肝炎分析PPT演示课件

肝炎病毒（Hepatitis virus）,.,1,肝炎病毒（hepatitis viruses，HV）是指以侵害肝脏为主引起病毒性肝炎的一组病原体。目前已知的有甲、乙、丙、丁、戊、已、庚及TTV型肝炎，中国不仅是一个人口大国，而且也是病毒性肝炎的高发区。在我国以甲、乙、丙、戊4个型别的流行情况严重。 仅乙肝病毒携带者已达1.3亿之多。,概述,.,2,甲HAV小RNA病毒科肝病毒属：消化道传播乙HBV 嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属,血液传播丙HCV 黄病毒科丙型肝炎病毒属，血液传播丁HDV 缺陷病毒，复制需要HBV的辅助，血液传播戊HEV 杯状病毒科，消化道传播己HFV 病毒分离与基因克隆未成功，血液传播庚HGV 主要经血液传播 TTV Transfusion transmitted virus 另外，巨细胞病毒、EB病毒、黄热病毒等也可引起肝炎，但不列入肝炎病毒范畴。,概述,.,3,消化道传播：HAV、 HEV血液传播：HBV 、HCV 、HDV、 HFV、 HGV、TTV,肝炎病毒传播途径总结,.,4,第一节 甲型肝炎病毒（hepatitis A virus， HAV）,.,5,在全球都有HAV感染的报道，其中以非洲、南美洲及亚洲为高发区。易感者大多是在进食了被病毒污染的食物、海产品（如泥蚶、毛蚶、醉蟹等）或污染的水源后而导致感染。 195O 年瑞典及1978年我国均因食用泥蚶引起甲型肝炎流行，1979年上海食用醉蟹引起过暴发，1988年上海因食用甲肝病毒污染的毛蚶引起大暴发，患者多达30万。,概述,.,6,1、形态与结构属小RNA病毒科，球形，27-32nm，无包膜，呈20面体立体对称;单正链RNA，7470-7478nt;一个ORF，编码一个大分子蛋白质，经水解后产生病毒的结构蛋白和非结构蛋白;结构蛋白含VP1、 VP2 、VP3及 VP4;病毒的衣壳蛋白具有抗原性;HAV只有一个血清型。,一、生物学性状,.,7,HAV的电镜照片,Feinstone（1973）,.,8,HAV的结构,.,9,黑猩猩（orangutan）、绒猴、猕猴和我国猕猴属中的红面猴易感，经口服和静脉注射可以建立动物感染模型动物模型主要用于HAV的致病及免疫机制研究、疫苗研制和药物筛选,2、动物模型,一、生物学性状,.,10,HAV可在原代绒猴肝细胞或传代恒河猴胚肾细胞、人胚肺二倍体细胞、肝癌细胞中生长增殖，但速度缓慢，不引起细胞裂解,3、细胞培养,一、生物学性状,.,11,耐受乙醚、氯仿和酸比肠道病毒更耐热，60可存活4h，1005分钟可灭活在淡水、海水、泥沙、毛蚶、牡蛎、蛤蜊等中可存活数天至数月紫外线、氯、福尔马林处理均可破坏其传染性,4、理化特性,一、生物学性状,.,12,二、致病性与免疫性,1、传染源和传播途径传染源多为甲肝患者、处在甲型肝炎潜伏末期和黄疽出现前数日的患者，尤其是无症状的亚临床感染者，是最危险的传染源传播途径：粪口途径传播媒介：通过污染的水源、食物、海产品（毛蚶、泥蚶、醉蟹、牡蛎、蛤蜊）、食具等传播,.,13,毛蚶,牡蛎,.,14,2、HAV的致病机制,二、致病性与免疫性,.,15,NK细胞的杀伤作用 肝细胞溶解特异性细胞免疫IFN-分泌增加，促进肝细胞表达HLAHLA介导的CTL对肝细胞的细胞毒作用增强。,2、HAV的致病机制,二、致病性与免疫性,.,16,Cross intestines,Blood,Bile,Stool,Oral acquisition,.,17,甲型肝炎常见症状,流感样症状：急性起病，有畏寒、发热消化道症状: 厌食、恶心、腹痛、腹泻、消化不良黄疸（眼部及皮肤呈黄色）：90%的患者有黄疸转氨酶和血胆红素升高一般为自限性疾病，预后良好， 不发展成慢性肝炎和慢性携带者。,二、致病性与免疫性,.,18,.,19,单一的抗原抗体系统，即HAVAg和HAVAb无论显性感染还是隐性感染均能诱生出高效价抗-HAV 抗-HAVIgM阳性是甲肝的确诊依据 IgM在感染后仅持续存在3-6个月，IgG则可存在多年，终生免疫,3、HAV的免疫性,二、致病性与免疫性,.,20,.,21,.,22,四、微生物学检验,感染早期可检测血清中的抗HAV IgM流行病学调查可检测抗HAV IgG对已接种甲肝疫苗者检测中和型抗HAV直接检测抗原或用分子生物学方法检测病毒RNA：病人粪便,.,23,第二节 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus， HBV）,.,24,1963年Blumberg 发现澳大利亚 土著人血清中存在HAA。1968年才明确这种抗原与乙型肝炎（简称乙肝）有关。1970年Dane在电子显微镜下观察到HBV的形态，并命名为Dane颗粒。1986年将其列入嗜肝DNA病毒科。,Blumberg,概述,.,25,HBV感染的临床类型,无症状携带者重症肝炎急性肝炎慢性乙肝与肝硬化和肝癌密切相关,.,26,HBV流行久远、传播广泛，是全球性公共卫生问题：全球3.5亿人携带HBV我国为高流行区 感染率 60% HBsAg携带率 8%10% 慢性乙肝病人 1000万80%原发性肝癌与HBV慢性感染有关,.,27,.,28,一、生物学性状,1、形态与结构,1)大球形颗粒：Dane颗粒,42nm， 完整的病毒颗粒，具传染性 呈双层结构 外层 病毒包膜，含HBsAg、PreS1、PreS 内层 病毒的核衣壳，20面体对称 含HBcAg，dsDNA，DNA聚合酶,.,29,HBV结构模式图,.,30,2)小球形颗粒：22nm，主要由HBsAg组 成，不含病毒DNA及DNA多聚酶， 无感染性，分布在血液中 3)管 形 颗 粒： 22nm，长100-500nm， 主要由HBsAg组成，不含病毒DNA 及DNA多聚酶，分布在血液中,一、生物学性状,1、形态与结构,.,31,Dane 颗粒,.,32,HBV的小球形颗粒,.,33,HBV的管形颗粒,.,34,电镜下的HBV,.,35,2、HBV的基因组结构,基因组为不完全双链环状DNA 长链（负链），长度固定，3200 bp 短链（正链）：长链的50%100% 负链含4个ORF： S区、C区、P区、X区,.,36,.,37,3.HBV的复制,.,38,逆转录过程病毒DNA整合于宿主细胞2.1kbRNA调控HBsAg 产生，如过量复制，可释放入血，造成HBsAg持续阳性。,复制特点：,.,39,4、HBV的抗原抗体系统, 表面抗原(HBsAg)存在于三型颗粒中;在血液中大量存在，为保护性抗原，可刺激机体产生保护性抗体(抗HBs);是HBV感染的主要标志;不同的亚型，相同的a表位，互斥的亚型抗原表位 d/y， w/r，汉族adr，少数民族ayw;,.,40,PreS1、PreS2是HBV感染的标志;与肝细胞表面受体结合 抗PreS2存在时间较短，抗PreS1存在时间较长， 抗PreS1、抗PreS2能够阻断HBV与肝细胞的结合。,.,41, 核心抗原(HBcAg),仅存在于Dane颗粒中;不易在血液中检出;可在感染的肝细胞表面存在;刺激机体产生抗HBc（IgG、IgM）抗体。抗HBc不是保护性抗体。抗-HBc IgM阳性表示病毒在复制，抗-HBc IgG阳性是病毒既往感染的指标.,4、HBV的抗原抗体系统,.,42, e抗原(HBeAg),是PreC蛋白加工的产物;游离存在于血液中;为病毒复制及强传染性的指标：与病毒和DNA聚合酶的消长一致;产生抗HBe，具有一定的免疫力,是预后良好的征象,Pre-C区突变 免疫逃逸,4、HBV的抗原抗体系统,.,43,5、动物模型与细胞培养,1）动物模型 黑猩猩动物模型、鸭动物模型 作用：HBV的致病机制、免疫耐受、疫苗 效果及安全性评价。2）细胞培养 肝癌细胞、CHO细胞,一、生物学性状,.,44,6、抵抗力,抵抗力强于HAV；对低温干燥紫外线耐受；不被70乙醇灭活；高压灭菌、环氧乙烷、100 10min可灭活； 0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠灭活病毒，但不能消除HBsAg的抗原性。,一、生物学性状,.,45,二、致病性与免疫性,1、传染源：患者或无症状HBV携带者2、传播途径 血液及血制品：血液及血制品、注射、外科、牙科手术、针刺、共用剃刀或牙刷、皮肤黏膜微小损伤 母婴传播：胎盘、产道、哺乳 密切接触：性行为,.,46,3、HBV的致病与免疫机制,二、致病性与免疫性,HBV的致病机制尚未完全清楚 免疫病理反应以及病毒与宿主细胞间的相互作用是肝细胞损伤的主要原因,.,47,1）细胞免疫及其介导的免疫病理反应CTL直接杀伤识别肝细胞膜上的HLA-I类分子和病毒抗原 直接杀伤靶细胞 分泌细胞因子发挥的抗病毒效应CTL诱导肝细胞凋亡,二、致病性与免疫性,.,48,2）体液免疫及其介导的免疫病理反应,二、致病性与免疫性,特异性抗体HBsAb、PreS1-Ab和PreS2-Ab直接清除血循环中游离的病毒 免疫复合物沉积于肾小球基底膜、关节滑液囊等处，激活补体，导致型超敏反应 免疫复合物沉积于肝内，可使肝毛细管栓塞， 导致急性肝坏死，表现为重症肝炎。,.,49,3）自身免疫反应的免疫损伤： HBV感染使肝特异性脂蛋白抗原（LSP）暴露，LSP作为自身抗原诱导机体产生自身抗体，通过直接或间接作用，导致肝细胞损伤。,二、致病性与免疫性,.,50,4）免疫耐受与慢性肝炎：,二、致病性与免疫性,HBV免疫耐受产生的条件：特异性细胞免疫和体液免疫能力低下 HBV宫内感染，HBV特异性淋巴细胞克隆被排除；幼龄感染HBV，免疫系统尚未发育成熟病毒感染量大，致特异性T细胞被耗竭 机体不能有效地清除病毒，导致HBV持续性感染,.,51,过分强烈的细胞免疫 大面积肝细胞损伤 爆发型肝炎（重症肝炎） 免疫功能正常 隐性感染或急性肝炎 免疫功能低下 慢性肝炎或慢性活动性肝炎 免疫耐受 无症状携带者,免疫具双重性,.,52,4、病毒变异与免疫逃逸,二、致病性与免疫性,S基因变异：a抗原表位基因发生变异，导致HBsAg抗原性改变, 出现免疫逃逸和“诊断逃逸”。PreC基因的变异：1896 nt G-A突变导致第28位TGG变为TAG，使PreC基因不能转译出完整的HBeAg。C基因的变异，导致HBcAg抗原位点的改变，出现免疫逃避。,.,53,5、HBV与原发性肝癌,1）流行病学方面90%以上HCC感染过HBVHBsAg Carrier患HCC的危险性是正常人的217倍2）动物模型 出生时感染土拨鼠肝炎病毒的土拨鼠3年后100% 与病毒整合到染色体上的X基因表达激活原癌基因、生长因子的表达有关,二、致病性与免疫性,.,54,乙型肝炎的特点,我国约有40%-60%人群曾受到过HBV的感染。表现急性乙肝的仅占0.1%-1%，亚临床30%-75%，慢性乙肝1%-5%，乙肝病毒携带7%-20%。急性乙肝如治疗不彻底，10%患者可转为慢性乙肝。,.,55,三、微生物学检验,HBV抗原、抗体检测(两对半检查)HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe抗HBc：HBV DNA ：可定性或者定量检查，作为药物疗效的考核指标血清DNA多聚酶：病毒复制的指标,.,56,HBsAg HBV感染的重要指标 感染早期出现 急性肝炎恢复后14个月内消失 持续6个月以上提示为慢性肝炎或HBV携带者 HBsAb 中和抗体 见于恢复期、既往感染、疫苗接种后 阳性提示机体对乙肝有免疫力,.,57,HBcAg不易检出阳性提示病毒颗粒存在血液具有传染性,HBcAb-IgM 阳性提示HBV处于复制状态，具有强的传染性HBcAb-IgG 低滴度提示既往感染， 高滴度高提示急性感染,.,58,HBeAg 阳性提示病毒在体内复制，具有传染性HBeAb 机体获得免疫力 病毒复制减弱 传染性降低,.,59,判断有无传染性的指标,1. 血清HBsAg（+）、 HBeAg （+）2. 抗-HBc IgM （+）3. 血清DNA多聚酶（+）4. HBV DNA（+）,.,60,病毒抗原抗体系统检测结果分析,.,61,1 2 3 4 5 6 7 8 9,.,62,四、防治原则,筛选供血员加强传染源的管理保护易感人群 HBsAg血源疫苗 主动免疫 HBsAg基因工程疫苗 多肽疫苗、核酸疫苗 被动免疫： HBsAb免疫球蛋白,.,63,四、防治原则,无特效疗法-IFN ：500万u/次，3次/周，6月 拉米夫定（lamivudine）：终止前基因组的合成，但对肝细胞核内cccDNA的合成无作用 泛昔洛韦（famciclovir）：阻碍HBV cccDNA的产生，抑制DNA多聚酶，干扰逆转录过程 苏拉明(suramin)：具有抗逆转录病毒的活性，可抑制HBV DNA的活性，从而抑制HBV的复制 单磷酸阿糖腺苷（Ara-A）,.,64,第三节 丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）,.,65,一、 生物学性状,40-60nm球形有包膜单正链RNA，基因组为线状，9.5kb，一个ORF,.,66,HCV的基因结构,内部核糖体结合位点 抗原性强,高度变异,基因组为ss+RNA, 9.5 kb仅有一个长开放阅读框架（ORF）,C E1 NS1/E2 NS2 NS3 NS4 NS5,5,3,.,67,C区编码的核心蛋白，组成病毒的核衣壳 核心蛋白抗原性强，含有多个CTL识别位点。 E1区和E2/NS1区编码包膜糖蛋白E1和E2 具有高度变异性，导致的免疫逃逸作用是病毒在体内持续存在、感染易于慢性化的主要原因。,.,68,培养特性 有严格的宿主限制性 黑猩猩为敏感动物 体外培养困难,一、 生物学性状,.,69,二、致病性与免疫性,传播途径似HBV是引起输血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潜伏期： 4-8周感染易于慢性化，部分可发展成肝硬化和肝癌HCV与HBV重叠感染易发展成重症肝炎诱发肝外损伤：肾小球肾炎 免疫力不牢固,.,70,病毒的直接致病作用病毒在肝细胞内复制，直接损伤肝细胞 免疫病理作用通过释放穿孔素，CTL直接杀伤HCHCV诱导HC表达Fas，CTL与Fas结合，诱导HC凋亡,致病机制,二、致病性与免疫性,.,71,丙型肝炎的特点,我国丙肝病毒携带者的比例在2%-5%随着年龄的增长，丙肝病毒携带率亦增高易感人群感染HCV后，慢性化的比例高达50%以上乙肝患者容易重叠HCV感染,.,72,三、微生物学检验,1.RT-PCR、荧光定量PCR技术检测病毒RNA 用于丙型肝炎的快速诊断 2.ELISA法检测特异性抗体 用于丙型肝炎的诊断、筛选献血员和流行 病学调查,.,73,第四节 丁型肝炎病毒（hepatitis D virus，HDV）,.,74,一、 生物学性状,HDV为缺陷RNA病毒球形，直径35-37 nm，有包膜病毒颗粒内部由HDV RNA和丁型肝炎病毒抗原（HDAg）组成,1、形态与结构：,.,75,一、 生物学性状,2、基因组：ss-RNA，约1.7 kb 编码丁型肝炎病毒抗原（HDVAg）包膜蛋白HBsAg由HBV编码 必须与HBV共感染才能复制完整的病毒颗粒抑制HBV的增殖，HDV亦不能复制,.,76,HDV的结构,Rizzetto于1977年首先发现，又称 抗原35-37nm球形颗粒；1.7Kb-ssRNA含9个ORF,.,77,HDAg,HDV形态和结构图,.,78,二、致病性与免疫性,传播途径： 与乙型肝炎相同HDV感染的临床类型： 可表现为急性、慢性肝炎或无症状携带者感染方式： 有联合感染或重叠感染两种方式 联合感染：HBV和HDV同时感染 重叠感染：HBV感染者再发生HDV感染 导致原有的乙型肝炎病情加重与恶化,.,79,二、致病性与免疫性,致病机制： 可能与病毒对肝细胞的直接损伤作用和机体的免疫病理反应有关,.,80,三、微生物学检验,检测HDAg：检测血清或肝细胞内HDAg检出HDAg是HDV感染的可靠证据，是HDV感染活动的指标血清中HDV抗体检测是目前诊断HDV感染的常规方法检出抗-HD IgM有早期诊断价值 抗-HD IgG 持续高效价是慢性HDV感染的指标,.,81,第五节 戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）,球形，无包膜直径32-34nm单正链RNA，3个ORF两个血清型,.,82,抵抗力：HEV对