基因工程载体

基因工程载体Tag内容描述：<p>1、Types of vectors,Plasmid-based,Virus-based,Chromosome-based,Phage-based,Eukaryotic virus- based (to be reviewed in gene therapy section),YAC,BAC,PAC,Hybrid (phagemid, cosmid etc),The four major types of vectors are plasmids, bacteriophages and other viruses, cosmids(粘粒), and artificial chromosomes.,原核生物的克隆载体 真核生物的克隆载体 酵母及其他真菌的克隆载体 高等植物的克隆载体 昆虫的克隆载体 哺乳动物的克隆载体,7 真核生物的克隆载体,酵母和其他真菌的载体 高等植物的克隆载体 动物的克隆载体,7.1 酵。</p><p>2、第五讲 基因工程的载体,Vectors for Gene Engineering,In molecular biology, a vector is a DNA molecule used as a vehicle to transfer foreign genetic material into another cell.,载体（vector）是可以携带外源核酸进入宿主细胞，并能进行独立和稳定自我复制或表达的核酸分子。,Common to all engineered vectors are an origin of replication, a multicloning site, and a selectable marker.,The vector itself is generally a DNA sequence that consists of an insert (transgene) and a larger sequence that serves as the 。</p><p>3、DNA,DNA分子的大小为49 Kb，其中的绝大多数基因都得到了确定和定位。基因图谱的一个特征是功能上相关的一系列基因在基因组中聚集在一起。这种簇集现象，在以噬菌体为基础的克隆载体构建中，也起着非常重要的作用。,可以插入超过10 Kb的外源DNA。该载体携带的lacZ基因上有一个多克隆位点接头，外源基因插入到多接头上6个酶切位点中的任何一个，都会使该基因失活，从而使得噬菌斑是无色清澈的而不是蓝色的。,(2)ZAPII,Spi 重组子的筛选,3.5 基于M13噬菌体的载体,3.5.1 M13纤维状噬菌体,M13是纤维状噬菌体的一个代表，在结构上与噬菌体有着很。</p><p>4、转基因抗乙肝番茄(中国) 虽不能治愈乙肝，但一年吃几个，完全能代替注射乙肝疫苗。,20世纪70年代兴起的定向改造生物新技术 基因工程,普通棉花 抗虫棉,基因工程培育抗虫棉的简要过程：,上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？,关键步骤一：,关键步骤二：,关键步骤三：,抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来,形成重组DNA分子,重组DNA导入受体(棉花)细胞,（二）基因工程的工具酶和载体,关键步骤一的工具：,关键步骤二的工具：,关键步骤三的工具：,“分子手术刀”限制性内切酶,“分子针线”DNA连接酶,“分子运输车”载体,解决培育抗虫棉的关键步。</p><p>5、第四章 载体,vector,主要内容,载体的概念 载体的分类 质粒载体 噬菌体载体 单链丝状噬菌体载体,一载体的概念： 1.要把一个有用的基因（目的基因研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具），将外源DNA或者基因携带进入宿主细胞的工具。 2.凡来源于质粒或噬菌体的DNA分子，可以插入或克隆DNA片段统称为vector。 基因工程所用的vector实际上是DNA分子，是用来携带目的基因片段进入受体细胞的DNA。,载体应具备的条件,（1）在宿主细胞内能够进行自我复制，具备复制原点。 （2）有合适的限制性内切酶。</p><p>6、1,4 基因工程载体 载体：这种能与目的基因结合，且有完整的复制和转录功能的DNA大分子称之为载体（vector）。 作为一个理想的载体，应具备以下条件：,（1）能够在宿主细胞中存在并繁殖，有功能良好的复制子和启动子，使插入基因复制和表达； （2）具有多个限制性内切酶的切点，且切点是单一的，这样可将多个外源DNA片段插入其中； （3）具有容易检测的筛选标记； （4）载体DNA的分子量适当，可容纳较大的外源DNA片段，又可在受体细胞内扩增较多的拷贝； （5）在细胞内稳定性高，这样可以使重组体可以稳定传代而不易丢失。,2,载体的种类：,。</p><p>7、第三章 基因工程载体,生物科学与技术学院,基因工程载体的概念,把一个有用的基因（目的基因研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫载体。作为基因工程载体，质粒至少应该具备复制的起始区、选择标记基因区、多克隆位点等部分。,复制的起始区：能在宿主细胞内进行独立和稳定的自我复制。 选择标记基因区：可以筛选重组体。 多克隆位点：方便外源基因的插入。,第一节 质粒载体,质粒（plasmid）：是独立于染色体以外的能自主复制的双链闭合环状DNA分。</p><p>8、3基因工程载体,3.1质粒载体3.2噬菌体3.3单链DNA噬菌体3.4黏粒载体3.5其他载体3.6表达载体,载体：基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”，它的本质是DNA复制子。作为载体必备的3个基本条件：I能在宿主细胞内独立和稳定的自我复制II具有合适的限制性酶切位点III具有合适的选择标记基因,3.1质粒载体,质粒：染色体外能自我复制的小型DNA分子。广泛存在于细菌细胞中，也存在于。</p><p>9、基因工程常用载体 END THANDSFORYOURCOMING 在大肠杆菌的各种菌株中找到了许多种不同类型的质粒 其中已经作了比较洋尽研究的主要有F成粒 R质粒和C l质位 由于这些成粒的存在 寄主细胞便获得了各自不同的性状特征 根据这些特征来鉴别这三种不同类型的质粒 F质粒又叫F因子或性质粒 Sexplasmid 它们能够使寄主染色淬上的基因和F质粒一道转移到原先不存在该质粒的受体细胞中去 R。</p><p>10、生命科学学院,第三章 基因工程载体,第一节 克隆载体 第二节 表达载体 第三节 其它特殊用途载体,生命科学学院,本章重点掌握的内容,掌握载体、克隆载体、表达载体、穿梭载体、质粒、-互补、插入失活、人工染色体载体的概念。 克隆载体DNA分子具备的条件。 标记基因的分类及其作用。 pUC18/19质粒载体的组成、优点及质粒克隆载体用途。 -DNA载体的构建、类型及其优点。 植物表达载体的组。</p><p>11、第三章 基因工程载体,vectors,在基因工程操作中，通过不同途径能将承载的外源DNA片段带入受体细胞，并在其中得以维持的DNA分子叫载体。,1. 载体 （Vectors）,（1）在宿主细胞内能独立复制。 （2）有选择性标记。,（3）有一段多克隆位点。,2. 基因工程对载体 的要求,外源DNA插入其中不影响载体的复制。,（4）分子量小，拷贝数多。 （5）容易从宿主细胞中分离纯化。 (6)。</p><p>12、1,第五章. 基因工程载体,2,载体类型基因工程所用的载体都经过人工重新构建,细菌质粒载体 噬菌体衍生载体 Cosmid载体（粘粒） 噬菌体M13衍生载体 Phagemid载体 酵母质粒载体 真核病毒载体,3,克隆载体与表达载体 克隆载体：携带外源DNA进入受体细胞并 使外源DNA大量扩增。 表达载体：表达外源基因编码的蛋白质，载体克隆位点的上游应含有启动子，下游含有转录终止序列。,4,第一 节。</p><p>13、第三章 基因工程载体,1 概述 2 克隆载体 3 大肠杆菌表达载体,第一节 概述,载体（vector）是指将外源DNA或基因携带进入宿主细胞进行扩增或表达的工具。 按功能:克隆载体和表达载体，表达载体又分胞内表达和分泌表达载体。 克隆载体（cloning vector）：主要是对目的基因克隆，建立DNA文库和cDNA文库，其上有复制子即可； 表达载体（expression vector）：能使目的。</p>