支原体和原生质体
1、第七章原生质体的分离和培养。
支原体和原生质体Tag内容描述:<p>1、文献汇报,2011.3.3,www.themegallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,Company Logo,微生物学实验教程 周德庆(酵母),1、接种于液体培养基上培养。 2、取培养液10ml,4000r/min离心5min, 弃上清液,用Tris-HCl(pH 7.4)、0.5mol/LEDTA、高渗缓冲液各洗涤一次。 3、用含10mmol/L巯基乙醇的高渗缓冲液稀释裂解酶液。 4、加酶液,100r/min摇床50-100min酶解。脱壁效果达70%左右即停止酶解。 5、100r/min离心三分钟,去沉淀,取上清。再2000r/min离心10min收集沉淀原生质体。 6、高渗缓冲液洗涤2次,2000r/min离心10min收集原生质体,。</p><p>2、第七章 原生质体的分离和培养,原生质体:是指植物细胞中除去细胞的壁的裸露部分.,特点:,1.有全套的遗传信息-可完成全能性:,2.同一时间获得遗传上的同质体,3.实现远缘杂交;,4.摄取外源DNA细胞器等-遗传转化的理想实体.,一,原生质体的分离,除去胞间层(粘着)-单细胞-除去细胞壁,酶解法:漆斑霉产生的纤维素酶(粗制剂)-分离番茄根尖 细胞原生质体,缺点:可能受到酶的影响,首先:产量高,活性强,能分裂,产生愈伤组织(胚状体),最终.形成完整植株的原生质,影响因素,取材,酶的种类,酶的渗透压,原生质膜的稳定剂,酶解的时间、温度、纯化方法等,分离:,1.。</p><p>3、第五章酶 细胞 原生质体固定化 游离酶在应用中的不足 稳定性差 高温 强酸 强碱 重金属离子 难于回收和重复利用 一次性使用酶 产物的分离纯化困难 固定化酶 细胞 的由来和发展 1916年 Nelson Griffin 酶不溶于水而具有活性 1948年 Sumner尿素酶制成非溶性酶1953年 Grubhofer Schleith第一次实现了酶的固定化1960年 千畑一郎开始了氨基酰化酶固定化研究。</p><p>4、第七章工业微生物原生质体育种和原生质体融合育种,第一节原生质体育种,一、原生质体再生育种出发菌株的选择菌种活化和与培养原生质体制备原生质体再生高产菌株分离复筛遗传性状鉴定菌种特性和发酵特性研究,二、原生质体诱变育种菌种活化和与培养原生质体制备原生质体悬浮液稀释至一定浓度,取一定放入无菌平皿中紫外灯下诱变处理置暗处后处理再生培养高产菌株分离复筛遗传性状鉴定菌种特性和发。</p><p>5、第卷第期 斗 年月 遣传学报 植物原生质体的游离和融合 中国科学院遗传研究所五室二组 通过原生质体融合进行体细胞杂交已成为研究植物遗传和育种的一个潜在新途径 在本 报道中 我们描述了用酶法将小麦 大麦 玉米 红花。</p><p>6、,1,第七章工业微生物原生质体育种和原生质体融合育种,.,2,第一节原生质体育种,一、原生质体再生育种出发菌株的选择菌种活化和与培养原生质体制备原生质体再生高产菌株分离复筛遗传性状鉴定菌种特性和发酵特性研究,.,3,二、原生质体诱变育种菌种活化和与培养原生质体制备原生质体悬浮液稀释至一定浓度,取一定放入无菌平皿中紫外灯下诱变处理置暗处后处理再生培养高产菌株分离复筛遗。</p><p>7、注销帐号 请按以下方式操作 1 自己在页面右上方设置 帐户设置 帐号管理 删除帐号 选择删除帐号后 系统会向您的登录邮箱中发送一个注销链接 请您登录邮箱按邮件提示操作即可 如果没有到注册邮箱点击确认链接是不会注。</p><p>8、第七章酶、细胞和原生质体的固定化,酶应用过程中的一些不足,酶的稳定性较差催化效率不够高酶的一次性使用产物的分离纯化较困难,固定化技术,7.1什么是固定化酶?,水溶性酶,水不溶性载体,水不溶性酶(固定化酶),固定化技术,采用各种方法,将酶固定在水不溶性载体上,制备成固定化酶的过程称为酶的固定化。固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。,酶的固定化技术和固定化酶,固定化酶:经。</p><p>9、植物原生质体的培养 一 实验目的 通过实验掌握原生质体的获得与培养技术 二 实验原理 植物原生质体就是除去了细胞壁的一个为质膜所包围的的裸露细胞 用酶降解法脱 去细胞壁的具有活力的原生质体 其在合适的离体培养。</p><p>10、第七章酶 细胞和原生质体的固定化 酶应用过程中的一些不足 酶的稳定性较差催化效率不够高酶的一次性使用产物的分离纯化较困难 固定化技术 7 1什么是固定化酶 水溶性酶 水不溶性载体 水不溶性酶 固定化酶 固定化技术。</p><p>11、7 云南檀物研究 1 9 9 3 1 5 1 6 7 7 O Ac t a Bo t a n i c a Yi mn a n i c a 云南野生和栽培 香菇 原 生质体 的 电融合 摘薹从云南野生和栽培香菇的单校菌丝分离了原生质体 使用 了 5 O 0 k F l z 4 0 0 p v e m的正 弦波电场及 5 0 s 5 0 0 0 p v c n 1 的方形脉冲使其融合 融合的原生质体。</p><p>12、,原生质体培养和体细胞杂交,.,三个问题,1 . 什么是植物的原生质体?2. 为什么要培养植物的原生质体?3. 怎样进行植物的原生质体培养?4. 什么是体细胞杂交?5. 为什么要进行体细胞杂交?6. 怎样进行体细胞杂交?,.,什么是植物原生质体?,植物原生质体(protoplast)是去掉细胞壁的由质膜包裹、具有生活力的细胞是植物细胞工程和许多理论研究的理想材料仍保持植物细胞的全能性仍能进行植物细胞的各种生命活动是植物遗传转化的理想受体膜较薄,易从外界摄入DNA、染色体、细胞器、细胞核、甚至 病毒颗粒等,.,原生质体,.,第一节 原生质体的分。</p><p>13、植 物 学 报1 9 9 1 3 3 Ac t a 舶 aA c d Si nk a 大 白菜和黄瓜原生质体电击 基因转移的研究 徐华强 蔡国乎 吴逸 赵南明 清华大学生物科学与技术系 北京 1 0 0 0 0 4 汤辉 仙 贾 士荣 中国 农业科 学院生 物技术。</p>