醇中溶解，而在 50的丙酮或 60的乙酸中不溶解的性质，用冷丙酮和冷乙醇重复分离提取，可从含有 AKP 的滤液中获得较为纯净的 碱性磷酸酶。酶学性质研究表明。</p><p>2、碱性磷酸酶的分离纯化与性质研究 生物技术 1101 班 其曼古丽麦麦提 201131301028 摘要摘要：经过匀浆，正丁醇处理，凝胶过滤等步骤，从猪肝中部分纯化 了碱性磷酸酶。以磷酸苯二钠为底物，测得该酶的最适 pH 为 10， 最适温度为 37， Km = 1.6565。KH2PO4 对酶的活性有不同程度的抑制作用。 关键词关键词：猪肝，碱性磷酸酶，分离纯化，性质 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称 AKP) 是一种底物专一性较低 的磷酸单酯酶，广泛存在于人体、动物、植物与微生物中，在生物体内直接参 与了磷酸基团的转移和代谢过程【1】。它在脊椎动物的骨。</p><p>3、碱性磷酸酶的分离纯化与酶学性质研究董静 201131301031摘 要：以猪肝为原料，采用低浓度醋酸钠(低渗破膜作用)制备肝匀浆，醋酸镁则有保护和稳定AKP 的作用，匀浆中加入正丁醇可使部分杂蛋白变性，释出膜中酶，过滤后，以去除杂蛋白。含有AKP 的滤液用冷丙酮和冷乙酸进行重复分离纯化。根据AKP 在33的丙酮或30的乙醇中溶解，而在50的丙酮或60的乙酸中不溶解的性质，用冷丙酮和冷乙醇重复分离提取，可从含有AKP 的滤液中获得较为纯净的碱性磷酸酶。酶学性质研究表明该酶催化对磷酸苯二钠水解反应的最适PH值为10.0，最适温度为37,米氏常数值K。</p><p>4、碱性磷酸酶米氏常数的测定【实验目的】通过碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）米氏常数的测定，了解其测定方法和意义。学会运用标准曲线测定酶的活性及观察抑制剂对酶促反应动力学的影响，加深对酶促反应动力学的理解。【实验原理】本实验以磷酸苯二钠为底物，由碱性磷酸酶催化水解，生成游离酚和磷酸盐。酚在碱性条件下与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化，生成红色的醌衍生物，颜色深浅和酚的含量成正比。根据吸光值的大小可以计算出酶的活性，也可以从标准曲线上查知酚的含量，进而算出酶活性的大小。【实验步骤】1. 底物浓度。</p><p>5、枯草芽孢杆菌碱性磷酸酶的盐析与分析,2008.12.05,实验目的,从枯草芽孢杆菌中分离提取碱性磷酸酶 进行酶活分析,实验原理,碱性磷酸单酯酶（EC:3.1.3.1）又称碱性磷酸酯酶，碱性磷酸酶，官方英文名为Alkaline phosphatase,碱性磷酸单酯酶广泛分布于原核及真核生物各组织中，一般存在于外周胞质中。 其用途一般有：1）在用32P标记5末端前，去除DNA或RNA的5磷酸。2）去除DNA片段5磷酸以防止质粒DNA连接和自身环化。,盐析 根据不同的蛋白质在同一浓度盐溶液中的溶解度不同而利用不同浓度的盐溶液使每个蛋白质成分分别析出的方法称为蛋白质的盐析。</p><p>6、实验 碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定,目的要求： 1.学习蛋白质分离纯化的一般原理和步骤 2.掌握碱性磷酸酶制备的操作技术及比活测定的方法,1.原理,碱性磷酸酶 (Alkaline phosphatase EC 3.1.3.1 简称为ALPase)广泛存在于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应，产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应，磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受体上。,在蛋白质或酶的分离提取过程中由于酶蛋白容易变性而失活，为了获得较好的分离提取效果，在工作中特别注意以下几点： 取用新鲜的。</p><p>7、佝偻病患儿骨碱性磷酸酶的检测及临床分析摘要 目的：探讨骨碱性磷酸酶在佝偻病患儿诊断中的价值。方法： 采用免疫学方法对来我院就诊的1 941例临床初筛发现夜惊、多汗等症状的0岁3岁患儿的标本进行检测。分别以BALP 250 UL和BALP300为诊断界限值，与简易诊断进行比较。结果：符合率由25.38%上升至84.07% ，漏诊率和误诊率则分别降至16.28%和6.50%。结论：提高了诊断质量，大大减少了漏诊和误诊的发生，有利于佝偻病的早期发现、早期防治，可作为诊断和治疗小儿佝偻病的灵敏指标。 关键词 佝偻病；骨碱性磷酸酶；临床分析佝偻病是我国重点。</p><p>8、实验二 硷性磷酸酶的动力学鉴定Km测定一、原理当温度、PH及酶浓度恒定的条件下，酶促反应的初速度随作用物浓度S增大而增大，但增大到一定限度时，作用物浓度再增加，则反应速度不再增加。此时反应速度为最大速度（Vmax）。Michaelis Menten对酶促反应速度与作用物浓度之间的这种关系进行了大量实验研究，并于1913年提出了数学方程式，即著名的米一曼方程式：式中Km即为米氏常数，Vmax为最大反应速度，当V=Vmax/2时，则Km=S。Km是酶的特征常数，测定Km是研究酶的一种方法。由于用Michaeis-Menten方程中的V与S作图求Km，不方便，Lineweaver-。</p><p>9、血清碱性磷酸酶活力的测定,磷酸苯二钠法,1,实验目的,1.熟悉酶活力测定方法的一般原理 2.掌握血清碱性磷酸酶(ALP)的测定原理与临床意义。 3.酶活力测定的目的是了解组织提取液、体液中酶的存在于含量。,2,实验原理,一.基本概念 1.酶活力测定 酶的催化功能可以用在一定条件下酶所催化的某一特定化学反应的速度来表示。反应速度越快，酶活力越高;反之，活力越低。测定酶活力实际上是测定酶促反应速率。 2.酶的活力单位 a.国际 在特定的条件下，1min内将1mol底物转化为产物所需的酶量为1个国际单位(IU)。1IU=16.6710-9Katal b.临床上采用金氏。</p><p>10、碱性磷酸酶米氏常数的测定,浙江中医药大学生命科学学院生物化学教研室,目的与要求通过碱性磷酸酶米氏常数的测定，了解其测定方法及意义。学会运用标准曲线测定酶的活性，加深对酶促反应动力学的理解。,原理,酶催化底物发生反应时，受多种因素影响，环境的温度、pH和酶的浓度等等，在环境的温度、pH和酶的浓度一定时，酶促反应速度与底物浓度之间的关系表现在反应开始时。酶促反应的速度(V)随底物浓度(S)的增加而迅速。</p>