聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质Tag内容描述：<p>1、聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白质 【目的】 1 掌握圆盘电泳分离血清蛋白的操作技术。 2 熟悉 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理。 【原理】 带电粒子在电场中向着与其自身电荷方向相反的电极移动，称为电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ PAGE ）就是以聚丙烯酰胺凝胶作为电泳介质的电泳。在电泳时，蛋白质在介质中的移动速率与其分子的大小，形状和所带的电荷量有关。 聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，是由丙烯酰胺（ Acr ）单体和少量交联剂 N,N- 亚甲基双丙烯酰胺（ Bis ）在催化剂 过硫酸铵（ Ap ） 和加速剂 四甲基乙二胺（ TEMED ） 的作用。</p><p>2、实验三 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清脂蛋白课程名称：生物化学与分子生物学实验课 年级：2005 专业、层次： 授课教师：符伟玉职称：讲师 学时：3学时基本教材：自编生物化学与分子生物学实验指导教学目的与要求：1、掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理，了解其操作方法。2、了解血清脂蛋白各组分的分离情况。大体内容与时间安排：1、聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 5min2、聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作步骤及示范 10min3、聚丙烯酰胺凝胶电泳的注意事项 5min4、学生做实验 100min教学方法：讲授式+启发式教学重点、难点：重点。</p><p>3、实验九：聚丙烯酰胺凝胶电泳法 分离血清蛋白质,教 师：王丽华,实验目的,1、熟悉电泳的基本原理 2、掌握PAGE的基本原理与操作技术,具体安排,上午:制胶、原理讲解 中午：电泳（午餐） 下午：染色，脱色、观察结果,电泳的基本原理,电泳： 是指带电粒子在电场中向着与其所带相反电荷的电极方向移动的现象。 应用: 蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。,带电粒子的运动速度-迁移率,即带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。, = Q X /6r,Q 粒子所带电荷量 X 电场强度 r 粒子半径 介质的粘度,影响电泳速度的因素,1、内在因素: 样品自身性质 2。</p><p>4、芅莂袈肂膁莂羀袄蒀莁蚀肀莅莀螂袃芁葿袄肈膇蒈薄袁肃蒇蚆肇蒂蒆袈罿莈蒆羁膅芄蒅蚀羈膀蒄螃膃肆蒃袅羆莅薂薅膁芁薁蚇羄膇薀蝿膀膃薀羂肃蒁蕿蚁袅莇薈螄肁芃薇袆袄腿薆薆聿肅蚅蚈袂莄蚄螀肇芀蚄羂袀芆蚃蚂膆膂蚂螄罿蒀蚁袇膄莆蚀罿羇节虿虿膂膈莆螁羅肄莅袃膁莃莄薃羃荿莃螅艿芅莂袈肂膁莂羀袄蒀莁蚀肀莅莀螂袃芁葿袄肈膇蒈薄袁肃蒇蚆肇蒂蒆袈罿莈蒆羁膅芄蒅蚀羈膀蒄螃膃肆蒃袅羆莅薂薅膁芁薁蚇羄膇薀蝿膀膃薀羂肃蒁蕿蚁袅莇薈螄肁芃薇袆袄腿薆薆聿肅蚅蚈袂莄蚄螀肇芀蚄羂袀芆蚃蚂膆膂蚂螄罿蒀蚁袇膄莆蚀罿羇节虿虿膂膈莆螁羅肄莅袃膁莃莄。</p><p>5、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白,电泳是指带电粒子在电场的作用下，发生定向泳动的现象。 电泳技术指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。,电泳基本原理：,COO- COO- COOH + H+ + H+ Pr Pr Pr + OH- + OH- NH2 NH3+ NH3+ PHPI PH=PI PHPI,蛋白质N端游离氨基，C端游离羧基以及侧链上一些基团在一定pH条件带电荷， 因此可以用电泳技术分离和鉴定。,电场力 F=XQ （X：电场强度， Q：电荷量）,阻力 F=6 （：半径，：介质粘度）,当电泳颗粒匀速运动:,F= F,QX=6,/X=Q/6,带电粒子的迁移率,/X 用U表示，称迁移率（mobility）,即单位电场强度。</p><p>6、实验三 聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离血清蛋白质,掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理 学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术 了解盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用,实验目的,聚丙烯酰胺凝胶电泳采用不连续系统（即缓冲液成分、pH及凝胶孔径不连续）聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过浓缩效应、分子筛效应、电荷效应，将血清中各蛋白质成份依其分子大小、电荷多少不同而进行高效分离。,实验原理,由单体聚丙烯酰胺(Acr)和甲叉双丙烯酰胺(Bis)交联而成的三维网状结构凝胶。 Bis：交联剂 过硫酸铵(AP) ：引发剂，提供自由基， 引发聚合反应 四甲基乙二胺(TE。</p><p>7、实验六 聚丙烯酰胺凝胶柱状电泳分离血清蛋白质,指导教师 刘建昌、池雪林,一、目的,1、掌握聚丙烯酰胺凝胶柱状电泳的原理、操作方法。 2、学会用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质。,二、原理,“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率，这种电泳的主要特点是：（1）使用两种不同浓度的凝胶系统；（2）配制 两种凝胶的缓冲溶液成分及PH值不同；（3）配胶缓冲液与电泳槽中电泳缓冲液的成分、PH值也不相同。在实验中，电泳凝胶分为两层：上层胶为低浓度的大孔胶，称为浓缩胶，成胶的缓冲液是Tris-HCL，PH6.7；下层胶则是高浓度的。</p><p>8、盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质一 实验目的1 学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理 2 掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术 3 比较醋酸纤维素薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的效果 1 二 实验。</p><p>9、实验三聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质,掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术了解盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用,实验目的,聚丙烯酰胺凝胶电泳采用不连续系统（即缓冲液成分、pH及凝胶孔径不连续）聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过浓缩效应、分子筛效应、电荷效应，将血清中各蛋白质成份依其分子大小、电荷多少不同而进行高效分离。,实验原理,由单体聚丙烯酰胺(Acr)和甲叉双丙烯酰胺。</p><p>10、实验七 聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离血清蛋白质,掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理 学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术 了解盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用,实验目的,聚丙烯酰胺凝胶电泳采用不连续系统（即缓冲液成分、pH及凝胶孔径不连续）聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过浓缩效应、分子筛效应、电荷效应，将血清中各蛋白质成份依其分子大小、电荷多少不同而进行高效分离。,实验原理,由单体聚丙烯酰胺(Acr)和甲叉双丙。</p><p>11、实验三：用聚丙烯酰胺凝胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离血清蛋白，掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理，学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术，了解盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用。实验目的：聚丙烯酰胺凝胶电泳采用不连续体系(即不连续的缓冲液组成、ph值和凝胶孔径)，通过浓度效应、分子筛效应和电荷效应，可以根据血清中各蛋白质组分的分子大小和电荷进行有效分离。实验原理，由交联单体聚丙烯酰胺(Acr)和亚甲基。</p>