鸡胚接种技术ppt演示课件

1,.,鸡胚接种技术,2,.,鸡胚接种技术 概况,鸡胚接种的优点：是个有机体，有神经和血管分布及脏器构造，为病毒生长提供丰富营养物质和合适的环境。组织分化程度较低，对大多数病毒较敏感，病毒繁殖量高。很少携带病毒或细菌，对接种的病毒不产生抗体。来源充足、经济，操作简便。,3,.,鸡胚接种技术 概况,鸡胚接种的缺点：病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征，必须利用另外的实验来证明病毒的存在。被母鸡食入的抗生素会传递给鸡胚，使接种病毒繁殖受到抑制。鸡胚本身可能携带病毒，影响病毒接种及实验结果操作不当污染，导致鸡胚死亡,4,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 0,5,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 1,鸡胚外观无明显变化在卵黄上可见到椭圆形的胎盾，是未来的胚区,心脏、血管、消化道、脊柱、神经系统、头、眼开始形成。,6,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 2,卵黄囊、羊膜、绒毛膜开始形成。胚盘被红色血管围成樱桃形或椭圆形。胚胎中可见一搏动的原始心脏。,7,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 3,鼻、腿、翅开始形成，器官出现。尿囊开始长出，胚胎的位置与蛋的长轴垂直。胚胎与延伸的卵黄囊血管形似蚊子。,8,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 4,尿囊和羊膜腔形成。卵黄体积继续增大，卵黄囊血管包围卵黄近1/3。胚胎与卵黄囊血管形似蜘蛛。,9,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 5,生殖腺已性分化，胚胎出现了两性的区别。面部和鼻部开始有了雏形。胚胎弯曲成“C”形。眼的黑色素大量沉积，照蛋可明显看到黑色的眼睛,10,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 6,胚体已初具翼和腿的外形，眼睛黑色素更多。尿囊增长迅速，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖羊膜与部分卵黄。卵黄囊血管分布在卵黄面积达2/3以上。可见头部和躯干部两个小圆团。,11,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 7,卵黄体积达到最大程度，胎儿的外形已具备禽类的特点。头和眼所占的比例相当大，前后肢分化明显。照蛋时胚胎在羊水中不容易看清楚。,12,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,鸡胚的发育过程：Day 811,8,9,10,11,13,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,约10日龄鸡胚的结构示意图,14,.,鸡胚接种技术 鸡胚的结构与生理,卵壳与壳膜卵壳位于最外层的石灰质硬壳，上有细孔，进行气体交换。壳膜位于卵壳的下层，能使气体和液体分子交换。培养鸡胚时需要控制一定的湿度和气流。气室呼吸和调节压力绒毛尿囊膜位于壳膜之下，起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是在绒毛尿囊膜的血管内通过卵壳孔进行。,15,.,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育和检查,羊膜与羊膜腔羊膜为胚胎最内层包被；羊膜腔内有羊水，胚胎浸泡于其中。尿囊腔位于绒毛尿囊膜与羊膜之间，为胚胎的排泄器官。卵黄囊主要营养的存储场所，在胚胎发育早期供给鸡胚营养卵白在胚胎发育晚期供给鸡胚营养,16,.,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育和检查,受精鸡卵的选择接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生物，最好来自无特定病原体(Specified Pathogen Free, SPF)鸡群。受精卵的壳最好是白色的，利于检卵灯观察鸡胚的发育情况。受精卵必须新鲜，保存在520不超过10天。,17,.,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育和检查,鸡胚的孵育孵育温度为3839孵育湿度为4070%翻卵：防止蛋白与壳膜粘连，促进羊膜运动和空气流通。每天180转动鸡胚12次。通风：为了排出CO2和吸入O2。,18,.,鸡胚接种技术 鸡胚的孵育和检查,检卵：在胚胎发育的早期，不易辨认。孵育45日后即可于检卵灯上检测鸡胚受精与否及发育情况未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见血管和鸡胚痕迹。活胚胎：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较大的鸡胚还可见到胎动。但孵育1415天以后胎动不明显或无胎动。死胎：血管昏暗模糊，没有胎动。,19,.,鸡胚接种技术 鸡胚的接种途径和方法,鸡胚的接种途径：羊膜囊接种 绒毛尿嚢膜接种尿嚢腔接种卵黄嚢接种,20,.,鸡胚接种技术 鸡胚的接种途径和方法,根据病毒种类选择适宜的接种部位：羊膜囊和尿囊腔同时接种法：流感病毒绒毛尿囊膜接种法：牛痘、天花、单纯疱疹病毒卵黄囊接种法：虫媒病毒（如登革热病毒、黄热病病毒）,21,.,鸡胚接种技术 鸡胚的接种途径和方法,羊膜囊接种：主要应用于临床材料中分离流感病毒。接种到羊膜囊中的病毒可遍及胚胎各种组织和细胞，使具有特定细胞亲嗜性的病毒被充分利用，从而提高病毒繁殖的可能性。病毒也可被排泄到尿囊腔，使尿囊液中含有大量病毒。分离病毒时，可同时收获羊水和尿囊液,22,.,鸡胚接种技术 鸡胚的接种途径和方法,绒毛尿囊膜接种：主要用于分离和繁殖在绒毛尿囊膜上产生斑点状和痘疱状的病毒，如牛痘、天花、单纯疱疹和鸟痘病毒。可在绒毛尿囊膜上滴定这些病毒，通过产生斑和痘的数目来计算感染性病毒颗粒的数目。还可用于抗体滴定，因为斑和痘数目减少的程度与抗体浓度有关。,23,.,鸡胚接种技术 鸡胚的接种途径和方法,尿囊腔接种：用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养。这些病毒被接种到尿囊腔后，可